柳茶多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫调节及抗炎作用

为研究柳茶多糖(SAPs)对免疫抑制小鼠的免疫调节及抗炎作用,利用环磷酰胺皮下注射造模法制备免疫抑制小鼠模型,并在基础上进行SAPs灌胃试验。将110只小鼠随机分成6组,即生理盐水对照组(PS组,20只)、环磷酰胺模型组(CTX组,15只)、盐酸左旋咪唑阳性组(LH组,15只)以及SAPs低、中、高剂量组(SAPs-L、SAPs-M、SAPs-H组,每组各20只),在试验第1~10天,除PS组按0.01 mL/g BW的剂量皮下注射生理盐水外,其余试验组均按照与PS组相同的剂量皮下注射80 mg/kg BW环磷酰胺(生理盐水溶解),每天1次。造模成功后,SAPs-L、SAPs-M、SAPs-H组小鼠分别按200、400、800 mg/kg BW的给药量灌胃SAPs(生理盐水溶解),LH组按30 mg/kg BW的给药量灌胃盐酸左旋咪唑(生理盐水溶解),CTX组与PS组按0.01 mL/g BW的剂量灌胃生理盐水。灌胃试验从第11天开始,每天1次,持续20 d。测定小鼠体重增长率、免疫器官(脾脏、胸腺)与内脏器官(心脏、肝脏、肺脏和肾脏)指数、碳粒廓清指数与吞噬指数、血常规指标;采用酶联免疫吸附测定法检测血浆中白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及免疫球蛋白A(IgA)含量;采用蛋清致小鼠足趾肿胀测定SAPs抗炎效果。结果显示:环磷酰胺开始造模后的第1~10天,除PS组外其他试验组小鼠体重增长率和日采食量均出现急剧下降,从第11天开始灌胃试验后,SAPs-L、SAPs-M及SAPs-H组小鼠体重增长率和日采食量逐渐上调并趋于PS组。与PS组比较,CTX组小鼠免疫器官与内脏器官指数、碳粒廓清指数与吞噬指数、血常规指标(白细胞数、红细胞数、血小板数、淋巴细胞数、中性粒细胞数、淋巴细胞百分比、单核细胞百分比和中性粒细胞百分比)以及血浆中IL-2、IFN-γ、TNF-α、IgA含量均显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),而SAPs-M组小鼠上述指标则较CTX组显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),并能有效抑制蛋清致小鼠足趾肿胀的程度。由此可知,400 mg/kg BW SAPs对环磷酰胺致免疫抑制小鼠的特异性、非特异性免疫功能具有增强作用,并能缓解蛋清所致小鼠炎性反应。

藏药柳茶提取物及其生物合成纳米银的抑菌活性研究

藏药柳茶是一种青藏高原特色植物,纳米银是目前研究应用最为广泛的纳米抑菌材料,以藏药柳茶叶片为材料,采用加热回流法获得藏药柳茶提取物浸膏,一步还原法生物合成藏药柳茶纳米银抑菌剂,通过平板打孔法测定不同生长期、不同质量浓度、不同提取方法获得的藏药柳茶提取物的抑菌效果。结果表明:藏药柳茶提取物具有抑菌效果,幼苗期3月采摘70%乙醇提取质量浓度100 mg/mL藏药柳茶抑菌作用最强,其生物合成纳米银材料具有极强的抑菌活性[大肠埃希菌抑菌直径为(23.66±0.34)mm,白色念珠菌为(23.08±0.03)mm]。本研究结果表明,柳茶具有显著的抑菌效果,且能够合成出高效、稳定及环保的新型抗菌剂,为藏药柳茶资源的开发提供了新的途径。

