北柴胡及常见伪品藏柴胡、锥叶柴胡鉴别研究

目的建立北柴胡、藏柴胡、锥叶柴胡鉴别方法。方法采用外观性状鉴别、薄层色谱和HPLC指纹图谱系统建立北柴胡、藏柴胡、锥叶柴胡鉴别方法。结果锥叶柴胡横切面为菊花状,北柴胡横切面为年轮状并具有不定程度的裂纹,外部有较薄的黑色外环纹,藏柴胡横切面较平整,外部有较厚的黑色外环纹。薄层色谱显示藏柴胡的荧光斑点强度最强,北柴胡与藏柴胡相似,荧光强度较藏柴胡弱,锥叶柴胡在Rf值约为0.90处具有独特的绿色荧光斑点。HPLC指纹图谱显示,藏柴胡与北柴胡野生药材的相似度约在0.50~0.80,锥叶柴胡与北柴胡野生药材的相似度约在0.20~0.45,北柴胡与北柴胡野生药材的相似度在0.90以上,可以相似度数值范围区分北柴胡、藏柴胡与锥叶柴胡。结论3种鉴别方法均可用于对上述3种柴胡的鉴别,且各有利弊,因此内外在质控方法联用可更加有效地鉴别柴胡品种,保障临床用药质量。

柴胡类方治疗高血压研究进展

文章综述了柴胡类方剂治疗高血压的机理和疗效。小柴胡汤、大柴胡汤、柴胡加龙骨牡蛎汤、柴胡桂枝干姜汤等柴胡类方,在治疗高血压病中能够有效地降低血压水平,改善临床症状,缓解高血压并发症,并且还能降低使用降压药后产生的不良反应发生率。

基于《伤寒论》六经辨证理论运用柴胡类方治疗中风病

该文通过辨方证,使用小柴胡汤、大柴胡汤、柴胡加龙骨牡蛎汤为主方治疗辨证属少阳经本证、少阳阳明合证、少阳经邪气扰心证的中风病,取得满意的效果,发现大柴胡汤还可缩短中风病康复时间,减轻患者痛苦,提高临床疗效,证实经方在现代临床应用中的可操作性。

基于“通权达变”思想探究柴胡不同炮制方法

目的基于“通权达变”思想分析柴胡不同炮制品的古今用药经验及现代研究进展,为柴胡炮制机制及炮制工艺研究提供参考。方法从中华医典、读秀等数据库系统挖掘柴胡炮制方法的历史演变及柴胡饮片临床用药特色;通过查阅文献梳理柴胡不同炮制品的现代研究进展。结果历代医药典籍记载柴胡炮制品种丰富,不同炮制品功效上存在较明显差异:醋柴胡疏肝解郁之效增强,升散之性减弱;鳖血柴胡滋阴退热之效增强,浮阳之性减弱;酒柴胡舒筋通络、活血止痛之效增强。现代研究对柴胡不同炮制品的科学内涵进行了不同程度解读,但仍存在一些问题,如炮制工艺参差不齐、质量标准尚未统一等。结论柴胡药用历史悠久,临床应用广泛,炮制品种较多,亟需加强不同炮制品的药效物质基础及炮制机理的系统研究,加深对柴胡不同炮制品科学内涵认识,建议规范炮制工艺和制定更加科学合理的质量标准,为临床提供质量稳定可控、品种丰富的柴胡炮制品,发挥柴胡临床治疗的特色和优势。

