柑桔和土壤中速霸螨的残留分析方法研究

采用同一前处理方法,建立了利用柱层析分离技术对柑桔和土壤样品中的杀螨剂速霸螨(克螨特和霸螨灵)进行分离,用GC和HPLC分别检测样品中克螨特和霸螨灵残留量的检测方法。在添加水平为0.1～5.0mg·kg-1时,回收率在80.5%～106.8%之间,变异系数最大为7.45%。该方法对克螨特和霸螨灵在柑桔和土壤样品的实测最低检知浓度分别为0.027和0.001mg·kg-1。

恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶在大肠埃希菌中的可溶性表达、纯化和鉴定

目的 在大肠埃希菌 (E .coli)中尝试非融合蛋白技术可溶性表达恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶 (GDH) ,以获得具有相对完整空间表位的重组非融合GDH。 方法 将恶性疟原虫GDH基因克隆到pET 2 3 (a)表达载体中 ,转化E .coliBL2 1菌株 ,异丙基 β D 硫代半乳糖苷诱导表达 ,菌体反复冻融后 ,通过十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)分析表达产物的存在形式 ,可溶性表达产物经Source Q及Source S层析纯化并用SDS PAGE分析纯度。通过蛋白质印迹试验鉴定表达和纯化产物的免疫学活性。 结果 可溶性重组GDH分子占宿主蛋白 15 %左右 ,相对分子质量为 5 2 0 0 0。经过阴离子和阳离子交换层析纯化后 ,GDH纯度达 90 %以上。该蛋白质具有良好的抗原性。 结论 通过E .coli表达系统和柱层析分离技术可获得高纯度。