柱后衍生高效液相色谱法测定虾中14种磺胺类药物残留量

建立了虾中14种磺胺类药物残留量的柱后衍生高效液相色谱检测方法。样品在加入内标物磺胺吡啶后用乙酸乙酯提取，提取液浓缩后用4 mL 乙酸乙酯溶解残余物，用盐酸溶液反萃取，正己烷去脂，盐酸溶液经滤膜过滤后，加入乙腈、甲醇和3.5 mol / L 乙酸钠溶液（体积比为5：5：20）的混合溶液混匀后，经高效液相色谱分离，用荧光胺衍生试剂进行柱后衍生，荧光检测器检测。采用基质标样添加法绘制标准曲线，内标法定量。对柱后衍生系统参数进行了优化，确定了荧光胺溶液的浓度、流速和反应温度分别为0.2 g / L、0.15 mL / min 和50℃。14种磺胺类药物在5～200μg / L 范围内具有良好的线性。磺胺类药物的定量限（LOQ，S / N =10）为1.0～5.0μg / kg。在1.0～100.0μg / kg 添加水平内，磺胺类药物的平均回收率为77.8％～103.6％，相对标准偏差（ RSD）为2.9％～9.1％（ n =6）。实验结果表明该方法灵敏、准确，重复性好，适用于虾中磺胺类药物的残留检测。

柱后衍生高效液相色谱法测定水产品中河豚毒素含量

采用柱后衍生高效液相色谱法检测水产品中的河豚毒素含量，选用河豚（Takifugu）和织纹螺（Nassarius）为主要研究对象，样品先由0．1％乙酸提取，经过C18固相萃取柱净化。以庚烷磺酸钠为离子对试剂，应用反相离子对液相色谱分离河豚毒素，采用在线柱后衍生系统，在110℃高温和4mol·L^-1 NaOH强碱条件下，将河豚毒素衍生化成具有荧光特性的C9碱，荧光检测器定量检测。河豚毒素在5～1600ng范围内呈良好的线性相关，相关系数r=0．9997；1、2、8μg·g^-1，3个浓度水平添加样，日内和日间的回收率为80．9％～91．2％、相对标准偏差为1．93％～5．57％；方法定量限为1μg·g^-1；从添加样色谱图上看，河豚毒素目标峰附近没有干扰峰，定性准确性好。采用柱后衍生高效液相色谱法与小鼠生物法检测同一阳性河豚样，检测结果一致性好。实验结果表明，柱后衍生高效液相色谱法适用于水产品中河豚毒素的检测。

柱后衍生高效液相色谱法检测膝沟藻毒素

探讨柱后衍生条件和流动相条件对膝沟藻毒素群(GTXs,麻痹性贝毒的一类)的反应荧光强度和分离效果的影响。柱后衍生条件分析结果显示,各GTXs对反应液pH值、温度、甲酰胺体积分数以及甲酸铵浓度等柱后衍生反应条件的感度有较大差异。确定最佳柱后衍生反应条件为70mmol/L高碘酸与含0.12mol/L氢氧化钾和0.75mol/L甲酸铵的20%甲酰胺溶液的混合液作为柱后衍生反应液、pH7.3～7.5、流速0.8min/mL、柱后反应温度50C。流动相条件分析结果显示,甲醇体积分数、庚烷磺酸钠浓度、pH值和磷酸浓度均显著影响各GTXs的保留时间和分离效果,确定最佳流动相条件为甲醇体积分数1%、庚烷磺酸钠浓度1.5mmol/L、磷酸浓度10mmol/L、pH7.3。灵敏度分析结果显示,除GTX2无明显差异外,GTX1、GTX3和GTX4的灵敏度分别为大岛法的4.7、3.4、3.8倍。

