柴胡皂苷提取物灌胃给予大鼠后肺组织中移形成分的LC-MS分析

目的初步探讨柴胡皂苷类成分在大鼠肺组织的代谢,为更好地揭示柴胡皂苷类成分在体内过程提供依据。方法采用液相质谱联用仪分析柴胡皂苷提取物灌胃给药后大鼠肺组织中的成分,得到各成分的总离子流图和二级质谱图,结合文献与对照品对照对各色谱峰进行鉴定。色谱条件:采用BEH-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱(0-4 min,25%A→37%A;4-10 min,37%A;10-18 min,37%A→50%A;18-22 min,50%A→90%A;22-25 min,90%A→90%A;25-26 min,90%A→25%A),流速0.4 ml/min。质谱条件:电喷雾电离离子源;正负离子扫描模式;温度450℃,质量扫描范围:m/z 150-1 500。结果以柴胡皂苷类化合物的质谱裂解规律为指导,共鉴定出15种化合物。其中10种药材原型成分,分别为柴胡皂苷(SS)a,SSc,SSf,SSd,SSb2,SSe,3″-O-乙酰化柴胡皂苷a,6″-O-乙酰化柴胡皂苷a,3″-O-乙酰化柴胡皂苷d,6″-O-乙酰化柴胡皂苷d;5种代谢物分别为柴胡次皂苷F,柴胡次皂苷D,柴胡次皂苷G,去糖氧化柴胡皂苷a,去糖氧化柴胡皂苷d。结论通过柴胡皂苷提取物肺中成分分析,初步确认了柴胡皂苷提取物在肺中的柴胡皂苷类成分以及代谢产物,为柴胡发挥解热镇痛作用的物质基础提供依据。

柴胡总皂苷的大鼠体内代谢特征谱研究

目的研究柴胡总皂苷在大鼠体内的代谢情况,分析其发挥药效的关键成分。方法首先基于UPLC-MS/MS技术,建立柴胡总皂苷提取物化学成分特征谱,对其总体皂苷类成分进行鉴定分析;进一步采用离体外翻肠囊、肝门静脉取血和腹主动脉取血的方法,比较大鼠肠吸收成分、肠代谢的入血成分和肝代谢的血中成分的化学成分特征谱,筛选柴胡皂苷类成分体内发挥药效的关键成分。结果本研究共鉴定出柴胡总皂苷提取物中52种柴胡皂苷类成分,其中只能通过肠道直接吸收入血的成分有16种,只能通过肠道菌群和肝脏代谢的成分有3种,既能直接通过肠道吸收入血又能通过肠道菌群代谢和肝代谢而吸收的成分有3种;通过比较3个代谢特征谱发现,乙酰柴胡皂苷E、柴胡皂苷元A、柴胡皂苷元G、柴胡皂苷A、柴胡皂苷B_(2)、柴胡皂苷元C可能是柴胡皂苷类成分体内发挥药效的关键成分。结论通过柴胡总皂苷提取物在离体外翻肠囊法、肝门静脉取血和腹主动脉取血的化学成分特征谱分析,初步探讨了柴胡皂苷发挥药效的关键成分,为深入研究柴胡皂苷类成分药效物质提供新的依据。

柴胡药材中的矿质元素与有效成分的相关性分析

目的:通过分析柴胡药材中的矿质元素与有效成分之间的关系,探究其对柴胡药材质量的影响,为提高栽培种柴胡的药材质量提供参考。方法:采用微波消解法消解,采用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)测定24批样品中Fe,Mg等16种矿质元素的含量,根据《中国药典》2015年版标准,利用HPLC测定指标成分柴胡皂苷a,d的含量,流动相为水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~5 min,35%~40%B;5~15 min,40%~45%B;15~25 min,45%~55%B;25~30 min,55%~90%B;30~45 min,90%~35%B),流速1.0 mL·min^(-1),进样量20μL,柱温25℃,检测波长210 nm。利用SPSS 17.0软件进行双变量相关方法分析24批样品中矿质元素与有效成分之间的相互关系。结果:不同柴胡样品中矿质元素和有效成分含量都有较大差异,有效成分柴胡皂苷a,d的含量与Cu元素相关系数分别为0.349和0.425,呈显著正相关,与Na元素的相关系数分别为-0.517和-0.420,呈显著负相关。结论:柴胡药材中有效成分柴胡皂苷a,d含量与Cu和Na等矿质元素之间的存在一定关系,建议通过外源施入矿质元素的栽培措施来调控柴胡皂苷a,d在柴胡根中合成,为栽培种柴胡质量的提高提供实验依据。

正交试验法优选柴胡消瘿颗粒的乙醇提取工艺

目的：优选柴胡消瘿颗粒的醇提工艺,为该制剂的临床用药提供参考.方法：以干膏率和芍药苷、橙皮苷、柴胡皂苷a及柴胡皂苷d含量的综合评分为指标,通过正交试验考察乙醇体积分数、乙醇用量、提取时间及提取次数对醇提工艺的影响.采用HPLC测定指标成分含量,柴胡皂苷类成分的流动相乙腈（A）-0.1％磷酸水（B）梯度洗脱（0 ～ 10 min,10％ ～ 25％A;10 ～ 25 min,25％ ～ 35％ A;25 ～ 33 min,35％～ 45％A;33～ 50 min,45％A;50～ 55 min,45％ ～ 10％ A）,检测波长210 nm;芍药苷与橙皮苷的流动相乙腈-0.2％乙酸（15∶85）,检测波长分别为230,283 nm.结果：最佳提取工艺为加6倍量60％乙醇回流提取2次,每次1.5h.干膏率35.98％,干膏中芍药苷、橙皮苷、柴胡皂苷a＋d的质量分数分别为0.944％,1.543％,0.089％.结论：优选的提取工艺科学合理、稳定可行,为柴胡消瘿颗粒的工业化生产提供参考.

Simultaneous determination of Saikosaponin a, c and d in different parts of wild bupleurum from Shanxi Province

As a traditional Chinese herbal medicine exhibiting analgesic,fever-reducing and anti-inflammatory effects,Radix Bupleuri（Chai-Hu） is commonly used for the treatment of influenza,which is derived from the dried roots of Bupleurum chinense DC.and Bupleurum scorzonerifolium Willd.Among of diverse chemical components,saikosaponins are the key active components of the herb medicine.In the present study,we established a method of high performance liquid chromatography（HPLC） coupled with evaporative light scattering detection（ELSD） for simultaneous determination of saikosaponin a,c and d in root,stem,leaf and flower of Bupleurum chinense（B chinense） collected from different areas of Shanxi Province,China.The results from 16 samples of root,stem,leaf and flower of B chinense demonstrated that the total contents of the three saikosaponins in the root of B chinense collected from Dongshan Taiyuan,Xishan,Tianlongshan and Pangquangou were 4.26 mg/g,3.22 mg/g,4.23 mg/g and 3.05 mg/g,respectively.However,there was scarcely any saikosaponins in the stem,leaf and flower of B chinense collected from above-mentioned areas.The method of HPLC coupled with ELSD was suitable for quality control of Radix Bupleuri.The result also confirmed that the root of B chinense was the best medicinal part.