柱切换-反相高效液相色谱法测定血浆中沙丁胺醇浓度

目的 采用柱切换对反相高效液相色谱法测定血浆中沙丁胺醇浓度的方法进行改进。方法 采用Ultrasphere CN色谱柱 ( 2 5 0× 4.6m m,5μm )和 Krom asil C1 8( 2 0× 4m m,5μm )预处理柱 ,分析和预处理柱均以p H 2 .8、0 .0 2 5 mol/L磷酸盐缓冲液∶乙腈∶甲醇 ( 95∶ 4∶ 1)为流动相 ,吗啡作内标。血浆样品加入含二苯基硼酸 - 2 -氨基乙脂的缓冲液 ( p H 9.0 )后 ,用含四辛基溴化铵的氯仿萃取 ,再用 0 .0 8m ol/L醋酸 3 0 0μl反萃 ,取酸液10 0μl进样 ,预处理柱 0 .7～ 1.5 m in流出组份进入分析柱分析 ,2 2 4nm波长下检测 ,按内标法定量。结果 标准曲线线性范围为 0 .5～ 3 2μg/L ,最低定量限为 0 .5μg/L ,沙丁胺醇和内标的保留时间分别为 6.7min和 7.6m in,日内 RSD小于 5 % ,日间 RSD小于 8% ,萃取回收率大于 80 % ,方法回收率在 96%～ 10 7%。结论 本法具有快速简便 ,灵敏准确等特点 ,适用于沙丁胺醇血药浓度测定及药代动力学。

在线二维柱切换-高效液相色谱法测定人血清中多索茶碱浓度

目的:建立测定人血清中多索茶碱浓度的方法。方法:采用在线二维柱切换-高效液相色谱法测定人血清中多索茶碱浓度,一维色谱柱为Waters C_(18),中间柱为SC2,一维、二维柱流动相均为甲醇-水(70∶30,V/V),检测波长为273 nm,柱温为40℃,进样量为10μL。结果:多索茶碱在0.5~50.00μg/m L质量浓度范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9),检测限为0.01μg/m L,定量限为0.5μg/m L,日内、日间精密度的RSD分别为1.51%~1.89%和1.52%~1.92%(n=5),准确度为97.91%~104.19%(n=5),提取回收率为91.63%~93.44%(RSD<2.00%,n=3),基质效应RSD≤3.01%(n=6),稳定性的RSD<5.00%(n=6)。3例患者静脉输注多索茶碱葡萄糖注射液(0.3 g/d)达稳态后,次日给药前静脉血清中多索茶碱的浓度为3.23、3.35、3.68μg/m L,RSD为2.28%、2.34%、2.14%(n=5)。结论:该方法简便、快速、准确,适用于临床多索茶碱的血药浓度检测。

柱切换高效液相色谱法测定人血浆中氯雷他定浓度

目的:建立柱切换高效液相色谱(HPLC)法测定人血浆中氯雷他定浓度。方法:血浆样品中氯雷他定在碱性条件下,用正己烷-甲基叔丁基醚(1∶1)提取浓集,经 C_4短柱用0.025mol·L^(-1)磷酸二氢钾-乙腈(55∶45,pH 3.7)在线净化,洗脱切入烷基键合相 C_(18)分析柱,用相同流动相进行分离测定。结果:标准曲线线性范围0.5-128μg·L^(-1)(r=0.9998),萃取回收率89.4%-95.8%,方法回收率94.4%-96.7%,日内测定 RSD 0.5%-3.9%,日间测定 RSD 4.1%-5.1%。结论:本法准确可靠,用于氯雷他定相对生物利用度研究及体内血药浓度测定效果良好。

柱切换-高效液相色谱法与均相酶免法检测艾司西酞普兰血药浓度的比较研究

目的:比较柱切换-HPLC和均相酶免法快速测定艾司西酞普兰血药浓度结果的准确性。方法:建立柱切换HPLC法和均相酶免法测定艾司西酞普兰的血药浓度的方法,并对两种方法进行方法学验证。收集本院住院患者60例病例,两种方法同时监测同一批患者的艾司西酞普兰血药浓度。结果:柱切换-高效液相色谱法与均相酶免法进行线性回归,回归方程为:y=0.9219x+0.0501(n=60,r=0.8999)。两种方法比较的结果进行T检验,同一患者测定结果无显著性差异(p>0.05)。结论:柱切换HPLC和均相酶免法均可测定艾司西酞普兰血药浓度,但是均相酶免法测定复杂,成本高,柱切换HPLC法具有灵敏度高、简单、方便、且显著降低检测成本等优点,可适用于医院检验科和临床药学的应用。