免疫亲和-光化学柱后衍生高效液相色谱法测定乳制品中黄曲霉毒素

建立了免疫亲和-柱后光化学衍生-高效液相色谱荧光法同时测定乳制品中6种黄曲霉毒素（B1,B2,G1,G2,M1,M2）的方法.样品经过黄曲霉毒素免疫亲和柱净化富集,采用SunFireTMC18色谱柱,以甲醇/乙腈/水（20/20/60,体积比）为流动相洗脱,经过柱后光化学衍生器衍生,外标法进行定量.结果表明,6种黄曲霉毒素在相应浓度范围内线性关系良好,线性相关系数r2均大于0.999,平均加标回收率在86.7％～106.3％之间,相对标准偏差RSD在1.9％～5.8％之间.该方法简单、准确、灵敏度高,适用于乳制品中多种黄由霉毒素的同时测定.

柱后衍生高效液相色谱法测定猪肉中的链霉素残留

猪肉样品经酸性氧化铝基质固相分散提取和C18固相萃取柱净化，链霉素残留液用甲醇从C18柱上洗脱，在氮吹仪上吹干，残渣用0.01mol／L。庚烷磺酸钠溶液溶解，用柱后衍生高效液相色谱法荧光检测，激发波长和发射波长分别为263、435nm。该方法线性范围为10-200μg/kg，三个添加水平的回收率为77．4％-86．5％，测量结果的相对标准偏差为2.00％～3．53％（n=5），检出限为5μg/kg。

柱后衍生高效液相色谱法测定罗汉果甜甙中黄曲霉毒素B_1

用柱后衍生高效液相色谱法测定了罗汉果甜甙中黄曲霉毒素B1（AFX B1）。用MYCOTOX^TM C18作为反相色谱柱，流动相为由甲醇、乙腈及水以22＋22＋56之比例混合的混合液。柱后衍生试剂为100mg·L^-1碘的水溶液，以荧光检测器在发射波长为365nm及激发波长为430nm条件下进行测定。在AFX B1的峰面积与质量浓度（mg·L^-1）之间呈线性关系，其回归方程为y=14．222x＋0．6253（r=0．998），在三个浓度水平（5．1，40．8及102μg·kg^-1）上进行回收率及精密度试验，所得回收率在81．4％～94．2％之间，相对标准偏差（n=10）在2．1％～4．59／5之间。

牛奶中氨基苷柱后衍生高效液相色谱法的建立

建立了庆大霉素(氨基苷类抗生素)在牛奶中残留量柱后衍生高效液相色谱检测法。牛奶样品采用磷酸缓冲液提取,三氯乙酸沉淀蛋白,固相萃取净化,甲醇洗脱氮气吹干。反相高效液相色谱法分离柱后衍生荧光检测。该方法简化了前处理步骤,缩短了分析时间,并促进了在线自动化分析技术的开发。本方法的线性、准确性和精密度以及检测限和定量限均符合标准方法的要求,适用于牛奶中庆大霉素残留量的检测。

柱后衍生高效液相色谱法测定酱油、醋中黄曲霉素B_1的含量

采用免疫亲和柱提取样品中的黄曲霉素 B1,柱后衍生系统和高效液相色谱相结合 ,快速、准确地检测酱油、醋中的黄曲霉素 B1的含量 ,检出限量可达 2 .5 ppb。方法简便、灵敏度高 ,可作为常规手段推广应用。

柱后衍生高效液相色谱法测定食用植物油中的黄曲霉素B_1的含量

目的:建立柱后衍生高效液相色谱法测定食用植物油中黄曲霉素Bl的含量。方法:采用免疫亲和柱提取样品中的黄曲霉素Bl,利用柱后衍生系统和高效液相色谱法相结合,检测食用植物油中黄曲霉素Bl的含量,并与国家标准规定的薄层荧光法相比较。结果:高效液相色谱法中黄曲霉素Bl的线性范围为10.2~51.0 ng·ml^(-1),r=0.999 6,平均回收率为87.3%(RSD=0.96%,n=6),检出限量可达1μg·kg^(-1)。结论:该方法简便、快速、灵敏度高,利于大量批次样品检测,可作为常规手段推广应用。

