柯萨奇腺病毒受体在人PCa细胞Du145和LNCaP中的差异表达及意义

目的:探讨柯萨奇腺病毒受体(CAR)在PCa转移潜能获得机制中的可能作用。方法:用TransweⅡ技术鉴定两种PCa细胞株(Du145和LNCaP)的不同转移潜能,进而应用Western印迹法鉴定这两种细胞株中的CAR表达差异情况,并初步分析其在PCa转移过程中所发挥的作用。结果:Du145的体外侵袭潜能显著高于LNCaP细胞(P<0.05);同时,CAR在低转移细胞株LNCaP中高表达,而在高转移细胞株Du145中表达缺失(P<0.01)。结论:CAR在转移潜能不同的PCa细胞株之间确实存在着有意义的差异表达,而这种表达差异可能在影响PCa转移过程中发挥重要作用。

柯萨奇-腺病毒受体基因-968G/A多态性与柯萨奇病毒性心肌炎的关系

目的探讨柯萨奇-腺病毒受体(CAR)基因-968G/A多态性与中国南方汉族人群柯萨奇病毒性心肌炎的关系。方法收集病毒性心肌炎患儿280例,将其中CVB-IgM阳性130例作为心肌炎组,并选择同期130名健康儿童作为对照组,采用聚和酶链反应-限制性内切酶片断长度多态性(PCR-RFLP)、DNA测序等方法检测2组CAR基因-968G/A多态性,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组血清CAR水平。结果心肌炎组GG基因型和G等位基因频率均显著高于对照组(P<0.05)。心肌炎组血清CAR水平明显高于对照组(P<0.01),CAR基因-968G/A多态位点中含G等位基因(GG+GA)者血清CAR水平和CVB感染率均显著高于非G等位基因(AA)携带者(P均<0.05)。结论 CAR基因-968G/A多态性可能与中国南方汉族人群柯萨奇病毒性心肌炎有关,G等位基因是柯萨奇病毒性心肌炎的易感基因。

柯萨奇-腺病毒受体在肿瘤发生发展机制中的研究进展

柯萨奇-腺病毒受体(Coxsackie and adenovirus receptor,CAR)最早作为2型和5型腺病毒的受体而被人们发现和认识。大量研究发现CAR可以影响肿瘤细胞的生长、细胞骨架的变化、细胞间的粘附等,从而在肿瘤侵袭转移过程中起非常重要的作用。而且,CAR的表达与肿瘤的预后和腺病毒介导的减瘤效应也有密切的关系。基于CAR的重要作用,CAR已逐渐成为肿瘤发生发展机制及治疗领域研究中新的"热点",本文结合CAR的基本结构及功能对以上研究的进展作一综述。

柯萨奇-腺病毒受体在肾癌组织中的表达及意义

目的:研究柯萨奇-腺病毒受体(CAR)在肾癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组化SP法检测12例癌旁正常肾组织和48例肾细胞癌组织中CAR的表达。结果:12例正常肾组织全部表达CAR,48例肾细胞癌组织中31例无CAR表达。不同分级CAR表达率分别为Ⅰ级54.5%(12/22)、Ⅱ级23.5%(4/17)、Ⅲ级11.1%(1/9);不同分期CAR表达率分别为Ⅰ期57.9%(11/19)、Ⅱ期30.8%(4/13)、Ⅲ期18.2%(2/11)、Ⅳ期0(0/5)。结论:在多数肾细胞癌组织中CAR基因表达丧失;CAR表达变化与肾癌的分级、分期相关,可以作为肾癌分化、转移的重要生物学指标。

柯萨奇-腺病毒受体在病毒性扩张型心肌病外周血白细胞中的表达及意义

目的 观察柯萨奇腺病毒受体 (CAR)在病毒性扩张型心肌病 (DCM )外周血白细胞中的表达及意义。方法 选择柯萨奇B组病毒性DCM及正常人各 15例作为研究对象 ,采用流式细胞术检测外周血白细胞中CAR表达水平 ,并对DCM患者CAR表达值与心功能值 [射血分数 (EF) ]的变化进行相关性分析。结果 流式细胞术检测表明 ,心肌病组平均荧光强度 (MFI)和阳性细胞百分率 (PPC)均明显高于正常对照组 ,两者比较 ,差异均有统计学意义(t =9.39和 7.2 1,P均 <0 .0 1) ,而且其MFI与EF值呈显著负相关 (r =- 0 .6 4 ,P <0 .0 5 )。结论 柯萨奇B组病毒性DCM患者外周血白细胞中CAR表达水平增加 ,外周血白细胞CAR水平的检测 ,有助于DCM的诊断、判断病情和预后。

