柠檬酸钠还原法提取纳米金的改良与优化

本研究旨在改良与优化柠檬酸钠还原法制备纳米金技术,通过优化制备过程得到粒径更为均匀、分散性更好且无细胞毒性的纳米金凝胶。纳米金凝胶制备过程中①比较电炉和水浴锅两种加热方式对纳米金粒径的影响;②比较PVP、单宁酸、柠檬酸钠三种保护剂对纳米金分散程度影响;③比较不同剂量柠檬酸钠对纳米金粒径的影响。采用目测法、紫外-分光光度计、透射电镜对所制备的纳米金进行外观、粒径及分散程度等的特征鉴定并分析上述方法差异。采用电炉加热制备出的纳米金相对水浴锅加热制备出的纳米金颜色深,浓度大,粒径小;用单宁酸做保护剂制备出的纳米金比用PVP、柠檬酸钠做保护剂制备出的粒径均一、单分散性好、稳定性佳;柠檬酸钠剂量在3~4 mL范围内时,制出的纳米金粒径均在18±2nm之间,且不受该剂量范围柠檬酸钠用量的影响。在经典柠檬酸钠还原法制备纳米金实验中,选用电炉加热,1%单宁酸作为保护剂,还原剂1%柠檬酸钠计量控制在3~4 mL范围内。此种条件下制备出的纳米金粒径均在18±2nm之间、且分散性好、稳定性佳、无细胞毒性。

生物检测用纳米金粒子还原制备方法比较

分别采用柠檬酸钠还原法、柠檬酸钠-鞣酸还原法、抗坏血酸还原法、硼氢化钠还原法4种方法制备了粒径为十几纳米的胶体金,并对制得的纳米胶体金粒径大小、分散度、稳定性及形貌进行了表征和比较分析。结果表明,采用柠檬酸钠-鞣酸还原法制备胶体金纳米粒子的过程相对简单,所得粒子平均直径约为十几纳米,粒径分布窄,形貌均一,稳定性和分散性好,满足生物标记探针的应用要求,相对其它3种方法具有较大优势。

金纳米粒子表面自组装巯基十一烷醇单分子层体系的制备及其光散射特性研究

采用柠檬酸钠还原法制备了水相金纳米粒子, 通过巯基的自组装, 成功获得了巯基十一烷醇(MUN)单分子层保护的金纳米粒子. 用紫外可见光谱、透射电子显微镜、激光散射粒度分析、同步散射光谱和发射光谱等手段对组装前后的金纳米粒子的性质进行了研究. 结果表明: 制备的金纳米粒子最大吸收波长518 nm, 形状规则, 粒度均匀, 平均粒径为14.6 nm, 每个粒子含有约9.64×104原子; 组装之后的金纳米粒子表面等离子体共振吸收峰红移17.0 nm, 平均粒径增大为20.2 nm, 组装层的平均厚度2.8 nm, 与MUN 分子长度相当, 结合量实验证明每一个金纳米粒子可以结合约7.52×103 个MUN, 表面覆盖率为83.6%, 粒子分散均匀, 稳定性增强可长期保存; 同步散射光谱变化和发射光谱中分频、差频和倍频峰的存在证明, 金纳米粒子组装前后均具有非线性光学特性.

纳米胶体金的制备及其抗体标记研究

研究通过光谱扫描,确定了柠檬酸钠还原法制备纳米胶体金的最佳条件:100mL0.01%四氯金酸溶液中添加1%柠檬酸钠2mL,反应10min,制备的胶体金粒径为15～20nm,并将其与抗牛β-酪蛋白IgG连接制得了胶体金标记抗体,通过考马斯亮蓝法测得蛋白标记率为74.5%,采用间接ELISA方法测得金标抗体的效价在1∶4000以上,抗体金标后活性良好,可以满足免疫检测的需要。

两种胶体金制备方法的比较研究

通过控制还原剂的加入量(20 mL 0.01%四氯金酸溶液中1%柠檬酸钠和抗坏血酸添加量分别为300μL与400μL),利用柠檬酸钠和抗坏血酸还原两种方法制备得到了平均粒径为20 nm的胶体金颗粒,并对其进行了抗体标记比较研究.结果显示:抗坏血酸还原法制备得到的胶体金标记的蛋白量为15.18μg/mL(蛋白质量/胶体金体积,下同),高于柠檬酸钠还原法的5.07μg/mL,间接ELISA法测得其效价(1∶800)也比柠檬酸钠还原法制备的颗粒标记物高(1∶400),这表明抗坏血酸还原法更适合于标记用胶体金颗粒的制备.