四逆散冻干粉中的柴胡皂苷C对小鼠睡眠影响的实验研究

目的研究四逆散冻干粉中主要成分柴胡皂苷C对小鼠睡眠的影响。方法将小鼠随机分成3组:空白对照组、模型组和给药组,四逆散冻干粉中有效成分柴胡皂苷C 12 g.kg-1经灌胃给予给药组;空白对照组、模型组均给予同体积的蒸馏水。于末次给药前8 h禁食,给药60 min后,腹腔注射50 mg.kg-1戊巴比妥钠,观察并记录翻正反射消失至恢复时间,即睡眠时间。结果柴胡皂苷C可明显延长戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间,与空白组比较具有极显著性差异(P<0.01)。结论四逆散冻干粉中有效成分柴胡皂苷C可延长阈剂量戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间,效果明显。

HPLC法测定华海乙肝泡腾颗粒剂中柴胡皂苷C的含量

目的：为控制华海乙肝泡腾颗粒剂的质量建立测定柴胡皂苷Ｃ的方法。方法：采用高效液相色谱法，色谱条件为：ＯＤＳ柱，以甲醇－水（６１：３９）为流动相，流这 １．０ｍｌ／ｍｉｎ，检测波长２０３ｎｍ。结果：平均回收率９９．３％，ＲＳＤ＝１．３４％。结论：此法可作为控制华海乙肝泡腾颗粒剂质量的方法之一。

HPLC-UV法测定大鼠血清中柴胡皂苷C浓度

目的：建立大鼠血清中柴胡皂苷C的HPLC血药浓度测定方法,并用于柴胡皂苷C在大鼠体内药代动力学的研究。方法：大鼠血清样品采用甲醇沉淀蛋白,HPLC法测定血药浓度。色谱柱为Waters C18柱（4.6mm×250mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脱,流速为1.0ml/min,检测波长为210nm。测定大鼠单次腹腔注射528mg/kg后血药浓度,采用DAS2.0药动学分析软件拟合主要药动学参数。结果：大鼠血清中柴胡皂苷C在58.4~7300mg/L浓度范围内线性关系良好,该成分的最低检测浓度（S/N=3）为14.6mg/L,平均回收率在85%以上,日内、日间精密度及稳定性的RSD〈8%。大鼠单次腹腔注射528mg/kg后,主要药动学参数t1/2z、AUC0-t、MRT0-t分别为（1.25±0.84）h、（943.79±39.16）h/（mg·L）、（0.91±0.05）h。结论：该方法简便、准确,可作为柴胡皂苷C血药浓度定量分析方法,并能满足其在大鼠体内的药代动力学研究。

柴胡皂苷C对CCI_(4)诱导的急性肝损伤小鼠保护作用与机制研究

为研究柴胡皂甙C对四氯化碳(CCI_(4))致大鼠急性肝损害的影响,并阐明其机理,将50只昆明小鼠随机分成5组,分别是空白对照组、模型组、低剂量柴胡皂苷C治疗组、中剂量柴胡皂苷C治疗组、高剂量柴胡皂苷C治疗组。对每组小鼠灌胃给子适当浓度的治疗药物,对于空白组给与生理盐水灌胃处理,对除空白组以外的小鼠给子腹腔注射CCI_(4)橄榄油稀释溶液处理,制备小鼠急性肝损伤模型。研究结束后取小鼠肝组织进行生化指标,肝脏系数以及病理学指标的检测。结果表明,柴胡皂苷C对小鼠血清肝损伤标志物ALT,AST水平显著下调,减轻肝脏病理组织病变,减少肝细胞凋亡数目;可以上调SOD,GSH等抗氧化酶水平,下调MDA含量。由此得出,柴胡皂甙C能有效地预防CCI_(4)所致的肝脏损伤。

基于高效液相色谱-高分辨质谱技术的柴胡皂苷c化学转化产物结构与途径分析

利用高效液相色谱|(HPLC)-Q Exactive-Orbitrap高分辨质谱(HRMS)技术分析12-磷钨酸化学转化柴胡皂苷c(SSc)的产物结构和转化途径。HPLC可以快速分离结构相近的转化产物。利用HRMS获得产物分子及其碎片离子的精确质量数,鉴定产物结构并分析转化途径。结果表明,在12-磷钨酸产生的酸性环境中,SSc主要通过C_(18)位的环醚开环和羟基消除反应生成具有异环双烯结构的柴胡皂苷h(SSh),并伴随着C_(3)位的去糖基化反应生成去鼠李糖-SSc和去鼠李糖-SSh。转化反应6 h后趋于稳定。HPLC-Q Exactive-Orbitrap技术能够快速准确地分析柴胡皂苷及其转化产物结构,并可以区分转化得到的异环双烯和同环双烯柴胡皂苷同分异构体。