柯萨奇病毒-腺病毒受体在结肠癌组织中的表达及意义

目的:柯萨奇病毒-腺病毒受体(coxsackie and adenovirus receptor,CAR)介导腺病毒与靶细胞之间的粘附,是腺病毒转染靶细胞的限速因子。本文分析CAR在瘤旁上皮组织、结肠肿瘤原发灶和淋巴结转移灶中的表达,为设计腺病毒载体基因治疗方案提供依据。方法:采用免疫组织化学方法检测62例结肠癌组织中CAR的表达,分析CAR表达与临床病理特征的关系。结果:与瘤旁上皮组织相比,肿瘤组织普遍存在CAR表达下调,但CAR在原发灶和淋巴结转移灶的表达水平无明显差异。CAR的表达水平与患者年龄及肿瘤大小相关。结论:结肠癌组织中存在CAR表达下调,提示在设计腺病毒载体基因治疗方案时应充分考虑CAR表达变化对疗效的影响。

柯萨奇-腺病毒受体在病毒性心肌炎患儿白细胞中的表达及意义

目的观察柯萨奇-腺病毒受体(CAR)在病毒性心肌炎(VM)外周血白细胞中的表达及意义。方法选择柯萨奇B病毒性心肌炎患儿及同龄健康儿童各20例,采用全血免疫荧光流式细胞术检测白细胞中CAR表达水平,并对VM患儿CAR表达值与心功能(EF值)的变化相关性进行分析。结果流式细胞表明,心肌炎组(VM组)平均荧光强度(MFI)和阳性细胞百分率(PPC)均明显高于正常对照组,差异均有高度显著性(t=6.23、10.87,P均<0.01);其MFI与EF值呈显著负相关(r=-0.757,P<0.05)。结论CAR表达水平有助于判断患儿对柯萨奇B组病毒感染的易感性,对VM的诊断、判断病情和预后有一定的价值。

小细胞肺癌组织中柯萨奇-腺病毒受体阳性表达的意义

目的:探讨柯萨奇-腺病毒受体(CAR)在小细胞肺癌组织中阳性表达的意义。方法:应用免疫组化EnVision法检测病理诊断明确的31例小细胞肺癌组织中CAR的表达情况,用3例正常的肺组织做阴性对照。结果:31例小细胞肺癌组织全部呈阳性表达,阳性率为100%,3例非肿瘤性肺组织均呈阴性表达。结论:在小细胞肺癌组织中高表达CAR可能提示腺病毒为载体的基因治疗将在小细胞肺癌的治疗领域起重要的作用。

柯萨奇—腺病毒受体在扩张型心肌病心肌中的表达及意义

目的：探讨柯萨奇—腺病毒受体(CAR)在扩张型心肌病(DCM)心肌组织中的表达及其在 DCM 发病中的意义。方法：利用多聚酶链反应(PCR)技术检测20例原位异体心脏移植的 DCM 受体心肌组织以及5例正常对照心肌组织中柯萨奇 B 组病毒(CVB)、腺病毒(ADV)基因,采用免疫组化及逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测心肌柯萨奇—腺病毒受体 mRNA 及蛋白表达水平。结果：20例 DCM 心肌标本中,柯萨奇 B 组病毒阳性7例(柯萨奇病毒组),腺病毒阳性5例(腺病毒组)：其余8例柯萨奇 B 组病毒、腺病毒均阴性(其它组),5例正常对照柯萨奇 B 组病毒、腺病毒也均为阴性。正常对照和其它组心肌中均无柯萨奇—腺病毒受体 mRNA 及蛋白表达,而在柯萨奇病毒组和腺病毒组其表达水平明显增加,但两组之间比较,差异无显著性。结论：柯萨奇—腺病毒受体表达上调可能是导致柯萨奇病毒或腺病毒易感性增加,促使病毒性心肌炎向扩张型心肌病转化的重要原因。

曲古抑菌素A上调肿瘤细胞柯萨奇-腺病毒受体表达而抑制其侵袭力的体外研究

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACI)曲古抑菌素A(TSA)抑制肿瘤细胞侵袭力是否通过上调肿瘤细胞表面柯萨奇-腺病毒受体(CAR)的表达而实现的。方法:在TSA作用T24细胞和MCF-7细胞后,分别检测CAR mRNA和蛋白水平的表达;同时采用体外黏附实验和Boyden小室体外侵袭实验,以评价细胞黏附和侵袭力的改变。结果:TSA作用72 h后,肿瘤细胞CAR mRNA和蛋白表达水平明显上调,细胞间同型黏附增强,侵袭力下降。且这一过程可被CAR特异性抗体部分逆转。结论:TSA可以通过上调CAR而使肿瘤细胞同型黏附增加,侵袭力下降。

