褪色HE染色切片ALK基因融合检测可行性探索

目的 探索利用HE染色切片褪色样本进行ALK基因融合检测的可行性。方法 选取3例ALK基因融合阳性的福尔马林固定石蜡包埋(formalin fixed and paraffin embedded,FFPE)组织样本的HE染色切片,分别经盐酸乙醇褪色法和高锰酸钾草酸氧化漂白法褪色后,提取RNA,采用荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)技术,检测ALK基因融合。结果 从经盐酸乙醇褪色法或高锰酸钾草酸氧化漂白法褪色的HE染色切片中提取的RNA的纯度与从对照切片中提取者无显著差异,但其浓度较从对照切片中提取者显著降低。在模板量相同的条件下,经盐酸乙醇褪色的HE染色切片与对照组切片均检测到明确的ALK基因融合阳性,而经高锰酸钾草酸褪色的HE染色切片无任何曲线升起。从经盐酸乙醇褪色的HE染色切片中提取的RNA的完整性与从对照切片中提取的RNA的完整性无差异,但显著高于从经高锰酸钾草酸褪色的HE染色切片中提取者。为保证研究的准确性,本研究采用免疫组织化学与荧光原位杂交法对选取的ALK基因融合阳性样本进行验证,结果发现所选样本均为明确阳性。结论 HE染色切片经盐酸乙醇褪色后提取的RNA可以用于ALK基因融合检测。

PDCA循环法持续改进免疫组化染色切片质量

免疫组织化学技术是病理科极其重要的诊断工具,其在肿瘤的分类分型、鉴别诊断、起源判断、分子病理等方面发挥着重要作用。免疫组化染色切片质量直接关系到临床病理诊断和精准医学时代的精准治疗。免疫组化染色切片优良率是病理科核心质量控制指标。

激光扫描共聚焦显微镜在人胆管癌组织免疫荧光染色切片观察中的应用

目的 :探讨利用激光扫描共聚焦显微镜鉴定单克隆抗体特异性。方法 :正常人胆管组织、正常人肝组织及人胆管癌组织切片经免疫荧光染色后置于普通荧光显微镜及激光扫描共聚焦显微镜进行观察 ,比较二者效果。结果 :与普通荧光显微镜相比 ,激光扫描共聚焦显微镜能清晰地显示染色组织的荧光染色部位及强弱 ,能较好地显示染色组织的形态 ,显示出良好的准确性及精确性。结论 :激光扫描共聚焦显微镜在免疫荧光染色切片的检测中具有准确、特异、清晰的特点 。

三子养亲汤对哮喘小鼠血清CysLT1 mRNA表达及肺组织HE染色切片的影响

目的:探讨三子养亲汤对哮喘小鼠血清Cys LT1mRNA表达及肺组织HE染色切片的影响。方法:将180只C57BL小鼠随机分为三子养亲汤低、中、高剂量组,孟鲁司特组,哮喘组,正常组6组,除正常组外所有小鼠建立哮喘模型。药物组依次灌入浓度为0.54 g/m L、1.08 g/m L、2.16 g/m L的三子养亲汤煎剂2 m L,0.004 g·kg-1·d-1孟鲁司特2 m L,疗程14 d。采用RT-PCR法检测小鼠血清CysLT1mRNA的表达,并观察肺组织HE染色切片。结果:SZ-M组、SZ-H组可明显减少Cys LT1mRNA的表达,SZ-H组还能有效减轻哮喘模型肺组织的病理改变。结论:三子养亲汤可有效减少哮喘模型CysLT1mRNA表达,也能改善小鼠肺组织HE染色切片的结果。

HE染色切片褪色分析及解决方法

组织学与病理学最常用的染色方法是苏木精(Hematoxylin)伊红(Eosin)染色法,简称HE染色法.HE染色切片标本是学生观察最多的一种切片.但在操作中,由于种种原因,切片经数年后,易褪色,直接影响观察效果.就这一现象的成因与解决方法提出如下浅见.

H-E染色切片灰染修复方法的比较

组织切片在常规 H-E 染色中,有时会出现染色模糊不清（灰染）的现象,这给切片的判读造成困难.这一问题的形成原因及补救方法,有过文献报道但效果各异[1-3].本研究采用几种不同的方法对灰染的组织切片进行补救并比较了各自的效果,现介绍如下.