柴胡醋制前后柴胡皂苷a、b_2、c、d的LC-MS/MS法测定及比较

采用LC-MS/MS法对醋制前后柴胡中的Ⅰ型柴胡皂苷a、c、d与Ⅱ型柴胡皂苷b2进行含量测定,色谱柱为KinetexTMC18(50 mm×4.6 mm,2.6μm),流动相为水-乙腈-甲醇三元梯度洗脱;检测系统为电喷雾离子源(ESI)-三重四级杆质谱仪,ESI负离子模式检测,待测成分与内标均采用负离子加合物作为选择性反应监测(SRM)的前体离子,以[M+HCOO]-/[M-H]-作为SRM检测离子对。方法学验证结果显示,所建立的方法灵敏度高、专属性好,可作为柴胡生品及醋炙品的质量控制方法。含量测定结果表明,醋制过程引发了由Ⅰ型柴胡皂苷向Ⅱ型的转化,醋制后柴胡皂苷b2的含量明显增加,对柴胡醋炙品的质量控制应同时考虑对Ⅰ、Ⅱ型柴胡皂苷柴胡皂苷进行测定。

HPLC-ELSD法同时测定四逆散不同配伍中柴胡皂苷a、b_2、c的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法同时测定四逆散不同配伍中柴胡皂苷a,b_2,c的含量。方法:采用Hypersil BDS C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱;流速:1.0 ml·min^(-1),ELSD检测器,漂移管温度:100℃,气体:空气,气体流速:2.0 L·min^(-1),柱温:室温。结果:柴胡皂苷a,b_2,c分别在7.74~129.00,7.86~131.00,5.12~85.30μg的范围内线性关系良好(r分别为0.999 2,0.999 2,0.999 3);平均回收率分别为98.6%,99.3%,100.7%,RSD分别为2.5%,1.8%,2.7%(n=6)。结论:白芍中的成分可降低柴胡皂苷a、c的煎出量;枳实中的成分可提高柴胡皂苷a、b_2、c的煎出量;与单味柴胡药材相比,配伍组合中柴胡皂苷b_2的含量均显著增加。

不同产地柴胡中柴胡皂苷a、c、d及柴胡总皂苷含量分析与比较

目的:建立UPLC法测定柴胡中柴胡皂苷a、c、d及紫外分光光度计法测定总皂苷含量的方法,并对不同产地柴胡进行柴胡皂苷成分比较与聚类分析,为柴胡国内外使用及质量评价提供科学依据。方法:采用超高效液相色谱法检测柴胡中柴胡皂苷a、c、d含量;采用紫外可见分光光度法测定柴胡总皂苷的含量;以柴胡皂苷a、c、d及柴胡总皂苷相对含量为特征变量,采用Matlab 13.0软件进行聚类分析。结果:南柴胡各皂苷平均水平均低于北柴胡;甘肃、内蒙北柴胡整体质量水平较为均匀一致,且皂苷含量较高,质量较好;聚类分析结果显示,南、北柴胡在皂苷成分上无显著性差异。在北柴胡的聚类中,东北柴胡分散性较大,组间差异明显;山西、甘肃产地有交叉聚类现象,成分含量在一定程度上有相似性;内蒙柴胡自己分为一类,与其他产地柴胡皂苷含量差异性明显。结论:所建立的超高效液相色谱法及紫外吸收测定法方法准确、简便、快速,重现性好,结合聚类分析,为柴胡的国内外资源利用和质量评价提供依据。

UPLC-PDA法同时测定柴胡中3种皂苷的含量

目的建立同时测定柴胡中柴胡皂苷a、柴胡皂苷c、柴胡皂苷d的UPLC方法。方法采用ACQUITY UPLC BEH-C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱;以乙腈为流动相A,水为流动相B,梯度洗脱(0~18 min,25%~90%A;18~20 min,90%~90%A);柱温:30℃;流速:0.3 ml/min;检测波长:200 nm;进样量:5μl。结果柴胡中3种成分20 min内实现分离,柴胡皂苷a、柴胡皂苷c和柴胡皂苷d分别在0.65~8.45μg(r=0.9991),0.65~8.45μg(r=0.9995),0.73~9.49μg(r=0.9990)范围内与色谱峰峰面积线性关系良好,加样回收率的分别为99.41%(RSD=0.65%),97.59%(RSD=4.68%),95.55%(RSD=3.28%)。结论此法操作简单,结果准确,重复性好,可用于中药柴胡中3种皂苷类成分的含量测定。

