庆大霉素C组分和有关物质测定的HPLC-柱后衍生化法与脉冲安培电化学法的比较研究

目的：参考《欧洲药典》的HPLC-脉冲安培电化学法建立高效液相色谱-柱后衍生化法测定庆大霉素C组分含量及其有关物质,同时与电化学法进行比较研究。方法：采用亲水性Hydrosphere C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以含0.7%三氟乙酸及0.025%五氟丙酸的50 mmol·L-1氢氧化钠溶液（pH 2.6）-乙腈（98.5∶1.5）为流动相。衍生化法反应温度30℃,荧光激发波长340 nm,发射波长430 nm。电化学法采用脉冲安培检测器,金电极为工作电极,四电位波形工作模式。结果：两种方法测定的庆大霉素C组分（C1a,C2,C2a和C1）分别在5.82~233.00,6.92~277.00,4.00~160.00和6.23~249.00μg·ml-1的浓度范围内线性关系良好（r均≥0.999 3）,检测限和定量限范围分别为0.92~3.28 ng和1.37~5.19 ng。结论：两种方法的检测结果无明显差异。