柱前衍生-高效液相色谱法测定巴戟天中氨基酸含量及营养价值评价

建立柱前衍生-高效液相色谱法测定巴戟天中氨基酸含量,采用氨基酸比值系数法评价其营养价值。采用盐酸水解法制得巴戟天氨基酸供试品溶液,以异硫氰酸苯酯和三乙胺为柱前衍生化试剂,采用高效液相色谱法,使用Ultimate Amino Acid色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)以0.1 mol/L无水乙酸钠-乙腈为流动相,梯度洗脱,柱温40℃,检测波长为254 nm,测定氨基酸含量;通过氨基酸比值、氨基酸比值系数、氨基酸比值系数分等评价其营养价值,并采用系统聚类和主成分分析对其进行分类分析。结果表明,15种氨基酸线性关系良好,相关系数r≥0.9996。16份巴戟天氨基酸总含量为17.87~102.15 mg/g,均检测到15种氨基酸,其中包含6种必需氨基酸,占总氨基酸含量的14.15%~32.06%;8种药用氨基酸,占总氨基酸含量的45.20%~56.31%。限制氨基酸为苏氨酸和亮氨酸,氨基酸比值系数分为33.87~61.31。不同巴戟天样品氨基酸组成相关性显著;主成分分析提取2个主成分,累计方差贡献率为97.085%,可将16批巴戟天分为三类。该实验测定方法简单有效,可同时分离测定15种氨基酸,精密度与重复性良好,有较高的药用价值,可为巴戟天的品质分析和资源开发利用提供参考。

柱前衍生-高效液相色谱法测定鱼类中组胺

建立测定鱼类中组胺含量的柱前衍生-高效液相色谱(HPLC)联合紫外检测分析方法。样品均质后先用三氯乙酸水溶液震荡超声提取,再用丹磺酰氯衍生,采用HPLC-紫外检测器在254 nm处对组胺衍生物进行检测,以色谱峰面积外标法定量。组胺的质量浓度在1.0~50.0μg/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数为0.9997,方法检出限为7.2μg/kg,定量限为24μg/kg。样品加标回收率为96.8%~99.2%,测定结果的相对标准偏差为1.6%~3.7%(n=6)。该方法快速准确、灵敏度高、重复性好,可用于鱼类产品中组胺的定量分析。

超声萃取-免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生高效液相色谱法同时测定蜂房药材中4种黄曲霉毒素

建立超声萃取-免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生高效液相色谱同时测定蜂房药材中黄曲霉毒素B_(1)、黄曲霉毒素B_(2)、黄曲霉毒素G_(1)、黄曲霉毒素G_(2)含量的分析方法。样品经粉碎,过孔径为120μm筛后,采用70%甲醇溶液超声处理30 min,经免疫亲和柱净化、高效液相色谱分离、光化学柱后衍生,通过荧光检测器测定4种黄曲霉毒素的含量。黄曲霉毒素B_(1)的线性范围为0.0104~0.0520 ng,相关系数为0.9999;黄曲霉毒素B_(2)的线性范围为0.0038~0.0190 ng,相关系数为0.9998;黄曲霉毒素G_(1)的线性范围为0.0108~0.0540 ng,相关系数为0.9998;黄曲霉毒素G_(2)的线性范围为0.0038~0.0190 ng,相关系数为0.9998。4种黄曲霉毒素检出限分别为0.42、0.15、0.43、0.15μg/kg,测定结果的相对标准偏差不大于2.5%(n=6),样品加标回收率为92.9%~96.9%。该方法操作简便,灵敏度高,可用于蜂房中黄曲霉毒素含量的测定。

