花粉管通道法遗传转化核桃的研究

为了提高核桃花粉管通道法转化成功率,以‘清香’核桃(Juglans regia L.)为试材,研究了外源DNA导入受体时间、DNA浓度和导入方法对导入效率的影响。结果表明:外源DNA滴加处理的适宜时间为授粉后14～20h;外源 DNA 注射处理的适宜时间为授粉后24h。综合考虑外源DNA浓度对坐果率和GUS检测结果的影响,认为350～500μg .mL-1DNA适宜转化。采用切割柱头滴加、柱头直接滴加和子房注射等3种导入外源DNA的方法均获得了转化成功的果实,其中以切割柱头滴加法获得的转化果实率最高(36.4%),其次是柱头直接滴加法(20.7%),子房注射法因易造成机械损伤,坐果率最低(10.9%)。