两种凝血酶原提取方法的比较

目的比较等电点沉淀法和柠檬酸钡吸附法从猪血浆中提取凝血酶原的纯度。方法分别采用等电点沉淀法和柠檬酸钡吸附法从猪血浆中提取凝血酶原,凝血酶原经单独钙离子激活得到凝血酶,通过凝血酶效价测定、蛋白质浓度测定,计算出凝血酶的比活性。结果采用等电点沉淀法提取的凝血酶原经激活后得到的凝血酶比活性为11.01±1.54 U/mg,采用柠檬酸钡吸附法提取的凝血酶原经激活后得到的凝血酶比活性为130.17±12.30 U/mg,经配对T检验,P<0.01.结论与等电点沉淀法相比,采用柠檬酸钡吸附法从猪血浆中提取得到的凝血酶原纯度更高。

响应面法优化Ca^(2+)激活牦牛血中凝血酶原工艺研究

以牦牛血液为原料,采用柠檬酸钡吸附法制取凝血酶原。选取激活温度,Ca2+终浓度,激活时间三个因素,在单因素实验基础上进行Box-Behnken中心组合实验,研究了Ca2+激活牦牛血中凝血酶原的工艺条件,实验结果表明:激活温度27℃、Ca2+终浓度0.01mol/L、激活时间1.95h,在此条件下凝血酶的比活力最优为63.3972U/mg。

猪血凝血酶制备工艺

分别使用等电点沉淀法和柠檬酸钡吸附法从猪血浆中提取凝血酶原,凝血酶原经单独钙离子激活得到凝血酶,通过凝血酶效价测定、蛋白质浓度测定,计算出凝血酶的比活。通过单因素试验和正交试验,考察激活时间、Ca2+浓度、温度对凝血酶活力的影响。结果表明:与等电点沉淀法相比,采用柠檬酸钡吸附法提取得到的凝血酶原经激活得到的凝血酶比活力高43U/mg;最佳激活条件Ca2+浓度0.1mol/L,温度25℃下激活2h,在该条件下进行得到凝血酶比活力最大。