电子束辐照对柴胡中21种禁用农药残留降解率及柴胡有效成分的影响

为探明电子束辐照对柴胡中21种禁用农药残留降解及柴胡有效成分的影响,采用4、6、8、10 kGy电子束处理含有21种禁用农药残留的柴胡样品,利用气相色谱-质谱联用(GC-MS/MS)技术分析不同辐照剂量处理后柴胡中21种禁用农药含量的变化,并利用高效液相色谱法(HPLC)测定柴胡有效成分含量的变化。结果表明,随辐照剂量的增加,柴胡中21种禁用农药的降解率升高,最高降解率在25.58%~56.61%。其中10 kGy辐照处理柴胡中甲基对硫磷、氟虫腈砜、氟虫腈、久效磷的降解率显著高于8 kGy辐照处理,而其他17种农药的降解率在8 kGy与10 kGy辐照处理间差异不显著。此外,不同剂量辐照处理后柴胡中柴胡皂苷a、d含量无明显变化。综合考虑成本因素认为,8 kGy电子束辐照能有效降解柴胡中21种禁用农药残留,对柴胡中有效成分含量无明显影响,可为辐照降解柴胡中的21种农药提供技术支持。

柴胡黄芩药对发酵前后含量变化与发酵产物的药效学研究

目的以柴胡-黄芩药对为原料,黑曲霉为菌种,利用现代微生物发酵技术对其发酵。方法采用HPLC测定柴胡-黄芩药对发酵前后的5种活性物质(黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、柴胡皂苷A、柴胡皂苷D)的含量变化。HPLC的色谱条件:色谱柱Eclipse XOB-C_(18)(250mm×4.6mm,5μm),进样量20μL,流动相(梯度洗脱)为甲醇-0.1%磷酸水溶液,柱温30℃,波长210nm。结果黑曲霉发酵柴胡-黄芩药对后,有效成分含量会随着发酵天数的变化而升高或降低,并具有良好的解热抗炎作用。结论高效液相色谱法简便准确,重复性好,可以作为柴胡-黄芩药对中5种成分含量的测定方法。适当的黑曲霉发酵,可以明显提高柴胡-黄芩药对活性成分含量,并提升中药药效。

柴胡类方的组方要义及应用体会

少阳主枢,不仅是表证传里之枢机,也是三阳证转入三阴证的枢机,故其临床证候复杂且多有兼证。张仲景立调和枢机之小柴胡汤、柴胡桂枝汤、柴胡桂枝干姜汤、柴胡加龙骨牡蛎汤、柴胡加芒硝汤,以上五方虽均能和解少阳,调畅枢机,也都有寒热并用,攻补兼施之特点,然各有侧重。小柴胡汤证病机为邪犯少阳,胆火内郁,枢机不利,功能为和解少阳,调达枢机,疏利三焦;柴胡桂枝汤证病机为邪犯少阳,太阳表证未解,功能为和解少阳,兼以解表,为解太阳、少阳两感之轻剂;柴胡桂枝干姜汤证病机为少阳枢机不利,水饮内结,功能为和解少阳,温化水饮;柴胡加龙骨牡蛎汤证病机为邪犯少阳,弥漫三焦,表里俱病,寒热虚实互见,功能为和解少阳,通阳和表,泻热清里,重镇安神;柴胡加芒硝汤证病机为邪犯少阳,兼阳明里实,燥热较甚,正气偏虚,功能为和解少阳,兼以泻热祛实,扶正祛邪。