超声辅助分散液液微萃取-柱切换离子色谱法测定食用油中胆碱的含量

移取食用油样品5.00mL,加入3mol·L^(-1) HCl溶液100μL,在60℃下进行水解反应100min,将水解后的样品溶液在80℃水浴中进行超声辅助分散液液微萃取6min,乳浊液形成后以10 000转·min^(-1)转速离心10min,弃去上层油相,吸取下层水相,用0.45μm滤膜过滤,然后进行柱切换离子色谱分析,以Dionex IonPac CS12A阳离子交换色谱柱(250mm×4mm)及Dionex IonPac CG12A阳离子保护柱(50mm×4mm)为分离柱,以12mmol·L^(-1)甲烷磺酸溶液作为淋洗液,抑制型电导检测器检测。大豆油、花生油和亚麻籽油中胆碱的质量浓度均在0.02～2.50mg·L^(-1)内与对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)在1.58～1.99μg·L^(-1)之间。方法用于测定大豆油、花生油和亚麻籽油中的胆碱,测定值的日内和日间相对标准偏差(n=5)均小于7.0%,加标回收率在72.0%～98.0%之间。

柱切换液相色谱法快速定量检测参附注射液中乌头碱类生物碱和人参皂苷

利用柱切换液相色谱,建立了参附注射液中苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、次乌头碱和乌头碱6种乌头碱类生物碱,以及Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Ro、Rb2、Rb3、Rd 9种人参皂苷的分析方法。首先利用强阳离子交换的在线固相小柱选择性富集和净化样品中生物碱类成分,优化了色谱条件;并采用EC-C_(18)柱作为人参皂苷的分析柱,通过优化实验条件,结合柱切换方式,去除了样品中辅料等大极性基质成分对色谱柱的污染,实现了生物碱分析和人参皂苷分析的自动切换。结果显示,样品中的生物碱和人参皂苷分离良好,线性相关系数(r^(2))均大于0.999,连续进样精密度的相对标准偏差(RSD)<2.0%,重复性的RSD<2.0%;其中6种生物碱的平均回收率为95.1%~98.6%,检出限为4.0~8.2 ng/mL;9种人参皂苷的平均回收率为91.7%~104%。所构建的基于柱切换液相色谱技术的在线固相萃取方法能够有效去除样品中的基质干扰,快速完成参附注射液中3种单酯型生物碱和9种人参皂苷的快速定量,同时也可对3种双酯型生物碱进行限量检测,可应用于药物的质量评价。

在线二维柱切换-超高效液相色谱法同时测定明目地黄丸中莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚的含量

建立了二维柱切换-超高效液相色谱法同时测定明目地黄丸中莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚含量的方法。一维色谱柱为Thermo Accucore XL C_（18）（250 mm×2.1 mm,4μm）,二维色谱柱为DIONEX Acclaim phenyl-1（150 mm×4.6 mm,3μm）,一维分析流动相为乙腈-水,梯度洗脱,二维分析流动相为乙腈-水,等度洗脱,14.5 min进行阀切换;检测波长：0~14.5 min为240 nm,14.5~30 min为275 nm,流速：0.5 m L/min,柱温：30℃。30 min即可完成明目地黄丸中莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚的含量测定,并有效地将莫诺苷同分异构体分离。莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚的线性范围分别为7.6~377 mg/L,9.2~459 mg/L,8.4~419 mg/L和8.2~409 mg/L,相关系数为0.9999,加样回收率为98.3%~100.2%。本方法快捷高效,可对控制明目地黄丸质量提供参考。

柱切换HPLC法测定腹水中左旋氧氟沙星的含量

目的：应用柱切换 ＨＰＬＣ技术直接测定腹水中左旋氧氟沙星含量。方法：采用磷酸二氢钾缓冲溶液（ｐＨ ２． ２）－０． ０５ ｍｏｌ／Ｌ四丁溴化化铵（１００： ４）为预处理流动相，经 μＢｏｎｄａｐａｋ Ｃ１８柱预处理后，切换到 Ｉｒｒｅｇｕｌａｒ－Ｈ Ｃ１８分析柱，以甲醇－磷酸二氢钾缓冲溶液（ｐＨ ２． ２）－０． ０５ｍｏｌ／Ｌ四丁基溴化铵（３０： ７０：４）为分析流动相进行分离测定，紫外线检测波长为 ２９４ｎｍ。结果：左旋氧氟沙星浓度在０．１６～１６μｇ／ｍｌ范围内具有良好的线性关系，相关系数为 ０．９９９ ７；方法平均回收率为 １０３．５％，日内及日间差均小于２．５％；最低检测浓度 ５０ｎｇ／ｍｌ。 结论：样品无需预处理，直接进样分析测定，方法简便可行。

