柴桂沙麦汤对肺阳虚小鼠炎症细胞因子和脾脏T淋巴细胞亚群的影响

目的:探讨柴桂沙麦汤对肺阳虚小鼠炎症细胞因子和脾脏T淋巴细胞亚群的影响,研究其可能的免疫作用机制。方法:60只SPF级Bal b/c小鼠按完全随机分组法分为空白组、模型组、柴桂沙麦汤低剂量组、柴桂沙麦汤中剂量组、柴桂沙麦汤高剂量组,每组12只。将小鼠置于低温环境,采用冰水游泳^(+)内服冰水复制肺阳虚小鼠模型。造模结束后,柴桂沙麦汤低、中、高剂量组小鼠分别给予2.7、5.4、10.8 g/(kg·d)柴桂沙麦汤灌胃,空白组和模型组小鼠给予等体积生理盐水灌胃,1次/d,连续30 d;观察各组小鼠体质量的变化,计算各组小鼠脾脏指数和胸腺指数;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测小鼠血清IL-2、IL-6和TNF-α水平;采用流式细胞术检测各组小鼠脾脏T淋巴细胞亚群CD3^(+)、CD4^(+)和CD8^(+)的百分比及CD4^(+)/CD8^(+)比值;采用HE染色法观察小鼠肺组织病理改变情况。结果:与空白组小鼠比较,模型组小鼠行动迟缓,精神不振,毛发失去光泽,体质量明显降低(P<0.05),小鼠在给予柴桂沙麦汤后精神状态明显好转。与模型组比较,柴桂沙麦汤低、中、高剂量组小鼠体质量明显升高(P<0.05),但柴桂沙麦汤低、中、高剂量组小鼠间体质量比较,差异无统计学意义(P>0.05);时间因素与组别因素之间存在交互效应(P<0.05)。与模型组比较,柴桂沙麦汤低、中、高剂量组小鼠脾脏指数明显升高(P<0.05),但柴桂沙麦汤低、中、高剂量组小鼠脾脏指数组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,柴桂沙麦汤低、中、高剂量组小鼠胸腺指数均明显升高(P<0.05);柴桂沙麦汤高剂量组小鼠胸腺指数明显高于柴桂沙麦汤低剂量组(P<0.05)。与模型组比较,柴桂沙麦汤低、中、高剂量组小鼠血清IL-2水平均明显升高(P<0.05),且柴桂沙麦汤低剂量组<柴桂沙麦汤中剂量组<柴桂沙麦汤高剂量组。与模型组比较,柴桂沙麦汤低、中、高剂量组小鼠血清IL-6水平均明显降低(P<0.05),且柴桂沙麦汤高剂量组<柴桂沙麦汤中剂量组<柴桂沙麦汤低剂量组。与模型组比较,柴桂沙麦汤低、中、高剂量组血清TNF-α水平均明显降低(P<0.05);柴桂沙麦汤中剂量组小鼠血清TNF-α水平低于柴桂沙麦汤低剂量组(P<0.05);柴桂沙麦汤高剂量组小鼠血清TNF-α水平与柴桂沙麦汤中剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,柴桂沙麦汤低剂量组小鼠脾脏CD3^(+)T淋巴细胞水平明显升高(P<0.05),但CD4^(+)和CD8^(+)含量及CD4^(+)/CD8^(+)比值与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05);柴桂沙麦汤中、高剂量组小鼠脾脏CD3^(+)、CD4^(+)T淋巴细胞水平及CD4^(+)/CD8^(+)比值均明显升高(P<0.05),CD8^(+)T淋巴细胞水平均明显降低(P<0.05)。与空白组比较,模型组小鼠肺组织形态破坏,肺泡腔内出现明显炎症细胞浸润,柴桂沙麦汤低、中、高剂量组小鼠肺组织结构改善,肺泡腔隙增宽,腔内炎症细胞浸润明显减轻,以柴桂沙麦汤高剂量组改善最为明显,但未恢复至空白组水平。结论:柴桂沙麦汤可以提高肺阳虚小鼠机体细胞免疫功能,其作用机制可能与调节炎症细胞因子和脾脏T淋巴细胞亚群有关。

柴桂沙麦汤对体虚外感肺系疾病模型小鼠免疫功能、IL-4及HMGB1的影响

目的:研究柴桂沙麦汤对体虚外感肺系疾病小鼠肺系数,外周血CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、白细胞介素-4(IL-4)及肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的影响。方法:60只小鼠随机分为空白组、模型组及柴桂沙麦汤高、中、低剂量组,每组12只。空白组给予常规饮食饲养,室温18~22℃,相对湿度50%~60%;其余各组小鼠饲养于室温6~8℃、相对湿度20%~30%环境中,8%低蛋白饮食,每日2次冰水灌胃,每次0.2 mL,每隔两日禁食1次,每次1 d,同时每日予常温水力竭游泳实验建立体虚外感肺系疾病模型。造模时间持续4周。造模结束后,分别对各组小鼠进行灌胃给药,柴桂沙麦汤高、中、低剂量组分别予柴桂沙麦汤10.8 g/kg、5.4 g/kg、2.7 g/kg,模型组及空白组予生理盐水0.1 mL/10 g,每日1次,连续30 d。观察小鼠一般症状表现,计算小鼠肺系数,流式细胞仪检测小鼠外周血CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)细胞比例并计算CD4^(+)/CD8^(+),酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血IL-4表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测肺组织HMGB1表达。结果:与空白组相比,模型组小鼠呼吸急促、明显消瘦、饮食减少、反应及行动迟缓、恶寒怕冷、拱背蜷缩、扎堆、皮毛失去光泽等,体虚及外感肺系疾病症状严重;肺系数升高(P<0.01),外周血CD3^(+)、CD8^(+)升高(P<0.05),CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)下降(P<0.05);IL-4表达升高(P<0.01);HMGB1蛋白表达升高(P<0.01)。与模型组相比,柴桂沙麦汤高、中、低剂量组小鼠呼吸转平稳,体质量及饮食增加,反应、行动自如,恶寒怕冷、拱背蜷缩、扎堆情况好转,皮毛相对光泽,体虚及外感肺系疾病症状减轻,肺系数降低(P<0.05,P<0.01),外周血CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)均升高(P<0.05),高、中剂量组CD8^(+)下降(P<0.05);IL-4表达均降低(P<0.01);HMGB1蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01)。结论:柴桂沙麦汤可提高体虚外感肺系疾病小鼠外周血CD3^(+)、CD4^(+)细胞比例,降低CD8^(+)细胞比例,稳定CD4^(+)/CD8^(+),下调IL-4与HMGB1的表达,进而减少炎症因子释放,减轻机体炎症反应,降低肺系数,提高机体免疫功能,发挥扶正祛邪的功效。