柔嫩艾美耳球虫早熟耐药株对几种抗球虫药的敏感性

为了探讨鸡柔嫩艾美耳球虫早熟耐药株对常用抗球虫药的敏感性，采用尼卡巴嗪、氯苯胍、球痢灵、地克珠利和常山酮5种抗球虫药，对由晋球1号球虫疫苗虫株复制的病鸡进行防治试验，通过相对卵囊产量（ROP）、相对增重率、抗球虫指数（ACI）、病变记分减少率（RLS）和最适抗球虫活性百分率（PoAA）5项指标进行综合评定。结果表明，柔嫩艾美耳球虫早熟耐药株对盐酸氯苯胍无抗药性，对地克珠利有轻度抗药性，对常山酮、球痢灵、尼卡巴嗪有部分抗药性，它们的抗球虫指数为187．46～246．75，达到了抗球虫效果。

柔嫩艾美耳球虫早熟耐药株对磺胺类抗菌药的耐药性研究

目的:检测柔嫩艾美耳早熟耐药株对4种磺胺类抗菌药的耐药性,为鸡球虫疫苗的临床应用提供依据。方法:采用鸡体实验法,以最适抗球虫活性百分数(POAA)、病变记分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)和抗球虫指数(ACI)四项指标综合判定接种5×104个柔嫩艾美耳早熟耐药株对消炎磺、磺胺嘧啶、三甲氧苄氨嘧啶、磺胺氯吡嗪钠4种磺胺类抗菌药的耐药性情况。结果:磺胺嘧啶、三甲氧苄氨嘧啶、磺胺氯吡嗪钠的POAA均小于界定值50%,为阳性,只有消炎磺的POAA值大于50%,为阴性。四种药物的RLS和ROP值均为阳性。消炎磺、三甲氧苄氨嘧啶的ACI值为160-179,具有中等抗药能力,磺胺嘧啶、磺胺氯吡嗪钠的ACI值低于160,为阳性,具有完全的耐药性。结论:柔嫩艾美耳早熟耐药株对消炎磺、三甲氧苄氨嘧啶具有中等程度的抗药性,磺胺嘧啶、磺胺氯吡嗪钠具有完全的耐药性。

鸡柔嫩艾美耳球虫早熟耐药株的放松传代及其特性研究

为了进一步验证鸡柔嫩艾美耳球虫早熟耐药株经本动物(鸡)连续传代后的毒力和遗传稳定性,为虫种种子传代提供依据,试验对鸡柔嫩艾美耳球虫早熟耐药株(Etpp)用11日龄敏感鸡连续放松传代10次,其潜隐期、排卵囊高峰、卵囊产量、致病性和免疫原性均保持了早熟耐药株(Etpp)的特征,说明所选育的虫株(Etpp)在遗传上具有稳定性。

巨型艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫早熟株对8种抗球虫药的敏感试验

为检测巨型艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫早熟株对常用抗球虫药的敏感性,选用地克珠利、氯苯胍、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星、盐霉素和拉沙洛西等8种抗球虫药进行鸡体试验,通过抗球虫活性百分比(percent of optimum anticoccidial aetivity,POAA)、病变记分减少率(reduction of lesion scores,RLS)、相对卵囊产量(relative oocyst production,ROP)和抗球虫指数(anticoccidial index,ACI)4项指标进行综合评价。结果表明,巨型艾美耳球虫早熟株对8种药物敏感;柔嫩艾美耳球虫早熟株对盐霉素轻度敏感,对地克珠利、氯苯胍、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星和拉沙洛西敏感。本研究结果可为对球虫早熟株疫苗的开发与应用提供实验依据。

柔嫩艾美耳球虫敏感株与耐药株成熟卵囊中葡萄糖含量的检测

建立了一种采用比色测定中性糖的硫酸-酚法测定柔嫩艾美耳球虫成熟卵囊中葡萄糖含量的方法,并对柔嫩艾美耳球虫(Eimeria.tenella)的敏感株和各种耐药株共9个球虫株的成熟卵囊中葡萄糖含量进行了测定。结果表明,敏感株成熟卵囊中的葡萄糖含量较低,而耐药株成熟卵囊中葡萄糖含量则相对较高,二者比较呈现极显著相关性(P<0.01)。由此可见,柔嫩艾美耳球虫对抗球虫药物的敏感性可能与成熟卵囊中葡萄糖含量有关,通过对成熟卵囊中葡萄糖含量的测定可作为判别柔嫩艾美耳球虫是否耐药的指标之一。