柱切换-高效液相色谱法与荧光偏振免疫法快速监测苯巴比妥血药浓度的比较

目的:比较柱切换-高效液相色谱法和荧光偏振免疫法快速监测卡马西平血药浓度的结果相关性,评价柱切换-高效液相色谱法用于苯巴比妥治疗药物监测的可行性。方法:收集兰州军区兰州总医院门诊共52例癫痫患者血样,在同一天内分别用柱切换-高效液相色谱法和荧光偏振免疫法同时测定苯巴比妥血药浓度。以柱切换-高效液相色谱法测定值(X),荧光偏振免疫法测定值(Y)进行相关回归分析和配对t检验。结果:柱切换-高效液相色谱法和荧光偏振免疫法测定值之间相关性良好,回归方程为:Y=0.995 3 X+0.046 2(n=52,r=0.999 0);测定值两者之间差异无显著性(P>0.05)。结论:柱切换-高效液相色谱法灵敏、简单、方便、可靠,且显著降低监测成本,可适用于广大医院临床血药浓度的常规监测。

柱切换HPLC法测定人血浆中的枸橼酸

目的采用柱切换HPLC法测定血浆中的枸橼酸。方法预处理柱为Ultimate CN,分析柱为YMC C18,流动相为0.05mol·L^-1KH2PO4（磷酸调p H2.85）,流速1 m L·min-1,检测波长210 nm。血浆样品经过酸化,超滤后进样。结果枸橼酸的线性范围为62.5-1250μg·m L^-1,方法回收率为97.41%-102.52%,批内RSD为3.52%-5.21%,批间RSD为3.07%-4.55%。结论所用方法操作简单,结果准确,重复性好,可用于血浆中枸橼酸的测定。

断血流皂苷A的药动学研究

目的研究断血流皂苷A在大鼠体内的药动学。方法建立柱切换高效液相色谱法测定血浆中断血流皂苷A浓度的方法。色谱条件:预处理柱(PC):大连装Kromasil C18(20 mm×4 mm,5μm);预处理流动相:甲醇-水;预处理流动相流速:1.0 ml.min-1;分析柱(AC):Lichrospher 100 RP-18e(250 mm×4 mm,5μm);分析流动相:甲醇-0.01 mol.ml-1磷酸盐缓冲液(磷酸调pH=3.0)(60∶40);分析流动相流速:0.6 ml.min-1;分析柱柱温:45℃;检测波长:250 nm。健康大鼠禁食24 h后,尾静脉注射断血流皂苷A溶液,测定不同时间的血药浓度。用3P87药动学程序对血药浓度一时间数据进行拟合。结果大鼠在尾静脉注射断血流皂苷A后,其主要药动学参数为:Vt(0.31±0.05)L.kg-1,CL(1.13±0.32)ml.min-1,Ke(0.90±0.18)h-1,t1/2(0.76±0.11)h,曲线下面积AUC(24.98±4.82)(μg.h).ml-1。结论断血流皂苷A在大鼠体内呈一室开放模型,进入体内迅速分布,代谢消除也较快。

Determination of Lansoprazole by Direct Injection of Plasma and High Performance Liquid Chromatography with Column Switching

High performance liquid chromatography with column switching has been developed for the determination of lansoprazole in plasma. The plasma samples were injected onto a pretreatment column packed with LiChromprep RP2 (25～40 mm) after simple dilution with distilled water. Distilled water was used to wash out protein and other polar components in plasma. After switching, the concentrated lansoprazole was eluted in the backflush mode onto a Shimpack CLC ODS column with methanol 0 2 mol·L 1 ammonium acetate (65:35) as mobile phase. Purge solutions were used for clean up and for regenerating the pretreatment column. The method showed good precision and recovery. The detection limit was 0 005 mg·L -1 plasma. The RSD’s (intra and interday) were less than 2 5% and 5 3% respectively. The method has been successfully used to determine pharmacokinetics of lansoprazole in Chinese volunteers.

CS-HPLC法测定抗病毒口服液中连翘苷、靛蓝及靛玉红的含量

目的:柱切换高效液相色谱法测定抗病毒口服液中连翘苷、靛蓝及靛玉红的含量.方法:采用Alltima C18分析柱(200mm×4.6mm),流动相:甲醇-磷酸盐缓冲液(pH=5;53:47),检测波长280nm,流速1ml·min-1,柱温20℃.结果:连翘苷、靛蓝及靛玉红分别在2.08～20.82μg·ml-1(r:0.9999)、2.82～28.16μg·ml-1(r:0.9999)和3.02～30.20μg.ml-1(r:0.9999)范围内呈线性.连翘苷、靛蓝及靛玉红的加样回收率分别为99.4%(RSD:1.0%)、101.7%(RSD为0.8%)和101.8%(RSD:1.6%).结论:实验简便,可靠,对控制药品质量及提高药品质量标准提供一个参考方法.