EB1蛋白在调节微管动态、纺锤体定位和染色体稳定性中的作用

EB1(the end-binding protein 1)蛋白家族是一群广泛存在且高度保守的微管相关蛋白,存在于从酵母到人类的广泛的生物体中.它与微管正极和中心体结合,参与了绝大部分基于微管的生理过程,包括:维持细胞极性,调节染色体稳定性,有丝分裂纺锤体的定位,将微管锚定到成核位点.自从1995年,Su等人在人细胞中发现了EB1基因,各种生物体中EB1的同源物质被相继报道.十年来,人们通过对不同生物体的研究,试图揭开EB1在细胞中的分布以及它的生理功能.然而到目前为止,对于EB1的了解还非常有限.本文结合国外的研究成果,对EB1蛋白在调节微管动态、纺锤体定位和染色体的稳定性方面以及它与APC(the adenomatous polyposis coli)之间的相互作用作以综述.

细胞周期检测点激酶2在调节DNA损伤以及维持染色体稳定中的作用

细胞周期检测点激酶2(cell cycle checkpoint kinase 2,CHK2)是由抑癌基因CHEK2编码的丝氨酸/苏氨酸激酶,是DNA双链断裂后参与DNA修复应答反应的重要的信号转导蛋白。CHK2被毛细血管扩张性共济失调突变基因(ataxia telangiectasia mutated,ATM)磷酸化后,CHK2可磷酸化多个底物,包括细胞分裂周期25同源物(cell division cycle 25 homolog,Cdc25)、P53、乳腺癌遗传易感基因1(breast cancer 1,early onset,BRCA1)蛋白、E2F-1转录因子和早幼粒细胞白血病(promye-locytic leukemia,PML)蛋白,使细胞周期进程发生阻滞,促进细胞对DNA损伤进行修复或诱导凋亡。细胞在没有DNA损伤时,CHK2也可以将BRCA1磷酸化,这一过程对保持有丝分裂纺锤体组装的正确性以及染色体稳定性十分必要。基于在DNA损伤和细胞有丝分裂中的作用,CHK2有望成为抗肿瘤治疗的靶点。

东北红豆杉愈伤组织细胞分裂及染色体稳定性

研究了继代 4年的东北红豆杉愈伤组织细胞分裂过程 ,并对其染色体数目的稳定性进行了讨论及染色体核型进行了分析。取转接 3～ 4d的东北红豆杉愈伤组织细胞 ,制作染色体压片 ,可观察到细胞有丝分裂前、中、后、末期的染色体形态 ;未观察到无丝分裂过程。继代 4年的愈伤组织细胞的染色体倍性十分稳定 ,体细胞染色体数目及核型 2n =2 4。

不同环境因素地区居民染色体稳定性畸变研究

目的研究生活在不同环境诱变因素地区居民的染色体稳定性畸变。方法外周血采自20名居住北京超过40年的非吸烟居民,个人辐射剂量通过使用便携式个人剂量计随身测量24h所得的剂量估算累积剂量,通过荧光原位杂交(FISH)方法对外周血淋巴细胞进行染色体易位的分析,结果与高本底地区15名非吸烟者和6名儿童、对照地区的16名非吸烟者和8名儿童的染色体易位结果进行了比较。结果高本底地区和对照地区儿童的染色体易位率差异无显著性,但都显著低于3个地区老年非吸烟者的染色体易位率(P<0.01)。3个地区老年非吸烟者的染色体易位率之间差异无显著性。结论增龄是对诱发染色体稳定性畸变最有影响的因素,环境诱变剂有增加染色体稳定性畸变率趋势,高本底地区升高的天然辐射效应由于在正常生活环境中的环境诱变剂的更大影响而无法观察到。

应用米非司酮中期引产对胎儿脐血染色体稳定性影响的临床研究

目的:探讨米非司酮用于中期引产对胎儿脐血染色体稳定性的影响。方法:选择中期引产对象60例,随机分成研究组和对照组各30例,研究组口服米非司酮150mg,服药后6h行水囊引产;对照组行常规水囊引产。娩出胎儿后,立即取母血及脐血培养,姐妹染色单体交换率(SCE)分化及分析。结果:研究组母血及脐血SCE频率分别为(4.16±0.98)次和(3.74±1.31)次,对照组母血及脐血分别为(3.66±1.20)次和(3.23±0.76)次,两组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:米非司酮用于中期引产并未引起胎儿脐血染色体稳定性的改变。