柔嫩艾美耳球虫YL株抗药性研究

用柔嫩艾美耳球虫杨凌株 ( YL t)对 1 4日龄雏鸡进行感染 ,检测了该虫株对 4种常用抗球虫药 (马杜拉霉素、地克珠利、克球粉和氯苯胍 )的敏感性。以最适抗球虫活性百分率、抗球虫指数、相对卵囊产量和病变记分减少率为指标 ,进行综合评定 ,其抗药程度分为无抗药性、轻度抗药性、中度抗药性和完全抗药性 4个等级。结果表明 ,该虫株对马杜拉霉素有轻度抗药性 ,对地克株利有完全抗药性 ,对克球粉和氯苯胍无抗药性。

雏鸡免疫柔嫩艾美耳球虫早熟株和毒株的细胞免疫反应

AA肉鸡雏鸡分别经口免疫柔嫩艾美耳球虫毒株早熟株 ,用免疫组化ABC法染色检测小肠、盲肠扁桃体、脾脏中CD4 +、CD8+T淋巴细胞动态变化 ;用淋巴细胞转化实验MTT法检测T淋巴细胞活性。结果表明 :球虫免疫鸡后 ,CD4 +T淋巴细胞在一次免疫后迅速增殖 ,第 6天达到第一峰 ,免疫柔嫩艾美耳球虫毒株的鸡盲肠与脾脏中CD4 +T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到 38%和 4 4 % ,免疫早熟株的鸡盲肠与脾脏中CD4 +T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到 36 %和 4 3% ,而二次免疫后和对照相比很少有显著差异。CD8+T淋巴细胞在一次免疫后比CD4 +增殖速度慢 ,第 9天达到第一峰 ,免疫柔嫩艾美耳球虫毒株的鸡在此日盲肠与脾脏中CD8+T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到 37%和 4 7% ,免疫早熟株的鸡在此日盲肠与脾脏中CD8+T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到 36 %和 4 8% ,二次免疫后迅速大量增殖 ,免疫柔嫩艾美耳球虫毒株的鸡在二免后第2天盲肠与脾脏中CD8+T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到 39%和 5 0 % ,免疫柔嫩艾美耳球虫早熟株的鸡在二免后第 2天盲肠与脾脏中CD8+T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到 37%和 5 0 %。且CD8+T淋巴细胞总体水平比CD4 +T淋巴细胞多。

柔嫩艾美耳球虫早熟株的内生发育及其致病性

为了给鸡球虫早熟弱毒疫苗的开发提供依据,对柔嫩艾美耳球虫(Eim eria tenella) 北京株经10 代早熟选育获得的早熟株的内生发育研究发现,其第2 代裂殖生殖发育较快,第2 代裂殖体含裂殖子较少,提前进入配子生殖,从而造成卵囊“早熟”。该早熟株致病性大大下降,经口感染10×104 个/只的致病性仅相当于剂量0.1×104 个/只亲本毒株的致病性。该虫株可作为研制早熟弱毒苗用虫株。

陕西省杨凌区柔嫩艾美耳球虫早熟株选育及致病性研究

采用球虫早熟系虫株选育的方法,反复收集感染后最先排出的卵囊,选育出杨凌地区鸡柔嫩艾美耳球虫早熟株并对早熟株的潜伏期、致病性及繁殖能力进行了研究。结果表明,经18代选育的鸡柔嫩艾美耳球虫杨凌早熟株的潜伏期比母株缩短了24h;早熟株卵囊的形态与母株相似,但没有母株卵囊的大;早熟株的繁殖能力低于母株,每羽鸡所排卵囊总量与剂量呈正相关,而每个卵囊的繁殖能力与剂量呈负相关;早熟株的致病性低于母株。