HPLC-ELSD同时测定北柴胡中柴胡皂苷A、C、D、B1、B2及山奈苷含量

目的用HPLC-ELSD同时测定北柴胡中柴胡皂苷A、C、D、B1、B2及山奈苷6种苷类成分的含量。方法 Phenomenex C18(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,流动相:乙腈(A)-0.2%醋酸溶液(B),梯度洗脱(0~8 min, 8%A;8~15 min, 8%~20%A;15~30 min, 20%~35%A;30~40 min, 35%~45%A;40~60 min, 45%~75%A),柱温30℃,流速1.0 mL·min^(-1),载气为氮气,体积流量2.3 L·min^(-1),漂移管温度70℃,增益2。结果柴胡皂苷C、柴胡皂苷A、柴胡皂苷D、柴胡皂苷B2、柴胡皂苷B1、山奈苷在5.48~109.6 mg·L^(-1)(r=0.999 4)、9.76~195.2 mg·L^(-1)(r=0.999 6)、11.98~239.6 mg·L^(-1)(r=0.999 9)、0.532~10.64 mg·L^(-1)(r=0.999 7)、0.35~7.0μg·mL^(-1)(r=0.999 5)、0.254~5.08μg·mL^(-1)(r=0.999 6)范围内的线性关系良好。平均回收率分别为99.1%、99.4%、97.2%、100.4%、100.7%、98.6%。21批北柴胡样品含量范围:柴胡皂苷C 0.093 2%~0.243%、柴胡皂苷A 0.103 8%~0.889 6%、柴胡皂苷D 0.288%~1.084 3%、柴胡皂苷B2 0~0.032 6%、柴胡皂苷B1 0~0.031 26%、山奈苷0~0.010 33%。结论该方法测定北柴胡中柴胡皂苷A、C、D、B1、B2及山奈苷6种苷类成分含量灵敏、准确,分离效果较好,无干扰,可作为完善北柴胡中苷类成分的质量标准评价提供依据。

HPLC法测定不同产地柴胡中柴胡皂苷a、c、d的含量

目的:用高效液相色谱法测定9个不同产地柴胡中柴胡皂苷a、c、d的含量测定方法。方法:以ODS2色谱柱、乙腈-0.12%磷酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为1ml/min。检测波长为210nm。结果:柴胡皂苷a、c、d的线性回归方程分别为Yssa=0.0036X+0.0836(r=0.9999),Yssc=0.0042S+0.3357(r=0.9988),Yssc=0.0037X-0.2493(r=1.0000);精密度RSD为0.99%～1.37%;所有柴胡中柴胡皂苷a和d的总含量均高于0.3%。结论:9个不同产地的柴胡中柴胡皂苷的含量均达到了药典(2015年版)0.3%的要求,但不同产地的柴胡中柴胡皂苷的含量有明显差异。

HPLC法测定银州柴胡中五种皂苷的含量

首次建立HPLC法同时测定银州柴胡中柴胡皂苷a、c、d、e和f五种皂苷含量的方法。流动相为乙腈-水梯度洗脱,柱子为HibarRT RP-18(4.6 mm×250 mm,5μm),流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长210 nm。柴胡皂苷a、c、d、e和f的线性范围及相关系数分别为:21.78～43.56μg(r=0.9993),3.94～9.85μg(r=0.9994),20.68～51.70μg(r=0.9998),1.67～5.57μg(r=0.9997),1.91～6.70μg(r=0.9992);柴胡皂苷a、d的加样回收率分别为101.5%和98.5%。该方法操作简便,结果准确,重现性好,为柴胡药材多指标质量分析方法的建立和银州柴胡药用提供了参考依据。

不同产地南北柴胡中柴胡皂苷的含量测定

[目的]对不同产地的北柴胡和南柴胡的总皂苷及4种单体成分(柴胡皂苷a、d、c、f)进行含量测定。[方法]使用柴胡皂苷d作为对照品,采用紫外可见分光光度法,在536 nm处测定24批北柴胡和5批南柴胡样品中的总皂苷的含量。使用HPLC-ELSD方法对柴胡样品中的柴胡皂苷a、d、c、f进行含量测定。[结果]分析得出,同一样品中柴胡皂苷d的含量要普遍高于柴胡皂苷a的含量,不同产地的柴胡中柴胡皂苷a、d、c、f的含量之间具有显著性差异。柴胡总皂苷在0.08~0.40 mg之间具有良好的线性关系(r=0.999)。加样回收率在99.2%~103%之间,RSD=1.42%。不同产地的南北柴胡总皂苷含量在5.32%~13.9%之间,其中南柴胡的总皂苷含量要高于北柴胡的含量,其中产自山东临沂的南柴胡含量最高,达到了13.9%。[结论]柴胡的质量评价不能只测定其中柴胡皂苷a的含量,应该以总皂苷为主,同时对4种柴胡皂苷的含量进行测定才更为准确。

