柱前衍生HPLC法测定薏苡仁油中的脂肪酸含量

目的:建立以高相液相色谱法测定药用植物油——薏苡仁油中的脂肪酸的方法。方法:以2,4’-二溴苯乙酮为衍生化试剂,18-冠-6醚为相转移催化剂,采用HiQ sil C8(250 mm×4 mm,5μm)反相柱,波长254 nm。以乙腈-水(85:15)为流动相等度洗脱,柱温30℃,设定流速为1.5 mL·min-1。正十七烷酸为内标,一次基线分离5种脂肪酸。结果:亚油酸的线性范围为0.026-0.387μg,软脂酸的线性范围为0.014-0.207μg,油酸线性范围为0.027-0.404μg,硬脂酸的线性范围为0.011-0.160μg,相关系数均为0.9999。平均回收率分别为100.4%,102.2%,99.4%,104.5%,RSD分别为1.0%,1.9%,0.7%,2.4%。结论:本方法重现性好,定量准确,可作为薏苡仁油中脂肪酸测定的定量方法。

柱前衍生HPLC法测定硫酸阿米卡星及其制剂中基因毒性杂质肼的研究

目的 建立柱前衍生HPLC法测定硫酸阿米卡星及其制剂中基因毒性杂质肼的含量。方法 以5%苯甲醛甲醇溶液为衍生化试剂,采用Agilent Zobax Eclipse XDB-C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,5μm),流动相A为0.1%甲酸溶液,流动相B为乙腈,进行线性梯度洗脱,流速1.0 mL/min,DAD紫外检测器,检测波长300 nm,柱温25℃,进样量20μL。结果 肼在0.5022~12.5543μg/mL浓度范围与峰面积的线性关系良好(r=0.9994),硫酸阿米卡星、注射用硫酸阿米卡星、硫酸阿米卡星注射液的平均回收率分别为94.8%、94.1%和94.3%。国内企业硫酸阿米卡星、注射用硫酸阿米卡星、硫酸阿米卡星注射液中的肼分别为未检出~1.8μg/g、未检出~0.2μg/g、未检出~3.1μg/g;日本Nichiiko公司的注射用硫酸阿米卡星和硫酸阿米卡星注射液均未检出肼。结论 新建柱前衍生HPLC法准确简便,专属性良好,可用于硫酸阿米卡星及其制剂中基因毒性杂质肼的控制。

L-缬氨酸的柱前衍生HPLC分析方法研究

L-缬氨酸(L-val)为支链氨基酸中的一种,是合成蛋白质的素材,也可以作为生物体的能源和前体,目前主要用于氨基酸输液和氨基酸口服液。L-缬氨酸在国外用途很广,用它作原料合成N-乙酰缬氨酸具有抗癌功能,本文对其柱前衍生HPLC分析方法进行了探讨。

柱前衍生HPLC法测定保山透心绿蚕豆中氨基酸的含量

建立了柱前衍生高效液相色谱法同时测定保山透心绿蚕豆中16种氨基酸的方法。方法以异硫氰酸笨酯（PITC）为柱前衍生试剂，采用Diamonsil AAA氨基酸分析柱用二元梯度洗脱，于UV254nm波长下检测，60min内16种氨基酸得到良好的分离、氨基酸浓度在0．1-0．5umol／mL范围内其浓度与响应值具有良好的线性关系．相关系数均大于0．9997，样品的相对标准偏差在1．36-5．43％之间，检出限为0．05umol／mL。相对其他柱前衍生测定氨基酸的方法而言，该方法快速、灵敏、；住确，样品处理简便易行，可用于保山透心绿蚕豆及其他豆类中氨基酸的分析测定。

柱前衍生化-HPLC测定马氏珠母贝肉中氨基酸的含量

以邻苯二甲醛-9-芴甲基氯甲酸酯为衍生化试剂，对氨基酸进行柱前衍生，建立了35℃下，醋酸钠缓冲液、甲醇及乙腈为流动相，用EclipseAAA氨基酸分析柱和二极管阵列检测器的氨基酸色谱分析方法，18种氨基酸在36min内获得了较好的分离，在一定浓度范围内，氨基酸的峰面积与浓度的线性相关系数在0．9906～0．9998之间，相对标准偏差为1．96％～5．45％（n=5）。并测定了马氏珠母贝肉蛋白中氨基酸的组成和含量。结果表明，马氏珠母贝肉蛋白中含有至少18种氨基酸，其中8种必须氨基酸总含量达39％以上，是一种优质的功能食品原料。

