两种凝血酶原提取方法的比较

目的比较等电点沉淀法和柠檬酸钡吸附法从猪血浆中提取凝血酶原的纯度。方法分别采用等电点沉淀法和柠檬酸钡吸附法从猪血浆中提取凝血酶原,凝血酶原经单独钙离子激活得到凝血酶,通过凝血酶效价测定、蛋白质浓度测定,计算出凝血酶的比活性。结果采用等电点沉淀法提取的凝血酶原经激活后得到的凝血酶比活性为11.01±1.54 U/mg,采用柠檬酸钡吸附法提取的凝血酶原经激活后得到的凝血酶比活性为130.17±12.30 U/mg,经配对T检验,P<0.01.结论与等电点沉淀法相比,采用柠檬酸钡吸附法从猪血浆中提取得到的凝血酶原纯度更高。

猪血凝血酶制备工艺

分别使用等电点沉淀法和柠檬酸钡吸附法从猪血浆中提取凝血酶原,凝血酶原经单独钙离子激活得到凝血酶,通过凝血酶效价测定、蛋白质浓度测定,计算出凝血酶的比活。通过单因素试验和正交试验,考察激活时间、Ca2+浓度、温度对凝血酶活力的影响。结果表明:与等电点沉淀法相比,采用柠檬酸钡吸附法提取得到的凝血酶原经激活得到的凝血酶比活力高43U/mg;最佳激活条件Ca2+浓度0.1mol/L,温度25℃下激活2h,在该条件下进行得到凝血酶比活力最大。