儿童外周血不同类型白细胞柯萨奇-腺病毒受体的表达

目的研究柯萨奇-腺病毒受体（CAR）在儿童外周血不同类型白细胞中的表达。方法采用全血免疫荧光流式细胞术检测南华大学附属第一医院儿科2005年1-6月不同年龄组体检正常儿童外周血淋巴细胞、多形核细胞及单核细胞3种白细胞的平均荧光强度（MFI）和阳性细胞百分率（PPC）。结果流式细胞检测表明,同年龄组内多形核细胞及单核细胞MFI和（或）PPC比较无显著性差异（P〉0.05）,但2类细胞MFI和（或）PPC均显著高于淋巴细胞（Pa〈0.01）;不同年龄组淋巴细胞、多形核细胞及单核细胞3种白细胞的MFI和（或）PPC比较有显著性差异（Pa〈0.01）,其中以0-1岁组表达最高,2-3岁组次之,4-7岁组较低,8-15岁组表达最低。结论儿童外周血白细胞CAR表达以多形核细胞及单核细胞为主,流式细胞术是检测白细胞CAR表达的有效方法之一。

柯萨奇病毒-腺病毒受体siRNA对体外血睾屏障完整性的影响

目的观察柯萨奇病毒-腺病毒受体(CAR)siRNA对体外血睾屏障完整性的影响,探讨睾丸CAR分子功能。方法体外建立血睾屏障模型,以CAR siRNA和阴性对照siRNA进行转染,然后以RTPCR和Western blot法检测相关基因mRNA或蛋白表达的变化,免疫荧光法检测蛋白分布,以及测量跨上皮电阻的改变。结果 CAR siRNA组较对照组CAR表达显著降低。与对照组比较,CAR siRNA显著降低了跨上皮电阻,同时,也显著降低了ZO-1的表达,使其分布发生紊乱。结论 CAR siRNA降低支持细胞上皮屏障功能,CAR是血睾屏障的重要调控分子。

柯萨奇-腺病毒受体在扩张型心肌病患者外周血白细胞表面的表达及意义

目的观察柯萨奇-腺病毒受体(CAR)在扩张型心肌病(DCM)患者外周血白细胞表面的表达及意义。方法选择DCM患者50例作为观察组,同期选择30例正常体检者作为对照组。入选后分别采用流式细胞术(FCM)检测外周血白细胞表面CAR表达水平;RT-PCR技术测定柯萨奇B组病毒-核糖核酸(CVB-RNA)表达;ELISA法检测CVB抗体效价。在客观比较病毒检测方法的同时,分析CAR在DCM患者中的表达及意义并探讨FCM在临床病原学检测中的价值。结果(1)经FCM技术检测,观察组外周血白细胞表面CAR表达水平较对照组升高(P<0.01),观察组CVB-RNA阳性22例(44.0%),对照组阳性6例(20.0%),差异有统计学意义(P<0.05);观察组CVB抗体阳性32例(64.0%),对照组阳性10例(33.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。(2)CVB-RNA阳性者中外周血白细胞表面CAR表达水平较阴性者明显升高(P<0.01);22例CVB-RNA阳性者中CVB抗体全部阳性,而28例CVB-RNA阴性患者中CVB抗体阳性者亦有16例。结论外周血白细胞表面CAR高表达的DCM患者可能存在病毒持续感染;FCM技术检测白细胞表面CAR表达水平可以作为DCM患者病毒感染的定量指标。

柯萨奇-腺病毒受体在外周血不同类型白细胞的表达

目的 探讨柯萨奇-腺病毒受体(coxsackie-adenovirus receptor,CAR)在外周血不同类型白细胞的表达情况及性别对CAR表达的影响。方法 用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞、粒细胞及单核细胞CAR的平均荧光强度。结果 流式细胞分析表明,男性白细胞CAR的平均荧光强度明显高于女性,差异具有高度统计学意义;淋巴细胞、粒细胞及单核细胞CAR的平均荧光强度变化无统计学意义。结论 外周血白细胞CAR表达具有性别差异,但无类别差异,流式细胞术是检测白细胞CAR表达的一种有效的方法。

抑制Raf-MEK-ERK信号传导途径上调食管癌细胞株EC9706柯萨奇-腺病毒受体的表达

目的研究Raf-MEK-ERK信号传导途径对食管癌EC9706细胞柯萨奇-腺病毒受体(CAR)表达的影响。方法用ERK抑制剂PD9805910、20、40μmol/L作用EC9706细胞24h,利用免疫荧光和RT-PCR、Western-blot检测各种浓度处理前、后CAR表达水平的变化。结果与对照组比较,10μmol/L PD98059组CAR表达水平差异无统计学意义;20、40μmol/L PD98059处理组CAR表达水平显著提高(P<0.05),且呈浓度依赖性。结论用一定浓度的抑制剂抑制Raf-MEK-ERK信号传导途径可上调食管癌EC9706细胞膜表面CAR的表达。