HPLC/MS法与柱前衍生化HPLC/UV法测定环维黄杨星D有关物质比较

目的:验证柱前衍生化HPLC/UV测定环维黄杨星D有关物质的可行性。方法:环维黄杨星D同异氰酸苯酯反应后,柱前衍生化HPLC/UV测定环维黄杨星D有关物质并与HPLC/MS直接测定环维黄杨星D有关物质比较。结果:衍生化反应后,主峰与有关物质分离好,所测得的有关物质与HPLC/MS直接测定的环维黄杨星D有关物质一一对应。结论:环维黄杨星D中含分子量为386,388的杂质,每分子环维黄杨星D及有关物质均同2分子异氰酸苯酯定量反应,柱前衍生化HPLC/UV可测定环维黄杨星D有关物质,与HPLC/MS直接测定法相比,本法简单、准确。

板蓝根颗粒中精氨酸的柱前衍生化HPLC测定

目的 建立一种定量分析方法评价板蓝根颗粒的质量。方法 柱前衍生化 HPL C法 ,以 Phenom enODS C1 8柱 (10μm,4 .6 mm× 2 5 0 mm )分析柱 ;0 .1m ol/ L醋酸钠缓冲液 (p H6 .4 ) -乙腈 (86∶ 14 )为流动相 ,流速 1.0 ml/ m in;36 0 nm下进行检测 ,分析了不同来源的板蓝根颗粒中精氨酸的含量。结果 通过该法 ,成功地测定了板蓝根颗粒中精氨酸的含量 ,并且发现 ,不同来源的板蓝根颗粒中精氨酸的含量差别很大。结论 该法操作简单 ,重复性好 ,准确可靠 。

板蓝根中L-精氨酸的柱前衍生法HPLC分析

目的 建立板蓝根药材中 L-精氨酸的含量测定方法。方法 2 ,4 -二硝基氟苯 (DNFB)柱前衍生化 HPL C方法 ,以 Phenomen ODSC18柱 (4.6 mm× 2 5 0 mm,10μm)为分析柱 ,0 .1mol.L-1醋酸钠缓冲液 (p H 6 .4 ) -乙腈(86 :14 )为流动相 ,流速 1.0 m L .min-1,波长 36 0 nm下检测 ,分析了板蓝根药材中 L -精氨酸的含量。结果 本法操作简单 ,重复性好 ,并以该法分析了板蓝根药材中 L-精氨酸的含量。结论 本文建立的柱前衍生化 HPL C方法适合于板蓝根药材中 L -精氨酸的含量测定 ,结果表明 ,不同产地来源的板蓝根药材 L -精氨酸的含量存在着差别。

柱前衍生化HPLC法测定柊叶游离氨基酸成分及风味评价

建立柱前衍生化HPLC法测定柊叶游离氨基酸的方法,对其营养价值和风味进行评价。柱前衍生化HPLC法以异硫氰酸苯酯为衍生试剂,色谱条件为:C 18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),醋酸钠缓冲液-乙腈(93∶7)和乙腈-水(4∶1)为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温40℃,检测波长为254 nm。结果表明,18种氨基酸均呈现良好的线性关系(R^(2)>0.9990),柊叶游离氨基酸的平均回收率分别为98.3%~105.6%(RSD为0.63%~3.11%,n=6)。所建立的方法稳定、灵敏、重现性好,可用于柊叶游离氨基酸的定量分析。柊叶含有18种氨基酸及8种人体必需氨基酸,必需氨基酸总量为38.85%,接近于WHO/FAO模式值(40.0%),各种必需氨基酸组分达到WHO/FAO氨基酸成人模式的需求;鲜味氨基酸和甜味氨基酸的含量分别为10.73和5.20 mg/g,占呈味氨基酸总含量的22.58%和46.59%;鲜味氨基酸Asp和甜味氨基酸Thr的含量较高,分别为3.75 mg/g和3.33 mg/g,鲜味氨基酸Asp和芳香族氨基酸Cys的RCT值分别为125.00和20.50,对风味贡献最高。总之柊叶氨基酸种类齐全,比例合理,呈味氨基酸含量丰富,具有极大开发价值。