柳茶多糖对高热环境秀丽隐杆线虫运动的影响及其机制研究

目的研究纯化后柳茶多糖对高热环境秀丽隐杆线虫运动的影响。方法超声辅助提取制备的柳茶多糖经DEAE Sepharose Fast Flow葡聚糖凝胶和Sephadex G100葡聚糖纯化后得到两种柳茶多糖(SLP-1和SLP-2)对其进行结构分析及高热线虫运动试验。结果SLP-1和SLP-2是13.5 kDa左右的含硫酸根的三螺旋结构酸性多糖。SLP-1多糖是由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、果糖和阿拉伯糖组成,而SLP-2多糖不含果糖。在提高秀丽隐杆线虫热刺激运动能力上,SLP-2表现更为优异,其机制是通过上调热休克因子1信使核糖核酸(heat shock factor 1 messenger ribonucleic acid,hsf-1 mRNA)来抵御高热环境对机体造成的损伤,上调热休克蛋白16.2信使核糖核酸(heat shock protein 16.2 messenger ribonucleic acid,hsp-16.2 mRNA)、热休克蛋白70信使核糖核酸(heat shock protein 70 messenger ribonucleic acid,hsp-70 mRNA)和热休克蛋白90信使核糖核酸(heat shock protein 90 messenger ribonucleic acid,hsp-90 mRNA)表达以保护衰老相关蛋白结构的稳定,还可通过调节核因子红细胞系2相关因子2-血红素加氧酶-1(nuclear factor erythroid 2-related factor 2-heme oxygenase 1,Nrf2-HO-1)途径以提高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的表达,从而提高抗氧化系统的总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)活性,,避免生成丙二醛(malondialdehyde,MDA)。结论柳茶多糖SLP-2是一种提高机体在高热环境中运动能力的功能性食品添加剂。

藏药柳茶提取物对单纯性肥胖大鼠脂质代谢的影响

目的观察藏药柳茶对单纯性肥胖大鼠脂质代谢的影响,初步探讨其作用机制。方法:复制单纯性肥胖大鼠模型,藏药柳茶水提取物灌胃给药8周后,检测体重、体长,计算Lee’s指数,分离并称取肾周及睾周脂肪重量;生化法检测血糖(GLU)、血总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)的含量;放射免疫法检测血清瘦素(LEP)和胰岛素(INS);琼脂糖凝胶电泳检测脂肪细胞凋亡状况。结果:柳茶治疗后动物血糖、血脂含量明显降低,血瘦素和胰岛素水平下降。但实验未见到明显促脂肪细胞凋亡的作用。结论:藏药柳茶可明显抑制大鼠体重增长,其作用机制可能与改善瘦素和胰岛素抵抗、加快脂肪代谢有关。

柳茶多糖的分离纯化及气相色谱-质谱分析

目的首次提取柳茶中的水溶性粗多糖并进行分离、纯化及组成分析。方法柳茶经热水提取、乙醇沉淀、Sevag法去蛋白、H2O2脱色,逆向流水透析得多糖精制品。将精多糖衍生化后运用气相色谱-质谱法对其化学成分进行分析。结果确定了柳茶中水溶性多糖分别由核糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,其中以核糖、葡糖糖、半乳糖为主。结论该方法简便、灵敏,可以准确测定出柳茶多糖中所含有的各种单糖。

藏药柳茶提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠降糖作用的研究

目的研究柳茶提取物对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠的空腹血糖、糖耐量及胰腺病理变化的影响。方法腹腔注射四氧嘧啶(ALX)建立糖尿病小鼠模型,随机分为模型对照组、阳性对照组、柳茶提取物高、中、低剂量组,同时设空白组,正常给药组,连续给药14 d后,测定血葡萄糖浓度,进行小鼠糖耐量实验,取各组小鼠胰腺进行包埋、固定、HE染色观察柳茶水提物对其修复作用。结果柳茶中、低剂量组可显著降低糖尿病小鼠空腹血糖(P<0.01),对其糖耐量异常有良好改善作用;高剂量组对血糖影响不明显,只延缓高血糖小鼠糖耐量曲线。各剂量对正常小鼠血糖都没有明显作用。结论柳茶中、低剂量组对小鼠糖尿病有良好治疗作用,各剂量对四氧嘧啶造成的胰腺损伤都有一定修复作用。机制可能与修复胰岛β细胞,调节代谢有关。