柴胡提取物及其所含皂苷a和皂苷d对小鼠骨骼增长的作用比较

目的比较柴胡提取物及其所含皂苷a和皂苷d促进骨骼增长的作用及其机制研究。方法自2021年3月至2022年1月进行了高效液相色谱法测定柴胡提取物中柴胡皂苷a与d含量;然后将昆明种小鼠40只采用随机数字表法分为健康对照组、柴胡皂苷a组(简称皂苷a组)、柴胡皂苷d组(简称皂苷d组)、柴胡提取物组(简称提取物组)和阳性对照组,每组8只。健康对照组灌胃去离子水,皂苷a组灌胃柴胡皂苷a 1.15μg/g体质量,皂苷d组灌胃柴胡皂苷d 0.2μg/g体质量,柴胡提取物组按照0.94 mg/g体质量灌胃,阳性对照组灌胃酸枣仁皂苷a0.013 mg/g体质量灌胃。灌胃25 d后于末次给药30 min后取脑组织,蛋白质印迹法检测脑组织色氨酸羟化酶2(TPH2)含量,ELISA法检测脑组织5-羟色胺(5-HT)、生长激素(GH)含量的变化和5-HT与5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)结合活性,并测量各组药物对小鼠胫骨长度的影响。结果柴胡提取物中柴胡皂苷a含量为1.22 mg/g,柴胡皂苷d含量为0.22 mg/g;提取物组和皂苷a组的脑组织5-HT含量(60.93±11.09,59.51±11.02)μg/L、GH含量(68.91±9.10,68.42±9.03)μg/L、5-HT1AR与5-HT结合活性(39.90±8.36,37.27±6.59)及胫骨长度(10.56±0.53,10.55±0.54)cm均较健康对照组[(40.89±8.74)μg/L,(44.87±8.92)μg/L,27.34±3.45,(9.48±0.63)cm]明显增高(P<0.01),同时这两组TPH2含量较健康对照组升高(P<0.01),均差异有统计学意义。皂苷d组脑组织TPH2蛋白含量、5-HT含量(47.46±8.62)、GH含量(45.81±7.14)、5-HT1AR与5-HT结合活性(30.87±5.52)及胫骨长度(9.88±0.56)cm较健康对照组差异无统计学意义(P>0.05)。与皂苷a组比较,皂苷d组的脑组织TPH2蛋白含量、5-HT含量、5-HT1AR与5-HT结合活性及胫骨长度减少(P<0.05),GH含量明显减少(P<0.01),差异有统计学意义。与皂苷d组比较,提取物组GH含量、5-HT1AR与5-HT结合活性及胫骨长度增加明显增高(P<0.01),5-HT含量增高(P<0.05),差异有统计学意义。结论柴胡提取物延缓慢波睡眠时长的主要成分为柴胡皂苷a,其可能机制为柴胡皂苷a通过提高脑组织色氨酸羟化酶蛋白高表达,从而促进5-HT的分泌,增强5-HT1AR与5-HT结合活性,延缓慢波睡眠时长,提高生长激素的分泌,促进小鼠骨骼增长。

柴胡类经方在炎症性皮肤病中的应用

中医讲究整体观,“有诸内,必形诸外”,虽然皮肤病多以局部皮损不适为主,但必与其内在各脏腑器官、组织功能的失调有关。所以,在临床治疗中应从整体病机出发,与局部皮疹相结合,进行辨证论治,确定理法方药。柴胡类经方是和解少阳的经典方剂,通过简要论述柴胡类经方在炎症性皮肤病治疗中的运用,探寻中医治疗炎症性皮肤病的更多可能。

经典名方小柴胡汤抗抑郁研究进展

抑郁症属于中医“郁证”范畴,在新冠疫情背景下的抑郁症发病更是呈逐年上升趋势,中医药因其多途径、多层次、多靶点、多机制的作用方式在治疗抑郁症方面发挥着独特优势。小柴胡汤为治疗少阳证的经典名方,出自东汉张仲景的《伤寒杂病论》,其和解少阳且长于疏肝理气解郁,现代药理学研究也验证了其抗抑郁作用且临床应用广泛,但是关于小柴胡汤抗抑郁的机制还尚未有定论,因此作者基于临床应用、作用机制和化学成分对近十年来现有小柴胡汤抗抑郁的研究进行综述,探究小柴胡汤抗抑郁的机制,发现小柴胡汤抗抑郁的机制与单胺类神经递质及受体、HPA轴、脑源性神经营养因子(BDNF)及炎症反应等密切相关,且可能是协同作用的结果,为深入研究小柴胡汤治疗神经系统疾病及其机制提供理论依据。

柴胡化学成分及药理作用研究进展

柴胡是临床应用较为广泛的中药材,其药用部位为伞形科植物柴胡或狭叶柴胡的干燥根,具有较高的药用价值。现代药理研究表明,柴胡含有多种化学成分,在心血管系统、呼吸系统、消化系统、神经系统、内分泌系统等多种疾病具有良好的治疗作用。本文梳理近年来柴胡相关文献进行综述分析,阐述柴胡化学成分及药理作用研究进展。