混合分散固相萃取联合柱前衍生高效液相色谱法测定蜂蜜中草甘膦残留

建立蜂蜜样品中强极性农药草甘膦的多壁碳纳米管(MWCNTs)和十八烷基硅烷键合硅胶(C18)混合分散固相萃取联合柱前试剂衍生的高效液相色谱测定方法。蜂蜜样品经水溶解后,震荡超声提取草甘膦,提取液先经60 mgMWCNTs和120mgC18混合分散固相吸附剂吸附净化,然后用1.0mg/mL9-芴基氯甲酸酯乙腈溶液进行柱前试剂衍生。目标组分经色谱柱分离后采用荧光检测器检测。草甘膦的质量浓度在0.005~5.00μg/mL范围内与色谱峰面积具有良好的线性关系,相关系数为0.9999,方法检出限为0.025 mg/kg。样品加标回收率为78.1%~92.3%,测定结果的相对标准偏差为2.8%~8.4%(n=6)。该方法可为食品卫生监管部门提供技术参考。

DMB衍生-高效液相色谱法测定重组人促卵泡激素中的唾液酸含量

目的建立采用4,5-亚甲二氧基-1,2-苯二胺二盐酸盐(DMB)衍生-高效液相色谱-荧光检测器(HPLCFLD)法(DMB衍生法)同时测定重组人促卵泡激素(rhFSH)中2种唾液酸组分N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc)和N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)含量的方法。方法将DMB衍生法与邻苯二胺衍生-高效液相色谱法(邻苯二胺衍生法)进行对比研究,对DMB衍生法中的水解条件进行优化并确定最终方法为rhFSH原液经酸水解后,采用DMB进行衍生,经Agilent ZORBAX 300SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,采用荧光检测器检测。结果与邻苯二胺衍生法相比,DMB衍生法能够实现Neu5Gc与Neu5Ac相关杂质的有效分离。该方法Neu5Gc和Neu5Ac分别在0.5~5.0μg·mL^(-1)(r=0.9999)和25~250μg·mL^(-1)(r=0.9998)浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系;Neu5Gc和Neu5Ac的检测限分别为11.07、10.30 ng·mL^(-1),定量限分别为33.21、20.60 ng·mL^(-1),两者回收率分别为(99.63±1.33)%(n=9)和(100.62±1.58)%(n=9),RSD分别为1.3%(n=9)和1.5%(n=9)。结论该方法专属性强、灵敏度高、精密度和准确度良好,可用于准确测定rhFSH中唾液酸Neu5Gc和Neu5Ac的含量。

柱前衍生-反相高效液相色谱法测定扶正补血食疗方胶原蛋白含量

目的基于RP-HPLC法对扶正补血食疗方中胶原蛋白含量进行测定,并通过正交试验优选出扶正补血食疗方中胶原蛋白的最佳提取方法。方法于2021年12月至2022年1月将样品以6 mol/L盐酸于110℃水解24 h,利用AQC试剂进行衍生,采用Diamonsil-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以流动相A:无水乙酸钠11.48 g,三乙胺1.72 g,EDTA 1 mg,溶于1 L水中,用磷酸调pH为4.95;流动相B:乙腈水溶液(体积分数60%),梯度洗脱;柱温37℃;检测波长254 nm;流速1 mL/min;进样量10μL。以羟脯氨酸含量为评价指标,考察煎煮时间、料水比、煎煮温度对胶原蛋白含量的影响,优化其制备工艺。结果羟脯氨酸在10~500 mg/L浓度范围内线性关系良好(Y=0.0365X+0.5173,R^(2)=0.9991),平均回收率95.11%,相对标准偏差(RSD)为1.12%(n=6)。猪蹄胶原蛋白的最佳提取工艺为:A_(3)B_(1)C_(3),即加热温度为100℃,料水比为1∶8,提取时间为3 h。结论该方法快速准确,稳定可行,可作为扶正补血食疗方中胶原蛋白含量的测定方法,为该产品质量控制及临床应用提供科学依据。