藏药柳茶中的三萜类化学成分

柳茶是藏药和民间草药,其枝叶可治疗消化不良,胃痛等疾病。我们从其枝叶中分离签定了6个三萜类化合物。

柳茶提取物免疫调节作用的实验研究

对服用柳茶提取物２ｗｋ的小鼠作了免疫机能和形态学方面的实验研究。结果表明：①柳茶的二种提取物均可显著促进淋巴细胞转化；增加正常小鼠抗绵羊红细胞抗体水平；改善腹腔巨噬细胞吞噬功能；水提取物尚能促进ＩＬ－２的产生。②对胸腺重量无影响，但明显增加脾重；光、电镜下见胸腺、脾脏内大量淋巴细胞增生、细胞代谢活跃等改变。提示：柳茶可能是一对免疫功能具多种作用的调节剂。

藏药柳茶提取物调节肥胖大鼠脂代谢的作用机制研究

目的:探讨藏药柳茶调节单纯性肥胖大鼠脂质代谢的作用机制。方法:复制单纯性肥胖大鼠模型,以藏药柳茶提取物高、中、低不同剂量灌胃给药8 w后,剥离肾周脂肪制作组织切片,显微镜下观察脂肪细胞数量及形态。实时荧光定量RT-PCR法检测脂肪组织中脂联素(Adiponectin)、脂联素受体2(AdipoR2)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome Proliferator-activated Recep-torsγ,PPARγ)mRNA水平变化。用Western Blot检测脂肪组织AMPK蛋白表达情况。结果:与模型组比较,使用柳茶提取物8 w后400倍显微镜下全视野范围内脂肪细胞直径减小、数量增加。脂肪组织中Adiponectin、AdipoR2、AMPK、PPARγmRNA水平均有不同程度升高。柳茶中剂量组大鼠脂肪组织AMPK蛋白表达量显著高于模型组。结论:藏药柳茶的减肥作用机制可能是通过脂联素的信号转导途径来完成的。

藏药柳茶提取物对非酒精性脂肪肝病大鼠肝脏保护作用及其机制研究

目的研究藏药柳茶提取物(治疗胃胀痛及消化不良藏药)对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠肝脏保护作用的机制。方法用高脂饮食复制NAFLD大鼠模型,随机分为4组:模型组、柳茶提取物低、中、高剂量组;同时设立正常对照组,相应干预8周后,处死。制作肝组织切片观察形态变化;检测血清ALT、AST水平;荧光定量RT-PCR法测抗氧化酶GSH-PX2及CAT mRNA表达量。结果与模型组相比,柳茶干预组肝细胞损伤减轻,肝功能改善,CAT mRNA表达显著增加,GSH-PX2 mRNA表达有不同程度增加。结论藏药柳茶提取物对NAFLD大鼠肝脏损伤具有保护作用;可能与上调肝脏抗氧化酶GSH-PX2、CATmRNA的表达,增强其抗脂质过氧化能力有关。

柳茶提取物对正常小鼠血SOD、GSH－Px及MDA含量的影响

柳茶提取物对正常小鼠血ＳＯＤ、ＧＳＨ－Ｐｘ及ＭＤＡ含量的影响兰州医学院病理生理室刘昕，潘兴斌，王荫棠，燕玉霞（７３００００）兰州医学院药学系杨永建柳茶为一种藏药，又名窄叶鲜卑花，民间用于治疗胃痛，关节痛等症。正常小鼠在服用柳茶水煎剂后，整体状况有较大...