柴胡皂苷A调节cAMP/PKA/CREB信号通路对失眠大鼠的改善作用及机制研究

目的基于cAMP/PKA/CREB通路探讨柴胡皂苷A对失眠大鼠的改善作用及机制。方法将75只SD大鼠随机分为空白组、模型组、柴胡皂苷A低剂量组(0.625 mg·kg^(-1))、柴胡皂苷A高剂量组(2.500 mg·kg^(-1))、艾司唑仑组(0.1 mg·kg^(-1)),每组15只。采用腹腔注射苯丙氨酸(PCPA,0.1 mg·kg^(-1))复制失眠大鼠模型。观察大鼠一般情况及昼夜节律;采用戊巴比妥钠翻正实验测定大鼠睡眠潜伏期及睡眠持续时间;观测大鼠睡眠时相,记录慢波睡眠第1期(SWS1)、慢波睡眠第2期(SWS2)、快速眼球运动睡眠期(REMS)时长以及总睡眠时长(TST);qRT-PCR法测定下丘脑节律基因Clock、Bmal1 mRNA及钟控基因Rev-erbα、RorαmRNA的表达水平;免疫荧光法测定海马组织NeuN表达水平;ELISA法测定脑组织中的cAMP水平;Western Blot法测定脑组织中Clock、Bmal1、Rev-erbα、Rorα及cAMP/PKA/CREB通路相关蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠昼伏夜出的节律紊乱,极度兴奋,易激惹,睡眠减少;睡眠潜伏期明显延长(P<0.05),睡眠持续时间及SWS1、SWS2、REMS、TST均明显缩短(P<0.05);神经元排列紊乱,NeuN阳性神经元IOD值明显降低(P<0.05);脑组织Clock、Bmal1、Rev-erbα、RorαmRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05);脑组织cAMP、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,给药组大鼠的攻击性明显减弱,昼伏夜出有节律性,活动减少,睡眠增多;睡眠潜伏期明显缩短(P<0.05),睡眠持续时间及SWS1、SWS2、REMS、TST均明显延长(P<0.05);神经元排列紊乱情况有所恢复,NeuN阳性神经元IOD值明显升高(P<0.05);脑组织Clock、Bmal1、Rev-erbα、RorαmRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05);脑组织cAMP、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论柴胡皂苷A可能通过激活cAMP/PKA/CREB通路改善失眠大鼠的昼夜节律。

柴胡皂苷A调控PI3K/Akt通路对2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗的影响

目的探究柴胡皂苷A对2型糖尿病(T2DM)小鼠胰岛素抵抗的作用及对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的调控机制。方法60只BALB/c小鼠分为对照组、模型组、阳性对照组(盐酸二甲双胍250 mg/kg)、柴胡皂苷A低(5 mg/kg)、中(10 mg/kg)、高(20 mg/kg)剂量组。对照组饲喂普通饲料,其余5组饲喂高脂饲料。第5周开始,除对照组外其余5组给予腹腔注射链脲佐菌素(STZ),连续注射3 d,诱导T2DM模型。实验结束后进行胰岛素耐量实验计算血糖-时间曲线下面积(AUC);麻醉小鼠取血,检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMAIR);处死小鼠分离肝组织,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理学变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)及游离脂肪酸(FFA)含量,Western印迹检测PI3K/Akt通路相关蛋白表达。结果与对照组比较,模型组肝组织结构异常,细胞排列紊乱,肝细胞出现空泡变性;AUC、FBG、FINS含量及HOMA-IR、肝组织中TG、TC、FFA含量明显升高(P<0.05);肝组织中PI3K表达和p-Akt/Akt显著降低(P<0.05)。与模型组比较,阳性对照组与柴胡皂苷A各剂量组肝组织病理损伤逐渐减轻,AUC、FBG、FINS含量及HOMA-IR、肝组织中TG、TC、FFA含量明显降低(P<0.05);肝组织中PI3K表达和p-Akt/Akt显著升高(P<0.05)。与阳性对照组比较,柴胡皂苷A高剂量组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论柴胡皂苷A可能通过激活PI3K/Akt信号通路,改善胰岛素抵抗,治疗T2DM。