柔嫩艾美耳球虫早熟株免疫剂量研究

为了确定柔嫩艾美耳球虫（Eimenatenella）早熟株合适的免疫剂量，本文设立7个早熟株免疫攻虫组、1个不免疫攻虫组和1个不免疫不攻虫组，免疫组的免疫剂量为孢子化卵囊100、200、400、600、800、1000和2000个／羽，经嗉囊感染，7日龄首次免疫，14日龄以同等剂量进行第二次免疫，21日龄以8×10^4个／羽的同源母株进行攻虫，28日龄结束试验，以存活率、增重、肠道病变记分、血便数量、卵囊减少率为观测指标。对免疫保护效果较好的3个免疫剂量进行重复试验，同时设置商品化球虫疫苗对照组，免疫方法、试验周期、试验指标同第一批试验。结果显示：攻虫后，不免疫攻虫组出现5％死亡，而各免疫组来出现死亡；各免疫组卵囊减少率在61．57％～69．52％；200～2000免疫组的增重与不免疫不攻虫组差异不具备显著统计学意义（P〉0．05）；600～2000免疫组的肠道病变记分和血便数量均明显少于不免疫攻虫组（P〈0．05）。用600、800和1000进行重复试验，三个免疫组攻虫期间均来出现死亡，而不免疫组和疫苗对照组均出现5％死亡；三个免疫组的增重均明显高于不免疫攻虫组和疫苗对照组（P〈0．05）；早熟株免疫组的肠道病变记分和血便数量明显低于不免疫攻虫组（P〈0．05），而疫苗对照组与不免疫攻虫组的相当（P〉0．05）；卵囊减少率在66.30％-78．75％，高于疫苗对照组的51．82％。结果表明，该柔嫩艾美耳球虫早熟株保持了良好的免疫原性，不同免疫剂量均能诱发鸡产生免疫保护力，其中600、800和1000个／羽的免疫效果均优于疫苗对照组，可考虑以600个／羽作为该早熟株在疫苗制备中的推荐免疫剂量。

柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)早熟株与亲本株致病性和繁殖力的研究

通过对经15代选育的柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)山西株的早熟株与其亲本株的繁殖力和致病性进行比较研究,证实早熟株的潜隐期比亲本株缩短21 h,繁殖力下降40%左右;对致病性的研究显示,早熟株感染后对鸡只增重、AC I的影响较小,对11日龄雏鸡的半数感染量和半数致死量较亲本株增大,肠道病变记分较亲本株下降。由此认为,该早熟株符合球虫早熟株的特性,可用于鸡球虫病早熟苗的制作。

堆型艾美耳球虫早熟株和母株对8种抗球虫药的敏感试验

[目的]探讨堆型艾美耳球虫早熟株和母株对常用抗球虫药的敏感性。[方法]选用地克珠利、氯苯胍、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星、盐霉素和拉沙洛西8种抗球虫药,进行鸡体试验,通过抗球虫活性百分比(POAA)、病变记分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)和抗球虫指数(ACI)4项指标进行综合评定。[结果]堆型艾美耳球虫早熟株和母株均对地克珠利、氯苯胍、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星和拉沙洛西敏感,对盐霉素轻度敏感,对二硝托胺不敏感。[结论]遗传背景相同的虫株,其药物敏感性也相同。

对柔嫩艾美耳球虫敏感株与抗药株ATP酶活性的检测

采用ATP酶试剂盒对柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)11种敏感株与抗药株的4种ATP酶活性进行了检测。结果表明,鸡球虫不仅具有活跃的ATP酶系统,而且其活性因球虫对药物敏感性的不同而表现强弱不同。敏感株的ATP酶活性最强,而各抗药株的ATP酶活性均有不同程度的降低,尤其是氯化锂(Na+-K+-ATP酶抑制剂)和利多卡因(Na+通道阻断剂)参与诱导产生的马杜霉素诱导抗药株和盐霉素诱导抗药株的Na+-K+-ATP酶,Mg2+-ATP酶,Ca2+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性极显著低于相同来源的抗药株和敏感株的活性。本文研究表明,虫株对药物的敏感性可能与ATP酶活性有关,检测ATP酶活性可作为判别柔嫩艾美耳球虫对离子载体类抗球虫药物敏感性或抗药性的指标之一。

鸡柔嫩艾美耳球虫西宁株的抗药性研究

使用柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)西宁株(Et XN)感染13日龄岭南黄肉鸡,进行该虫株对轻灭(地克珠利,Diclazuril)、马度米星铵预混剂(Maduramicin Aminonium Premix)、球痢灵(磺胺氯吡嗪钠,Sulfachoropyridazine)、球迪2000(盐酸氯丙啉,Amprolium Hydrochloride)4种药物的抗药性研究。以相对卵囊产量(ROP)、病变记分减少率(RLS)、最适抗球虫活性百分数(POAA)、抗球虫指数(ACI)作为指标进行综合判定。结果表明:该虫株对马度米星铵预混剂具有轻度抗药性,对球痢灵具有中度抗药性,对轻灭和球迪2000具有完全抗药性。