藏药柳茶提取物对K562肿瘤细胞生长的影响

目的 :验证柳茶 (Liucha)对肿瘤细胞体外生长的抑制作用 ,初步探讨其作用机制。方法 :应用半固体琼脂培养法检测柳茶提取物对人白血病K562细胞集落形成能力的影响 ,用四甲基偶氮唑蓝 (MTT) [3 - (4 5 -dimethylthiazo(-z-yl) 2 5 -diphenyltetrazoliumbromide) ]比色法观察柳茶提取物对肿瘤细胞代谢的影响 ,并在电镜下观察药物作用后肿瘤细胞形态学的变化。结果 :与对照组相比 ,使用柳茶提取物后肿瘤细胞体外生长繁殖受到限制 ,表现为细胞软琼脂集落形成能力低下和MTT比色吸光度A值的降低。电镜下有细胞核周间隙变窄 ,染色质块状聚集浓染 ,线粒体肿大、嵴消失甚至呈空泡状等改变。结论 :柳茶提取物具有抑制K562肿瘤细胞体外生长的潜能 ,作用机制可能与上述一系列形态学变化有关 ,这些变化可影响肿瘤细胞的代谢 。

藏药柳茶的化学成分研究

目的 研究藏药柳茶的化学成分。方法 乙醇回流提取,反复硅胶柱层析。结果 分得5个化合物,光谱鉴定分别为甲基阿魏酸(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅱ)、二十醇(Ⅲ)、二十九烷醇-10(Ⅳ)和十一烷醇(Ⅴ)。结论 除二十九烷醇-10外,其余4种化合物为首次从该植物中获得。

RP-HPLC测定藏药柳茶中阿魏酸和异阿魏酸的含量

目的建立测定藏药柳茶中阿魏酸与异阿魏酸含量的方法。方法采用高效液相色谱法。岛津CLC—ODS色谱柱（150mm×6mm，5μm），流动相为0．1％磷酸水溶液-甲醇（71：29），流速1ml·min^-1，检测波长322nm，柱温30℃。结果阿魏酸和异阿魏酸浓度分别在2．31—36．96μg·ml^-1（r=0．9989）和8．09—129．44μg·ml^-1（r=0．9998）范围内与峰面积呈良好的线性关系；样品中阿魏酸和异阿魏酸平均回收率分别为98．16％和98．58％，RSD分别为0．49％和0．70％（n=3）。结论所建方法准确、简便，适用于藏药柳茶中阿魏酸和异阿魏酸的含量测定。

柳茶调节脂类代谢作用的研究

柳茶7．5～15．0g（生药）/kg灌胃能显著降低正常或高血脂大鼠血清TG，β－LP，TC，升高HDL－C水平。离体实验表明，柳茶可促进脂肪分解。与对照组比较柳茶可使大鼠血清FFA含量显著升高，脂肪细胞较小，光镜下有粘液样变性。表明柳茶有明显的调节脂类代谢的作用．

藏药柳茶挥发油化学成分的研究

目的 对藏药柳茶的挥发油进行化学成分分析。方法 应用水蒸气蒸馏法从藏药柳茶中提取挥发油 ,用GC -MS联用法鉴定化合物 ,峰面积归一法测定其百分含量。结果 鉴定了 4 3个化合物 ,占挥发油总量的 82 .6 8%。结论 柳茶的主成分为E -罗勒烯酮和芳樟醇。

柳茶提取物对非酒精性脂肪肝大鼠脂质代谢的影响

目的观察柳茶提取物对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏脂质代谢的影响并探讨其作用机制。方法复制非酒精性脂肪肝动物模型;设正常对照组、模型组、西布曲明阳性对照组和柳茶治疗组,药物干预8周后检测各组肝功能、血脂水平及肝匀浆脂肪含量;制作肝组织切片观察形态学变化;实时荧光定量法测肝脏线粒体、微粒体脂质代谢关键酶LCAD、CYP4A1的m-RNA表达水平。结果与非酒精性脂肪肝模型组相比,柳茶治疗后动物肝TG和CHOL水平明显降低;血中ALT、AST含量亦降低,TG、CHOL均有显著下降;而HDL-C水平升高;肝脏脂肪变程度减轻;肝组织LCAD、CYP4A1m-RNA表达水平分别为模型组的4.18、6.04倍。结论柳茶提取物能调节非酒精性脂肪肝动物肝脏的脂肪代谢,减轻肝细胞脂肪变,改善肝功能,其作用机制与上调动物肝脏脂质代谢关键酶LCAD、CYP4A1m-RNA的表达有关。