柴胡解表退热功效相关生物活性指标与柴胡皂苷a、柴胡皂苷d含量相关性分析

目的:寻找与柴胡解表退热功效相关的生物活性指标,并探明此功效的生物活性量化值与柴胡皂苷a(SSa)和柴胡皂苷d (SSd)含量是否具有相关性。方法:采用临床煎药方式获得柴胡水煎液,并通过醇沉去除多糖和蛋白质等大分子物质,得到适宜体外实验的柴胡提取物。从抗炎、抗过敏、抗氧化应激及解热这4类与柴胡解表退热功效相关的体外模型中筛选量效关系明确的生物活性指标,并赋予各项指标不同的权重系数,对7个柴胡样品在各项指标上的作用强弱进行排序打分;分数与相应指标权重的积为该项得分;每项得分之和为该样品解表退热之生物活性量化值;采用CCK-8法检测细胞活力;Griss法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)水平;ELISA法测定细胞上清液中肿瘤坏死因子-α (TNF-α)及补体活化水平;铁离子还原能力法(FRAP)测定总抗氧化能力;高效液相色谱法测定柴胡中的SSa和SSd含量。结果:筛选得到4项关联柴胡解表退热功效的量效关系明确的生物活性指标,分别为脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞分泌NO、LPS诱导THP-1细胞分泌TNF-α、总抗氧化能力及酵母多糖介导的替代途径补体活化。相关性分析显示,7个样品的SSa和SSd总量与解表退热的生物活性量化值不相关。结论:柴胡解表退热可能与其抑制促炎因子(NO)生成、压制内生性致热原(TNF-α)生成、抗氧化及抗补体C5a活化有关,而《中华人民共和国药典》 2020年版柴胡指标性成分SSa和SSd可能并非柴胡该功效的物质基础。

柴胡皂苷D对高尿酸血症大鼠尿酸及相关酶活性的影响

目的:探讨柴胡皂苷D对高尿酸血症大鼠体内尿酸水平及相关酶活性的影响。方法:柴胡皂苷D用0.9%氯化钠溶液溶解,配制成5、10、20 mg/mL药液。将50只SD大鼠随机分为对照组、模型组及柴胡皂苷D大、中、小剂量组。除对照组外,其余大鼠每天上午灌胃腺嘌呤0.2 g/kg+乙胺丁醇0.25 g/kg,建立高尿酸血症模型。柴胡皂苷D各剂量组大鼠均以10 mL/kg的剂量灌胃给药,对照组大鼠与模型组大鼠灌胃同等剂量0.9%氯化钠溶液。检测给药前、给药后14、21、28 d大鼠血尿酸、尿尿酸以及黄嘌呤氧化酶(XOD)、腺苷脱氨酶(ADA)、肌酐和尿素氮的水平。结果:给药后21 d,与对照组比较,模型组大鼠血尿酸水平明显升高;与模型组相比,柴胡皂苷D中剂量组血尿酸水平显著下降,差异均具有统计学意义(P<0.05);给药后28 d,与模型组相比,柴胡皂苷D大剂量组、中剂量组血尿酸水平显著下降,中剂量组及小剂量组大鼠尿尿酸水平显著降低;柴胡皂苷D各剂量组大鼠的ADA、XOD、肌酐及尿素氮水平均显著下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:柴胡皂苷D可以通过降低ADA以及XOD水平,抑制尿酸生成,起到降尿酸的作用,具有显著的肾脏保护功能。