HE染色切片质量欠佳的原因及处理

病理切片HE染色的目的是将胞核染成蓝色，胞浆染成深浅不等的红色，使整个组织细胞的基本形态清晰可见，核、浆染色形成鲜明对比。实践中我们发现并非每一张切片的染色都能达到满意效果，时常会出现个别片子色调不正、颜色对比不协调、染色不匀、模糊不清、似有片状“蜡样物”的灰染现象，使切片的质量和诊断的准确性受到影响。

苏木素-伊红染色切片褪色的解决办法

苏木素-伊红（hematoxylineosin staining,HE）染色法是石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木素染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。

免疫染色切片用高压法与微波法进行抗原修复的比较

用石蜡包埋组织做免疫组织化学染色是临床病理学用于肿瘤研究、诊断和治疗的重要辅助手段之一。由于常规组织处理过程中造成的抗原封闭等原因，使一些抗原不能较好的表达出来或者表达微弱。为了恢复组织的抗原性和提高组织对抗原的敏感程度，笔者采用高压法和微波法对组织...

HE染色切片褪色后免疫组织化学染色抗原修复方法

经甲醛固定的组织，由于各种交联键的形成，引起蛋白质的空间结构的改变，最终导致部分或全部的抗原决定簇被封闭，从而影响免疫组织化学检测的敏感性。因此，进行免疫组织化学检测时，绝大多数抗体需要进行抗原修复，以达到最理想的检测效果。为了防止脱片，用于免疫组织化学检测的组织切片几乎都是硅化玻片捞贴的，而普通玻片（即未经APES胶或多聚赖氨酸处理的玻片）捞贴的并已做HE染色的组织切片能否用于免疫组织化学检测？其处理方法与硅化玻片捞贴的组织切片是否一致？我们在这方面做了些尝试，现总结如下。

陈旧肾脏HE染色切片退掉盖玻片后行免疫组化检测

在临床和科研工作中切片大部分都是以HE染色树胶封片,这样可样将切片长期保存。但是往往因为原有组织块丢失而或其他原因需要在原有石蜡HE染色切片原位基础上行免疫组织化学检测。本文就上述问题做了尝试并得到了较好的效果。

肾活检组织病理诊断中采用石蜡切片免疫荧光染色法的临床价值分析

目的:分析肾活检组织病理诊断中应用新式石蜡切片免疫荧光染色法的可行性与效能。方法:研究开展的时间为2021年1月至2022年12月,共纳入83份肾组织样本,其中10份来源于贵州电力医院,73份来源于贵州医科大学附属医院。对全部样本均实施常规冰冻切片免疫荧光染色诊断与新式石蜡切片免疫荧光染色诊断,将前者列为冰冻组,将后者列为石蜡组,对照两种诊断方式对于常见肾病的诊断效能。结果:肾病理组织活检的阳性检出结果显示,石蜡组23例膜性肾病患者、30例狼疮性肾病患者和30例IgA肾病患者免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、补体C3、补体C1q的阳性检出率均高于冰冻组,但两组仅在膜性肾病患者IgA、狼疮性肾病患者IgA、IgG、补体C1q的检出率方面存在统计学差异(P<0.05),其他组间对比均无统计学差异(P>0.05)。结论:在肾病患者肾组织病理活检诊断中,新式石蜡切片免疫荧光染色法的诊断效能优于传统冰冻切片免疫荧光染色法,有助于更为准确地检出不同类型的肾病,具有较高的临床应用价值。

生物样品电镜超薄切片染色技术的改进

目的提高透射电镜生物样品超薄切片的染色效率和染色质量。方法在传统染色方法基础上进行改进,采用"插入式滴染法"和连续染色方式。结果在较短时间内完成大批生物样品超薄切片的电子染色。结论与传统方法相比省时省药,减少污染概率,电镜观察结构清晰,反差较好。

丽江云杉胚性愈伤组织石蜡制片中的整块染色与切片染色方法比较

以丽江云杉胚性愈伤组织为材料,运用整块染色方法与切片染色方法对其石蜡制片的效果进行比较。结果表明,两种染色方法制成的切片在观察效果上无明显差异,均能对丽江云杉的胚性愈伤组织的细胞核、淀粉粒染色,且各部分的着色均匀一致,染色效果佳。两相比较,整块染色法的操作步骤略为简化,能在一定程度上减轻切片污染、皱褶和蜡片脱落现象的产生。

不同染色组织切片及不同组织固定方法对检测STR基因座的影响

目的探讨不同染色组织切片及不同组织固定方法对DNA检验的影响。方法采用Chelex100法及浓缩纯化方法提取DNA,PCR扩增后310型遗传分析仪检测。结果福尔马林固定4天以内或70%乙醇、无水乙醇分别固定1年及15年的HE染色切片可以检见Amel及9个STR基因座。PTAH等5种特殊染色未能检出相应基因座DNA谱带。结论70%乙醇或无水乙醇固定组织,石腊包埋组织及HE染色切片可以作为DNA?STR检验鉴定的样本材料。