藏药柳茶提取物对非酒精性脂肪肝病大鼠肝脏脂肪代谢的影响

目的:研究柳茶提取物对非酒精性脂肪肝病大鼠肝脏脂肪代谢的影响.方法:高脂饲料饲养SD大鼠,6wk后建立非酒精性脂肪肝病模型.随机分为4组:模型组、柳茶提取物低、中、高剂量组,另设正常对照组.分别给相应干预8wk后处死,测血丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)水平及肝匀浆脂肪含量;制作肝组织切片在光镜下观察形态变化;实时荧光定量RT-PCR法测肝脏脂肪代谢关键酶PPARα、ACOmRNA表达量,Westernblot检测PPARα蛋白表达水平.结果:与模型组相比,柳茶提取物各剂量组肝功能有不同程度好转,与模型组比较,柳茶提取物低、中剂量组ALT、AST水平均明显降低,有统计学差异(29.83mmol/L±2.78mmol/L,25.78mmol/L±2.63mmol/Lvs31.90mmol/L±2.52mmol/L;110.53mmol/L±12.33mmol/L,100.45mmol/L±12.57mmol/Lvs128.61mmol/L±16.01mmol/L,P<0.05或0.01);肝匀浆中柳茶提取物中剂量组胆固醇(CHOL)及三酰甘油(TG)含量均较模型组明显下降,差异具有统计学意义(0.30mmol/L±0.02mmol/Lvs0.47mmol/L±0.04mmol/L,0.75mmol/L±0.06mmol/Lvs0.85mmol/L±0.04mmol/L,P<0.01或0.05).肝细胞形态学改善以柳茶提取物中剂量组表现最为显著,肝细胞内脂滴消失,无炎性细胞浸润及细胞坏死,胞质疏松,肝窦增宽;与模型组相比,柳茶提取物中、高剂量组PPARα、ACOmRNA表达量增加(均P<0.01);柳茶组PPARα蛋白与模型组相比有不同程度的增加,且与柳茶剂量呈正相关,剂量越大,PPARα蛋白的表达量也越大.结论:柳茶提取物可上调脂肪代谢关键酶PPARα、ACOmRNA水平,促进PPARα蛋白合成,增强非酒精性脂肪肝大鼠肝脏脂肪酸氧化,改善肝功能.

藏药柳茶的药用功效研究进展

柳茶为种子植物蔷薇科鲜卑花属植物窄叶鲜卑花的一种(Sibiraea angustata(Rehd.)Hand.-Mazz),广泛分布于我国青海、四川、甘肃、云南及西藏等地,是藏族民间常用药物之一。其主要含有三萜类化合物、有机酸、有机酯、烷烃类等活性成分。研究发现柳茶具有调节糖脂代谢、减轻体重、抗氧化、调节免疫、保肝、抗肿瘤、延缓衰老、抑菌及促进消化等多种药用功效。

柳茶对高脂血症大鼠血脂、超氧化物歧化酶及丙二醛的影响

目的观察柳茶对实验性高脂血症大鼠血脂、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛含量的影响。方法以喂饲法建立高脂血症大鼠模型,将大鼠分为正常对照组、模型组、柳茶(生药)15、7.5 g/kg组4组。检测大鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、丙二醛含量及SOD活性。结果柳茶可明显降低高脂血症大鼠血清TC、TG、LDL、丙二醛含量,提高HDL含量及SOD活性。结论柳茶对高脂血症大鼠具有调血脂及抗脂质过氧化作用。