柔嫩艾美耳球虫敏感株与抗药株子孢子膜脂流动性的检测

建立了应用荧光探针1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(DPH)测定柔嫩艾美耳球虫子孢子膜脂流动性的方法。对柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)的敏感株与各种抗药株共13个球虫株的子孢子膜脂流动性进行测定。结果表明,敏感株的膜脂流动性大,抗药株膜脂流动性小(P<0.01,呈极显著相关)。由此可见,虫株对药物的敏感性可能与膜脂流动性有关,膜脂流动性的检测结果可作为判别柔嫩艾美耳球虫对离子载体类抗球虫药物敏感性或抗药性的指标之一。

柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)“早熟株”对雏鸡免疫保护力的影响

实验采用人工培育的不同剂量柔嫩艾美耳球虫( E.tenella) “早熟株”接种雏鸡,测定出雏鸡血钠、血钾、血钙、血糖、血红蛋白的变化。结果表明,不同剂量的“早熟株”对所测定的雏鸡生理生化指标均有影响,其中2-0 ×104/ 只指标基本与对照组相同,对雏鸡有较好的保护作用,该剂量可作为未来弱毒苗的参考剂量。

柔嫩艾美耳球虫早熟株的选育及其免疫原性研究

运用Jeffers(1975)法进行了柔嫩艾美耳球虫早熟株的选育,经过连续13代的选育,获得了柔嫩艾美耳球虫早熟株,该虫株的潜隐期为121h,比柔嫩艾美耳球虫亲本毒株的潜隐期提前了22h以上.免疫攻毒试验的结果表明柔嫩艾美耳球虫早熟株和其亲本毒株一样也具有免疫原性.

杨凌地区柔嫩艾美耳球虫早熟株对雏鸡免疫效果的研究

用杨凌地区鸡柔嫩艾美耳球虫早熟株和母株分别免疫鸡,对免疫前后鸡体的平均增重、饲料转化率、盲肠病变记分和卵囊抑制率等指标进行了分析。结果发现,早熟株免疫组对球虫再攻击时的卵囊减少率分别为77.3%和67.6%,高于母株免疫组的41.7%和57.1%,且对同种同株球虫攻虫时的保护力优于同种不同株球虫。经2次免疫后,早熟株免疫组的鸡平均增重、饲料转化率均高于母株免疫组和对照组,而盲肠病变记分小于后者;早熟株免疫组经球虫攻击后卵囊的繁殖量明显减少,且卵囊抑制率均在91%以上。

柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)早熟株的选育及其生物学特性的研究

本研究对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)北京株进行10代早熟选育,获得早熟弱毒株,对其生物学特性研究证实:该早熟株潜隐期为123h,比亲本毒株缩短了21h;内生发育研究发现其第二代裂殖生殖发育较快,第二代裂殖体含裂殖子较少,提前进入配子生殖;该早熟株繁殖能力下降,仅为毒株为24.75%;该早熟株致病性大大下降,经口感染发现剂量为10×10~4/只的早熟株的致病性仅相当于剂量10×10~2/只亲本毒株的致病性;对其免疫原性研究发现;①分别用剂量为1000个卵囊/只的早熟株丝。

堆型艾美耳球虫早熟株对常用抗球虫药的敏感性测定

本试验旨在研究堆型艾美耳球虫(E.acervulina)早熟株对常用抗球虫药(地克珠利、妥曲珠利、磺胺间甲氧嘧啶、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星、盐霉素和土霉素)的敏感性。通过测定人工试验鸡的抗球虫活性百分比(POAA)、病变记分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)和抗球虫指数(ACI)4项指标,综合评定该虫株的药物敏感性。结果显示,妥曲珠利、磺胺间甲氧嘧啶、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、盐霉素和土霉素组的POAA、RLS、ROP、ACI 4项指标均为阴性;地克珠利组除ROP指标为阳性,POAA、PLS、ACI 3项指标均为阴性;马杜米星组的ROP和ACI为阳性,POAA和RLS为阴性。结果表明,堆型艾美耳球虫早熟株对地克珠利、妥曲珠利、磺胺间甲氧嘧啶、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、盐霉素和土霉素敏感,对马杜米星轻度敏感。