柯萨奇-腺病毒受体在小鼠病毒性心肌炎心肌表达及其与心肌损害关系

目的 探讨柯萨奇 腺病毒受体 (CAR)在病毒性心肌炎 (VM )发病中的作用。方法 30只小鼠随机分为实验组和对照组 ,所有小鼠于感染后d10处死 ,取其心脏 ,采用Westernblotting及免疫组织化学技术检测心肌细胞CAR表达水平 ,并检查心肌病理变化 ,并对CAR表达水平与心肌的病变程度行相关性分析。结果 Westernblotting显示 ,实验组存活小鼠心肌中CAR表达水平明显高于对照组 ;免疫组织化学检测显示 ,实验组小鼠心肌CAR抗原免疫反应明显增强 (t=4 .94 P <0 .0 1) ,且其CAR表达水平与心肌病变积分呈显著正相关(r =0 .91 P <0 .0 1)。

柯萨奇-腺病毒受体不同胞内功能域缺失突变载体的构建与表达

目的以柯萨奇-腺病毒受体(Coxsackie and adenovirus receptor,CAR)蛋白结构的功能解析作为切入点,构建不同CAR胞内域缺失突变的表达载体。方法利用定点缺失突变策略构建CAR胞内域PKC、CK2、TYR磷酸化位点的缺失突变体及胞内域完全缺失的突变体。利用三步PCR法扩增获得相关的基因片段后,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1/V5/His,通过双酶切及测序进行鉴定后,分别转染至低表达CAR的人卵巢癌细胞系SKOV3细胞中,并用Werstern blot检测细胞转染后CAR的表达水平。结果所有突变体经过测序分析均证实序列与设想的突变序列相符,各突变体在SKOV3细胞中获得了满意的表达。结论成功构建不同CAR胞内功能域缺失突变表达载体,为后续研究CAR及其胞内不同功能域在卵巢癌中的作用机制提供了研究基础。

柯萨奇-腺病毒受体在肺癌组织中的表达及其与临床病理因素的相关性研究

目的研究柯萨奇-腺病毒受体(CAR)在肺癌组织、癌旁组织中的表达及其与肺癌发生发展的关系,并分析其与临床病理因素间的相关性。方法应用免疫组化方法检测75例肺癌组织及对应癌旁组织CAR的表达;分析CAR在不同组织学类型及不同组织学分级的肺癌组织中表达是否有差异;分析CAR表达与临床病理因素有无相关性。结果 (1)75例癌旁组织有7例CAR表达,75例肺癌组织有44例CAR表达,肺癌与癌旁组织CAR的表达有统计学差异(P<0.05);(2)在不同的临床病理因素中,CAR的表达在淋巴结转移中差异有统计学意义(P<0.05),但在患者不同性别、年龄、吸烟与否、肿瘤大小、TNM分期等因素中差异无统计学意义(P>0.05)。不同组织学类型肺癌组织间CAR表达的阳性率差别有统计学意义(P<0.05),肺腺癌、小细胞癌组织中CAR表达阳性率较高;(3)CAR的表达在肺鳞癌、腺癌不同组织学分级中的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CAR在肺癌的发生发展中起一定的作用,并与肺癌淋巴结转移及组织学类型有一定的相关性。

柯萨奇病毒腺病毒受体与肿瘤关系的研究

肿瘤是目前严重危害人类健康的常见疾病之一,但其发病机制仍不清楚。而病毒与肿瘤之间的关系越来越多的得到证实。近年来研究发现,有些DNA和RNA病毒可导致肿瘤的发生,如EB病毒、HPV等。这些病毒可通过基因整合到人基因组中或引起基因突变等方式导致肿瘤的发生。柯萨奇病毒腺病毒受体(CAR)因其作为腺病毒受体介导携带治疗基因的腺病毒载体进入宿主细胞发挥治疗作用而受到广泛关注。充分了解CAR在肿瘤发生发展、在腺病毒介导的基因治疗中的作用机制,将大大增进对恶性肿瘤生物学本质的了解,同时为恶性肿瘤的治疗提供新的、更为有效的平台,为患者带来福音。本文就以柯萨奇病毒腺病毒受体(CAR)的结构特点、生物学功能及在临床治疗中的价值等方面进行综述。