挥发性有机物混合物对人支气管上皮细胞系转化及染色体稳定性的影响研究

目的为探讨化学混合物联合致癌的机制,揭示恶性转化与染色体不稳定性之间的关系,本研究观察了挥发性有机物(VOC)混合物(以VOCs表示)对人支气管上皮细胞系BEAS-2B转化和染色体稳定性的影响。方法用VOCs作为诱导剂,以液体染毒后测定BEAS-2B细胞的半数致死量(LC50),以低剂量(8%LC50)对BEAS-2B细胞进行诱导,获得诱导细胞。观察细胞生长特性改变并筛选诱导克隆,然后用细胞遗传学方法 (G带染色法)观察诱导细胞染色体畸变情况。结果 BEAS-2B细胞在VOCs作用后细胞逐渐变大、变圆,细胞质丰富,并伴有多角形或不规则形;核嗜碱深染,体积增大,核仁增多;细胞复层生长,排列紊乱,细胞克隆为无序的条索状团块状排列。经VOCs诱导后细胞倍增时间〔(1.79±0.02)d〕较对照细胞〔(2.08±0.03)d〕缩短,而饱和密度〔(529.1±31.6)×104/ml〕、最大增殖倍数〔(104.8±6.2)倍〕均高于对照细胞〔(321.2±13.1)×104/ml和(54.6±5.4)倍〕,差异均有统计学意义(P<0.01)。VOCs诱导细胞第15代可在软琼脂培养基内形成典型的甚至肉眼可见的阳性细胞克隆,克隆形成率(35.02±7.80)%高于对照细胞(0.13±0.05)%,差异有统计学意义(P<0.01)。对照细胞与诱导细胞的染色体核型分布比较,差异有统计学意义(P<0.01);诱导细胞中二倍体(2n=46)比例降低,出现了一定数量的非整倍体(77条、80条染色体)、大量亚二倍体(<2n)、超二倍体(>2n&<4n)和多倍体(≥4n)细胞,其非稳定性畸变频率(67%)高于对照细胞(4%),差异有统计学意义(P<0.01)。结论 VOCs可使BEAS-2B细胞发生转化,并影响细胞染色体的稳定性,使其发生畸变并向恶性化方向发展。

染色体不稳定性与早期肺癌患者病理类型及预后的相关性分析

目的:探究染色体不稳定性与早期肺癌患者病理类型及预后的相关性。方法:选取2020年8月—12月铜仁市人民医院收治的40例拟行手术治疗的早期肺癌患者为研究对象,收集患者性别、年龄、病理类型、染色体不稳定性、预后等资料,根据不同病理类型将其分为原位腺癌(AIS)/微浸润型腺癌(MIA)组和浸润性腺癌(IAC)组,根据术后2年随访情况将其分为存活组和死亡组,分析染色体不稳定性与早期肺癌患者病理类型及预后的相关性。结果:40例患者,根据不同病理类型分为AIS/MIA组(21例)和IAC组(19例),其中AIS/MIA组患者基因杂合性拷贝中心区域缺失(cnLOH)占9.52(2/21)、增加占52.38(11/21)、缺失占33.33(7/21)、微小等位基因不平衡(AI)占4.76(1/21),IAC组患者基因cnLOH占42.10(8/19)、增加占26.32(5/19)、缺失占10.53(2/19)、微小AI占21.05(4/19),两组间差异具有统计学意义(P<0.05)。40例患者随访(18.35±2.64)个月,根据是否存活分为存活组(24例)与死亡组(16例),其中存活组患者基因cnLOH占12.50(3/24)、增加占45.83(11/24)、缺失占33.33(8/24)、微小AI占16.66(4/24),IAC组患者基因cnLOH占43.75(7/16)、增加占31.25(5/16)、缺失占6.25(1/16)、微小AI占6.25(1/16),两组间差异具有统计学意义(P<0.05)。基因cnLOH的早期肺癌患者预后明显比基因增加、缺失及微小AI差(P<0.05)。结论:染色体不稳定性与早期肺癌患者的病理类型及预后具有一定的相关性。

喉癌STK15基因表达和染色体不稳定的研究

为研究喉鳞状细胞癌中STK15基因表达及其与染色体不稳定的相关性 ,提取 5 0例喉鳞状细胞癌及配对癌旁正常组织和人喉鳞状细胞癌Hep - 2细胞系的RNA ,反转录合成cDNA ,以 β -actin为内对照进行PCR扩增 ,用软件分析电泳结果 ,研究喉癌中STK15基因表达的水平 ;以Hep - 2细胞系为代表应用常规和高分辨G显带方法进行核型分析。在 5 0例喉癌中 ,癌组织STK15表达高于配对癌旁正常组织的有 34例 ,占 6 8% ,经统计学分析 ,肿瘤组与对照组差异显著 ,Hep - 2细胞系中STK15基因表达高于内对照 β-actin ;Hep - 2细胞系中存在显著的染色体不稳定 :染色体数目变化于 4 3～ 84条之间 ,众数为 6 9～ 74条 ,结构畸变主要表现为 13条标记染色体。本研究首次发现STK15基因在喉癌中表达增高 ,它可能通过中心体异常而引起染色体不稳定 ,在喉癌的发生、发展中发挥一定作用。