柱前衍生化HPLC法测定复方布洛芬缓释胶囊中精氨酸的含量

目的建立柱前衍生化HPLC法测定复方布洛芬缓释胶囊中精氨酸的含量。方法采用Waters Symmetry-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,以磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾2.0 g,加水1 000 ml溶解后,加磷酸0.45 ml,三乙胺3.0 ml,摇匀,经0.45μm滤膜过滤）-四氢呋喃（995∶5）-乙腈-甲醇=747.5∶2.5∶75∶175为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长为330 nm。结果精氨酸浓度在50~200μg/ml范围内,色谱线性响应良好（r=0.9998）,缓释胶囊中精氨酸含量测定的平均回收率为100.61%,精密度良好（RSD=2.01）。结论柱前衍生化HPLC法测定复方布洛芬缓释胶囊中的精氨酸含量结果准确、可靠、重现性好。

HPLC柱前衍生法2-氨基乙磺酸制备工艺还原阶段流程诊断

建立了利用HPLC柱前衍生对2-氨基乙磺酸制备工艺还原阶段的流程诊断方法,2-氨基乙磺酸工艺中还原阶段中2-氨基乙磺酸的产率可达91％,流程分析诊断结果表明HPLC可靠易行,便于对工艺流程的监控。

HPLC柱前衍生法测定兔血浆中海星甾醇(A1998)浓度

目的:建立高效液相色谱柱前衍生法测定兔血浆中海星甾醇(A1998)浓度。方法:用2,4-二硝基苯肼(2,4-DNPH)将A1998 C-17位上的2个羰基衍生化,形成双腙,以提高检测灵敏度。选用A1998的同系物3β-羟基雄甾-5烯-17酮己二酸酯(C6)作为内标。色谱条件:采用Agilent Zorbax Exend C18反相色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为100%甲醇,流速2.0 mL·min-1,检测波长为360 nm。结果:血样中A1998浓度在0.05-10μg·mL-1范围内具有良好的线性关系(r=0.9998),最低检测浓度为0.05μg·mL-1。回收率大于80%,日内及日间精密度RSD分别为3.2%-15%和6.7%-11%。结论:本方法灵敏、准确、实用,能够满足动物药物代谢动力学研究的要求。

柱前衍生高效液相色谱法检测8种枣水溶性多糖的单糖组成

建立了柱前衍生高效液相色谱法,对金丝小枣、大荔龙枣、晋枣、赞皇大枣、宣城圆枣、梨枣、无核小枣和骏枣中水溶性多糖的单糖组成及其比例进行分析比较。样品经清洗、烘干、粉碎、石油醚脱脂后,采用水提醇沉法得到水溶性多糖,经低温干燥后备用。水溶性多糖经三氟乙酸充分水解后,以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）作为衍生剂,HPLC法分析枣水溶性多糖的单糖组成。结果表明：柱前衍生高效液相色谱法检测水溶性多糖的单糖组成衍生方法简单、线性关系好,检测灵敏度高,单糖的最低检出限为0.14~0.33 nmol。8种枣多糖均由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖6种单糖组成,其单糖组成比例存在很大差异。其中,甘露糖在各多糖中含量均较低,半乳糖醛酸含量普遍较高,葡萄糖除了在赞皇大枣和金丝小枣两种制干型枣中含量较低以外,在其余6个品种中含量较高。

建立HPLC法测定妥布霉素滴眼液含量

目的：建立HPLC法对其含量进行测定。方法：选用Kromasil C18，4．6×250mm色谱柱，2.4-二硝基氟苯柱前衍生，流动相为乙腈：0．25％三羟甲基氨基甲烷（67：33），检测波长为365nm，流速为1．0ml／min，进样量为20μl，柱温为30℃。结果：妥布霉素保留时间处，辅料峰无干扰；标准曲线浓度范围0．002399mg／ml-0．01439mg／ml，R=0.9990；平均回收率=99．6％，RSD=0．88％；精密度RSD=0．29％；在24小时内，任取6个时间点。RSD=0．35％；50分钟为最佳处理时间。结论：该方法准确、可靠，便捷、快速，完全适合妥布霉素滴眼液（中间体）进行质量评价。

江苏栽培明党参中γ-氨基丁酸累积规律研究

目的用OPA柱前衍生HPLC法测定明党参中γ-氨基丁酸的含量，探寻γ-氨基丁酸含量与明党参生长时间的关系。方法取样品试液1mL，OPA衍生试剂1mL，硼酸缓冲液（0．2mol／L，pH8．5）5mL，定容至10mL，反应时间45min；流动相：流动相A为1．35％醋酸钠缓冲液（pH7．3），流动相B为135％醋酸钠（pH7．2）：甲醇（100：400），洗脱梯度及流速：0-20minB相30％，20—25minB相增至100％，维持8min；检测波长：336nm。柱温：40℃。结果在10-50μg／mL范围内对不同月份采收的样品在实验条件下测定，其平均含量为0．034％-0．116％。结论γ-氨基丁酸含量在1月、5月、8月相对较高，9月、10月和次年3月相对较低。