丹磺酰肼衍生-高效液相色谱-荧光检测器法测定水中痕量3-羟基丙醛

提出了丹磺酰肼衍生-高效液相色谱-荧光检测器法测定水中痕量3-羟基丙醛(3-HPA)的方法。将1.0 g水样、2.0 mL含200 mg·L^(-1)丹磺酰肼的乙腈溶液、1.0 mL 3.0%(体积分数)乙酸溶液混合,再用乙腈定容至50 mL,于40℃衍生反应30 min。以Agilent Eclipse Plus C_(18)色谱柱为固定相,以不同体积比的乙腈-0.10%(质量分数)七氟丁酸溶液的混合溶液为流动相进行梯度洗脱,采用荧光检测器测定。结果表明:衍生试剂丹磺酰肼与3-HPA衍生物在20 min内可实现基线分离;3-HPA的质量浓度在7.6~380.0μg·L^(-1)内与衍生物的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为1.1μg·L^(-1);方法用于实际水样分析,测定值的相对标准偏差(n=6)为0.71%,3-HPA的加标回收率为98.0%~102%。

柱前衍生超高效液相色谱法测量脂蛋白相关磷脂酶A2含量

目的:脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)在血液中的含量能够反映动脉粥样硬化及其它心脑血管疾病的进展,故建立Lp-PLA2柱前衍生超高效液相色谱(UPLC)测定方法。方法:Lp-PLA2酸水解后,经柱前衍生剂处理,以γ-氨基丁酸为内标,采用超高效液相色谱法测定其中丝氨酸、丙氨酸、异亮氨酸、赖氨酸4种衍生物的含量,进而推算出Lp-PLA2纯品的含量。测定结果与同位素稀释质谱法相比较,验证方法的可行性。结果:在最优条件下,所建立的柱前衍生超高效液相色谱(UPLC)法测定的Lp-PLA2含量为0.1183 mg/mL,相对标准偏差为2.48%,扩展不确定度为0.0026 mg/mL(k=2),检出限和定量限分别为1.96×10^(-2)mg/mL和6.55×10^(-2)mg/mL。结论:该方法成本较低且溯源链清晰、准确度高,可作为一种补充验证方法用于Lp-PLA2标准物质的定量。

柱前衍生-高效液相色谱法测定冷饮中的甜蜜素

本文建立了一种测定冷饮中甜蜜素含量的高效液相色谱法。在酸性条件下,甜蜜素和次氯酸钠反应,经正庚烷萃取后,采用高效液相色谱法检测。结果显示,甜蜜素在进样量10μL、流速1.0 mL·min^(-1)、波长314 nm、流动相乙腈-水=70∶30的仪器条件下,在线性范围内线性关系良好,加标回收率为96.33%~99.83%,RSD为0.73%~0.96%。该方法操作简单、抗干扰能力强、定量准确,适用于检验冷饮中的甜蜜素。

基于柱前Hantzsch衍生高效液相色谱法检测纸吸管中微量游离甲醛

目的:建立了测定纸吸管中微量游离甲醛含量的柱前Hantzsch衍生高效液相色谱法。方法:样品中微量游离甲醛经水提取后与乙酰丙酮在乙酸铵-乙酸缓冲溶液中生成甲醛衍生产物,经高效液相色谱对甲醛衍生物进行分离、检测进而测定纸吸管中微量游离甲醛含量。结果:甲醛在0.05~3.20 mg·L^(-1)质量浓度内呈良好的线系关系,R2=0.9998,方法检出限为1.0 mg·kg^(-1),定量限为2.5 mg·kg^(-1)。按低、中、高浓度的3个标准加入水平的加样回收率为87.2%~106.1%,RSD为1.42%~4.63%。结论:本方法操作简便、选择性好、定量准确、精密度高,适用于纸吸管中微量游离甲醛含量的测定。