柴胡配方颗粒的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱研究

目的采用高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光检测器(HPLC-DAD-ELSD)联用技术,建立柴胡配方颗粒的指纹图谱。方法使用Venusil XBP-C18(L)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,进样量20μL,DAD检测器采集波长为210 nm和254 nm;ELSD检测器漂移管温度105℃,载气流量2.5 L·min^-1。结果通过19批柴胡配方颗粒样品建立了指纹图谱的共有模式,其中HPLC-DAD(210 nm)指纹图谱共有峰14个,HPLCDAD(254 nm)指纹图谱共有峰9个;HPLC-ELSD指纹图谱共有峰10个。确认了柴胡皂苷a、柴胡皂苷b1、柴胡皂苷b2及柴胡皂苷c。结论本研究所建立的方法简便准确,为该品种的质量评价与控制提供了有力的技术支持,同时对其他配方颗粒质量标准研究也具有一定的参考意义。

柴胡皂苷类化合物的药理作用研究进展

柴胡皂苷是一类五环三萜类化合物,是传统中药柴胡的主要活性成分。目前已从柴胡中分离出多种皂苷类成分,其中对柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2、柴胡皂苷c、柴胡皂苷d的研究较为深入。笔者等阐述柴胡皂苷类化合物抗病毒、抗炎、抗肿瘤、抗纤维化等方面的药理作用,为柴胡皂苷的进一步研究提供参考。

一测多评法同时测定消癥微丸中4种柴胡皂苷

目的建立一测多评法同时测定消癥微丸(柴胡、香附、大黄等)中4种柴胡皂苷的含有量。方法该药物5%氨水-甲醇提取液的分析采用Waters Xbridge C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-水为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长210、254 nm。以柴胡皂苷a为内标,计算柴胡皂苷b1、b2、c的相对校正因子,再测定其含有量。结果 4种柴胡皂苷在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 5),平均加样回收率98.08%~102.94%,RSD 0.85%~1.82%,一测多评法所得结果与外标法接近。结论该方法简单、精确、可行,可用于消癥微丸的质量控制。

基于药物体系质量评价模式的柴胡质量表征关联分析研究

目的:运用药物体系质量评价模式对柴胡饮片进行质量表征及关联分析,以有效地评价柴胡饮片的质量。方法:采用HPLC法同时测定柴胡饮片中药物体系关联成分芦丁、柴胡皂苷c、柴胡皂苷a、柴胡皂苷d的含量,同时表征主要黄酮类成分含量和及主要皂苷类成分含量和,并采用可见分光光度法测定柴胡饮片中总酚类成分含量。结果:基于药物体系质量评价模式,对柴胡饮片中有效指标性成分含量及其相对比值进行质量表征,同时将不同批次的饮片与经过药效验证的基准饮片进行关联度分析。结果表明,样品7、8、14中有效指标性成分含量总体高于基准批号5,批号6中有效指标性成分含量与基准批次饮片5相近,样品7、8、13、14与基准批次饮片5关联度较高。综合质量表征及关联分析结果,样品7、8、14、5、13的品质居优。结论:基于药物体系质量评价模式对柴胡饮片的质量进行评价,通过有效指标性成分含量及其相对比值的质量表征,以经过药效验证的饮片为基准,结合关联度分析,可综合全面地评价柴胡饮片的质量,为柴胡饮片的资源筛选、药物原料的质量控制和应用提供依据,同时为中药质量评价提供了方法学及其应用借鉴。

两种质量浓度磷肥胁迫后柴胡各部位含皂苷量变化

研究分别在高/低两种磷肥质量浓度胁迫后,柴胡植株各部位中含柴胡皂苷a、c、d量的变化规律.建立高效液相色谱法同时测定柴胡皂苷a、c、d的方法,并测定高/低两种质量浓度磷肥胁迫后,柴胡植株各部位中含三种皂苷成分的量.建立的同时测定含三种皂苷量的方法符合方法学要求.相比于对照组,低质量浓度磷肥胁迫后,柴胡植株各部位中含柴胡皂苷a的量会增加;高质量浓度磷肥胁迫后,主茎中含三种柴胡皂苷量均增加.高/低质量浓度磷肥分别胁迫后,会对柴胡各部位中含柴胡皂苷的量产生影响.

HPLC法测定三岛柴胡不同部位柴胡皂苷a、c、d的含量

目的:建立HPLC法测定三岛柴胡各部位的柴胡皂苷a、c、d的含量。方法:采用Symmetry C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长200 nm,柱温25℃。结果:1年生三岛柴胡中各部位柴胡皂苷a、c、d的含量均比2年生三岛柴胡的含量高。在1年生样品中种子含有的有效成分最多,根次之,茎最少;2年生样品中根含有的有效成分最多,种子次之,茎最少。结论:该方法为三岛柴胡不同药用部位的质量控制提供实验依据,该方法具有简便、快速、准确、重复性较好的特点。