在快速康复外科管理模式下采用大柴胡汤加减治疗对胃肠手术后快速康复的影响

目的:观察在快速康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)管理模式下采用大柴胡汤加减治疗对胃肠手术后快速康复的影响。方法:将62例胃肠手术患者分为两组,每组31例。对照组给予ERAS管理模式围手术期干预。治疗组于术后12 h在对照组治疗基础上给予大柴胡汤加减(药物组成:生大黄、牡丹皮、炒枳实、厚朴、柴胡、半夏、木香、白豆蔻、炒莱菔子、白芍、延胡索、炙甘草)治疗,水煎,100 mL/次,2次/d,连服5~7 d。观察术后肠鸣音恢复时间、肛门排气时间、进食时间和住院时间,检测白细胞、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、降钙素原、胃动素(motilin,MTL)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal polypeptide,VIP)、生长抑素(somatostatin,SST)水平,观察术后胃肠道反应(恶心、呕吐、腹胀、腹痛)发生情况。结果:治疗组术后肠鸣音恢复时间、肛门排气时间、进食时间及住院时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);术后第3天、第5天白细胞、CRP、降钙素原水平均低于同期对照组(P<0.01);术后第7天MTL、SST水平高于对照组(P<0.01),VIP水平低于对照组(P<0.01);术后胃肠道反应发生率低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在ERAS管理模式下采用大柴胡汤加减治疗能够有效降低胃肠手术后炎症反应,调节胃肠激素水平,减轻术后胃肠道反应,促进胃肠道功能恢复,加速术后康复进程。

何晓晖教授应用柴胡的经验特色

柴胡是最古老而常用的中药之一[1],《中国药典(2020版)》规定柴胡来源为伞形科植物柴胡Bupleurum Chinense DC.或狭叶柴胡Bupleurum Scorzonerifolium Willd.的干燥根,分别习称为北柴胡和南柴胡。其味辛、苦,性微寒,归肝、胆、肺经,能疏散退热、疏肝解郁、升举阳气。何晓晖教授系第二届全国名中医,国内知名脾胃病专家。他善用衡法治疗脾胃病,柴胡和柴胡类方最为常用。

柴胡桂枝干姜汤加味联合化疗治疗胆热脾寒型晚期胰腺癌临床研究

目的观察柴胡桂枝干姜汤加味联合化疗治疗胆热脾寒型晚期胰腺癌的临床疗效。方法随机将34例胆热脾寒型晚期胰腺癌患者分组,化疗方案选择吉西他滨+替吉奥或替吉奥。对照组(17例)单纯化疗,治疗组(17例)同时配合柴胡桂枝干姜汤加味,两周期后评价疗效。观察患者近期疗效、中医临床证候积分、KPS评分、NCI-CTCAE V4.0。结果近期疗效、中医临床证候积分、KPS评分:两周期治疗后,治疗组效果优于对照组,两组间相比有显著差异(P<0.05);NCI-CTCAE V4.0:两周期治疗后,血液毒性、消化道反应、肝肾功能损伤的发生率,两组间相比均无明显差异(P>0.05)。结论柴胡桂枝干姜汤加味可增加胆热脾寒型晚期胰腺癌患者化疗疗效,改善中医临床症状,提高患者生活质量,且安全可靠。