海星甾醇琥珀酸酯(A1998)脂肪乳静脉给药后在大鼠体内的组织分布

目的:研究海星甾醇琥珀酸酯(3β-羟基雄甾-5烯-17酮琥珀酸酯,A1998)脂肪乳经静脉给药后在大鼠体内的组织分布经时变化规律。方法:大鼠单次静脉注射20 mg.kg-1A1998脂肪乳后,分别于不同时间点剖取各组织脏器,采用HPLC柱前衍生法测定大鼠各组织脏器药物含量。结果:A1998在大鼠体内主要分布于肺、肝、脾等器官,给药后15 min,测得肺脏药物含量最高(32.73±3.87)μg.g-1,脾脏(23.47±8.04)μg.g-1及肝脏(14.87±1.63)μg.g-1次之,均远高于同时间点大鼠血药浓度。A1998在上述3脏器中药物浓度维持时间亦久,至给药36 h后仍能检测出较高浓度,分别为(4.37±2.74),(4.69±2.37)及(8.30±5.96)μg.g-1。静注A1998后心脏及肾脏中药物浓度的经时变化与同时间点血药浓度相似。在胃、小肠、子宫、卵巢、体脂中未检测到药物分布。结论:大鼠单次静脉注射20 mg.kg-1A1998脂肪乳后,药物在血浆中消除迅速,并快速分布于各组织。A1998在大鼠体内的组织分布具有较强的选择性,各组织中药物浓度经时变化结果提示对肺、肝、脾等脏器具有高度的亲和力。

开花对铁皮石斛多糖质量分数及单糖组成的影响

目的:揭示开花对铁皮石斛多糖质量分数及单糖组成的影响,为优质铁皮石斛培育提供依据。方法:采集铁皮石斛开花前样品、开花结束时经人工摘除花蕾与未摘花蕾的样品,采用苯酚-硫酸法测定铁皮石斛中多糖质量分数,柱前衍生HPLC检测多糖中的单糖组分。结果:摘花蕾样品与未摘花蕾样品比较,总多糖及多糖中的甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖绝对量分别高30.35%,26.44%,20.78%,57.80%,木糖,阿拉伯糖分别低28.33%,24.37%,半乳糖差异不显著。结论:开花显著消耗铁皮石斛药材中的多糖及多糖中甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖的量,而开花过程可能有利于木糖、阿拉伯糖积累。

吴茱萸多糖的分离和组成研究

目的对吴茱萸中多糖进行提取、分离和纯化,进一步研究吴茱萸多糖主要组分的单糖组成。方法采用水提醇沉法提取粗多糖,H2O2脱色、Sevag法除蛋白、透析制备精制品,用DEAE-32纤维素阴离子交换柱、Sephacryl S-400 SF型凝胶柱分离纯化多糖,经酸水解后,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化HPLC法分析单糖组成。结果从吴茱萸中分离纯化得两个主要多糖组分ERPS2a、ERPS3,二者的单糖组成均为甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖,ERPS2a的单糖物质的量比为2.1∶2.6∶3.4∶1.0∶7.9∶4.9,ERPS3的单糖物质的量比为1.0∶17.6∶2.7∶3.2∶19.8∶9.4。结论吴茱萸多糖得到有效分离纯化,两纯组分所含单糖种类相同,仅各单糖的组成比例不同。

高效液相色谱法对肉鸡组织样品中黄曲霉毒素B1残留量的测定

为了检测肉鸡组织中黄曲霉毒素B1（AFBl）的残留量，试验采用柱前衍生一高效液相色谱（HPLC）的分析方法，并周该方法对样品进行检测。结果表明：AFB1在0．5～50．0μg／L范围内具有良好的线性关系，相关系数大于0．999，检出限为0．1μg/kg,信噪比（S／N）=3：1。在0．5μg／kg、1．0μg/kg、2．0μg／kg3个添加水平下肝脏组织平均回收率为91．0％-107．0％，肌肉组织平均回收率为94．0％-105．4％，相对标准偏差（RSD）分别为0．8％～1．7％、1．2％-2．O％。说明本方法具有灵敏性、准确性和可重复性，可对动物组织样中AFBl残留进行定性和定量检测。