染色体不稳定性及其与妇科肿瘤形成关系的研究进展

随着细胞遗传学与肿瘤病因学研究的不断深入 ,染色体不稳定性与肿瘤形成的关系越来越受到人们的重视。作者就染色体不稳定性的分子基础和表现 ,以及它在妇科肿瘤方面的研究进展作一综述。

口腔鳞癌细胞染色体不稳定潜在机制的探讨

目的:探讨口腔鳞癌细胞染色体不稳定形成的潜在机制。方法:对7株非整倍体口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞系细胞,采用荧光活化细胞分类(FACS)及免疫荧光染色(IF)的方法,观察非整倍体OSCC细胞有丝分裂检查点(又称纺锤体检查点)功能及中心体状况。结果:7株非整倍体OSCC细胞系细胞经过0.2μg/ml噻氨酯哒唑(Noco鄄dazole)处理18小时后,都出现了高比例分裂中期(G2/M)细胞的累积,提示这些细胞有丝分裂检查点功能正常;而中心体异常(数目增多及形态的异常)可以在所有非整倍体OSCC细胞系中观察到,异常细胞百分率0.4%～18.8%。结论:OSCC细胞CIN表型与有丝分裂检查点功能异常之间可能无直接机制上的联系,但中心体异常可能是OSCC细胞染色体不稳定形成的潜在机制之一。

甲醛对人支气管上皮细胞系转化和染色体不稳定性影响的研究

目的为探讨化学致癌的机制,揭示恶性转化与染色体不稳定性之间的关系,本研究考察甲醛对人支气管上皮细胞系转化和染色体稳定性的影响。方法用甲醛作为诱导剂,以液体染毒后测定BEAS-2B细胞的LC50,以低剂量(20%LC50)对细胞进行诱导,观察细胞生长特性改变并筛选诱导克隆。然后用细胞遗传学方法(G带染色法)考察诱导细胞染色体畸变的情况。结果甲醛作用后细胞生长速度加快,且呈现无限增殖趋势。在后期(15代)具有很强的锚着独立性生长能力,表明诱导细胞已发生慢性转化。诱导细胞核型由2倍体转化为近2倍体、非整倍体和多倍体等核型同时存在,染色体稳定性降低,呈现丢失、内复制、易位、断裂、双/三着丝粒,并伴有大量非稳定性畸变。结论甲醛可使BE-AS-2B细胞发生转化,并影响细胞染色体的稳定性,使其发生畸变并向恶性化方向发展。

癌症高表达蛋白Hec1与染色体不稳定性

癌症高表达蛋白Hec1是纺锤体检验点信号途径中的一个蛋白,在有丝分裂期位于着丝粒。Hec1-Nuf2复合物是招募纺锤体检验点复合物Mad1/Mad2的重要结构基础。Hec1蛋白可以与26S蛋白酶体亚基相互作用抑制其降解细胞周期素功能。Hec1是用酵母双杂交方法寻找与Rb相互作用蛋白时发现的,Rb可通过与Hec1相互作用调节Smc1与DNA的结合能力,从而参与M期调控。Hec1主要在G2/M期表达,激酶Nek2磷酸化Hec1是其发挥功能的关键。Hec1在一些肿瘤细胞中高表达并且在部分肿瘤组织中表现扩增。Hec1基因的功能异常会引起严重的染色体分离障碍,从而导致染色体不稳定,而染色体不稳定性与肿瘤的发生、发展密切相关。所以Hec1可能成为肿瘤基因治疗的一个新的靶点。

γ射线诱发鼠骨髓干细胞染色体不稳定性传递及时相分析

１３７Ｃｓ－γ射线可以诱发鼠骨髓干细胞染色体不稳定性的延迟表达。结果显示１）鼠骨髓细胞经γ射线照射后，体外培养１４ｄ，在其ＣＦＵ－Ａ中仍有不稳定性染色体畸变出现。２）Ａ４细胞经γ射线照射后，其染色体不稳定性畸变的延迟表达可持续３０ｄ以上，并有一定的剂量－效应关系，多数时间点具有统计学意义。３）γ射线照射ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，染色体不稳定性的体内传递可持续３０ｄ以上，并在第３０ｄ时出现染色体畸变频率的异常升高。染色体不稳定性延迟表达的结果，一方面可能使细胞死亡，另一方面可能使细胞的基因不稳定性遗传下来，并最终导致细胞的癌变。