饲料中添加柴胡及其提取物对锦鲤幼鱼生长、生理生化、肝脏抗氧化及抗菌能力的影响

试验旨在研究饲料中添加柴胡及其提取物对锦鲤幼鱼生长、生理生化、肝脏抗氧化及抗菌能力的影响。选取初始体重(21.0±0.5)g的锦鲤幼鱼360尾,随机分为3组,每组3个重复,每个重复40尾锦鲤幼鱼。K组、C组和T组锦鲤幼鱼分别饲喂基础饲料、基础饲料+5‰柴胡生粉和基础饲料+5‰柴胡提取物。试验期14 d。结果显示,锦鲤幼鱼血清中,14 d时,C组的溶菌酶(LZM)和C组、T组的碱性磷酸酶(AKP)活性显著高于0 d,并显著高于K组(P<0.05)。锦鲤幼鱼肝脏中,14 d时C组的LZM、酸性磷酸酶(ACP)和T组的AKP活性显著高于0 d(P<0.05)。14 d时,C组的超氧化物歧化酶(SOD)活性及总抗氧化能力(T-AOC)显著高于0 d(P<0.05),丙二醛(MDA)含量低于0、7 d。攻毒试验中,24 h内K组锦鲤幼鱼的死亡率为41.7%;C组死亡率为18.3%,保护率为56%;T组死亡率为21.7%,保护率为48%。C组锦鲤幼鱼血清中48 h的白细胞介素-13(IL-13)含量显著高于24、96 h(P<0.05);C组、T组48 h的免疫球蛋白M(IgM)含量显著高于24 h(P<0.05)。肝脏中,C组锦鲤幼鱼48 h的白细胞介素-4(IL-4)、IL-13和IgM含量显著高于24 h,IL-13含量显著高于K组(P<0.05)。研究表明,饲料中添加柴胡及其提取物投喂14 d可以有效提高锦鲤幼鱼的生理生化指标和抗维氏气单胞菌能力,但两者的作用时间和作用效果具有差异性,柴胡的作用效果更为突出。

维生素A修饰柴胡皂苷a/d脂质体的制备及体内外释药评价

目的制备维生素A(vitamin A,VA)修饰柴胡皂苷(saikosaponin,SS)a和SSd靶向脂质体并考察其体内外释药行为。方法以包封率为指标,在明确大豆磷脂CS-95、胆固醇琥珀酰单酯{4-[(3β)-Cholest-5-en-3-yloxy]-4-oxobutanoic acid,CHEM}及靶向配体二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇5000-维生素A(DSPE-PEG-VA)最佳比例的基础上,通过薄膜分散超声法包载SSa/SSd后,结合后插法将DSPE-PEG-VA搭载在脂质体上,构建VA修饰SSa/SSd脂质体递药体系(VA-SSa/SSd-Lips)。采用透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)、动态光散射法测定脂质体形态、粒径及电位;鱼精蛋白沉淀法考察脂质体包封率及载药量;2%兔红细胞混悬液考察VA-SSa/SSd-Lips溶血性;正常大鼠尾静脉注射(1 mg/kg)VA-SSa/SSd-Lips溶液、SSa/SSd-Lips溶液和SSa/SSd溶液后,在不同时间点眼眶取血,测定各时间点大鼠血浆中SSa和SSd的药物浓度,利用DAS 3.0软件计算药动学参数;小动物活体成像仪观测裸鼠尾静脉注射VA-DiR-Lips后体内荧光分布。结果VA-SSa/SSd-Lips平均粒径为(142.43±0.60)nm,聚合物分散性指数(polymer dispersity index,PDI)为(0.31±0.052),Zeta电位为(-14.15±0.74)mV,SSa和SSd的包封率均达90%以上;体外释放行为表明VA-SSa/SSd-Lips具有一定的缓释效果;体外溶血性评价表明,SSa和SSd由脂质体包载后溶血毒性显著降低;VA-SSa/SSd-Lips的SSa和SSd药时曲线下面积(area under the curve,AUC)分别是SSa/SSd溶液的1.53(SSa)倍和1.99(SSd)倍,生物利用度显著提高;VA-SSa/SSd-Lips的t 1/2分别是SSa/SSd溶液的2.46(SSa)倍和3.19(SSd)倍,SSa/SSd-Lips的t 1/2分别是柴胡皂苷a和柴胡皂苷d混合溶液(SSa/SSd-Sol)组的0.89(SSa)倍和1.25(SSd)倍。VA-DiR-Lips在活体成像中具有良好的肝脏靶向性能。结论本研究设计并构建的VA修饰脂质体VA-SSa/SSd-Lips的粒径、包封率、载药量及体内外释药行为均达到了本文的设计目的。