人结直肠癌细胞周期各时相中双微体存在形式及复制分离时期的分析

目的探究双微体(Double minute chromosomes,DMs)在肿瘤细胞周期各时相内的主要存在形式,明确DMs的复制、分离时相。方法通过无血清饥饿法阻滞人结直肠癌细胞COLO 320DM周期进展后,取花萼海绵体诱癌素A(Calyculin-A)诱导间期细胞以染色质超前凝集制备核型样本。用秋水仙素处理COLO 320DM细胞以获取有丝分裂(M)期细胞进行核型分析。在普通光学显微镜下观察并拍摄DNA合成前期(G1期)、DNA合成后期(G2期)、M中期、M后期和M末期核型,并统计DMs数量。结果DMs在G1期、M后期和M末期时相细胞中主要以单体形式存在;在G2期和M中期时相细胞中主要以双体形式存在。结论单体型DMs在S期发生复制后由单体转变为双体,双体型DMs在M后期完成分离并由双体转变为单体。