染色体不稳定的潜在机制及其与口腔癌发生的关系

在口腔癌发生发展的影响因素中,染色体不稳定表现扮]了十分重要的角色。其中包括染色体数目异常和染色体结构改变。前者由于有丝分裂检查点缺陷和中心体异常,导致不正常的染色体分离。染色体结构改变与DNA损伤检查点和DNA双链断裂点修复系统缺陷有关,引起染色体易位或断裂发生。相关研究已证明,染色体不稳定发生的分子遗传学异常改变与口腔癌的发生发展密切相关。

甲醛对人支气管上皮细胞系染色体不稳定性的研究

背景与目的:为探讨染色体不稳定性与细胞恶性转化之间的关系,揭示化学致癌的机制,本研究以甲醛为诱导剂,研究化学致癌物甲醛作用于人支气管上皮细胞系后,对人支气管上皮细胞染色体稳定性的影响。材料与方法:用甲醛作为诱导剂,以液体染毒方式处理细胞,检测染毒后细胞的LC50,以其低剂量(20%LC50)对细胞进行诱导并筛选诱导克隆。然后采用细胞遗传学方法(G带染色法)考察染毒后甲醛诱导的人支气管上皮细胞系(BEAS-2B)染色体畸变的情况。结果:甲醛作用后,诱导细胞的核型由2倍体转化为近2倍体、非整倍体和多倍体等核型同时存在。诱导细胞染色体稳定性降低,呈现大量染色体畸变,包括染色体丢失、内复制、易位、断裂、双/三着丝粒,同时伴有大量非稳定性畸变。结论:甲醛可影响BEAS-2B细胞染色体的稳定性,使其发生畸变并最终使细胞向恶性化方向发展。

染色体不稳定性与肿瘤的研究新进展

染色体不稳定性定义为持续获得或丢失整条染色体或染色体片段,是基因组不稳定性的主要原因。多数实体瘤具有此特征性表现。染色体不稳定性与紫杉烷类药物固有耐药,与实体瘤中的获得性多重耐药和较差预后具有相关性。目前证据显示,铂类药物比如卡铂对染色体不稳定性肿瘤特异性敏感。

散发性结直肠癌的染色体不稳定研究及其临床病理意义

目的 探讨散发性结直肠癌（sporadic colorectal cancer,SCRC）的DNA倍体异常和染色体畸变的数目、部位及其与临床病理特征之间的关系.方法 将40例SCRC肿瘤标本制备成单细胞悬液,经染色后进行流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测,分析肿瘤细胞DNA倍体;采用比较基因组杂交技术（comparative genomic hybridization,CGH）在全基因组水平对40例SCRC进行染色体畸变检测.结果 40例SCRC患者标本中,二倍体的比例为42.5%,异倍体为57.5%,DNA倍体与TNM分期有密切关系,分期越高,异倍体的比例越高,差异有统计学意义（P＜0.05）.CGH检测的所有病例均有不同程度的染色体畸变,平均每例畸变数为7.55,常见的染色体扩增区域有：20q、12q、13q、7p等,常见缺失区域有18q、5q、4q、8p等.TNM分期中Ⅲ～Ⅳ期SCRC的染色体畸变数高于Ⅰ～Ⅱ期（6.00±2.76 vs 8.70±2.84,P＜0.05）.不同肿瘤部位、分化程度、组织学类型SCRC的DNA倍体差异无统计学意义（P ＞0.05）.二倍体肿瘤的染色体畸变数明显少于异倍体肿瘤（6.35±3.35 vs 8.43±2.59,P＜0.05）.结论 染色体不稳定在SCRC中普遍存在,是SCRC病情进展的基础,染色体畸变比DNA倍体异常更为常见.

中心体异常扩增和染色体不稳定性

中心体作为主要微管组织中心在细胞周期事件中起着重要的作用。异常中心体可产生纺锤体异常,使染色体错误分离,引起染色体不稳定性和非整倍体的形成。中心体异常同染色体不稳定性一样是肿瘤细胞的一个普遍特征,并且可出现在肿瘤发生的早期阶段。中心体异常在肿瘤的发生发展演化过程中可能具有重要作用。现综述中心体的结构、功能、复制和调控,阐述肿瘤中中心体异常的表现和导致中心体扩增的可能机制及中心体扩增与染色体不稳定之间的相关性。

环境污染对人体染色体不稳定性的影响

目的 :通过对 2 1例患儿进行污染源接触的追查 ,探讨环境污染对人体染色体不稳定性及有关疾病的影响。方法 :通过回顾性调查、遗传咨询、细胞遗传学染色体检查及 B超辅助检查。结果 :因职业需要及对污染源的危害认识不足 ,所致子代病残。结论 :环境污染可损伤胚胎或胎儿体细胞 DNA,引起细胞突变致染色体不稳定或畸变 ,使器官形成过程中出现异常 ,导致胎儿死亡 (流产 )