栀子柏皮汤对小分子靶向药相关性皮疹疗效的影响及安全性评价

目的探讨栀子柏皮汤对小分子靶向药相关性皮疹疗效的影响及安全性。方法选择2018年4月—2021年5月本院收治的80例小分子靶向药相关性皮疹患者作为研究对象,以数字奇偶法将其分为观察组与对照组各40例。对照组给予氢化可的松软膏治疗,研究组在对照组的基础上给予栀子柏皮汤治疗,治疗时间为4周。比较2组治疗前后临床症状评分、皮疹严重程度分级、血清白细胞介素-17(IL-17)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的差异,并观察2组治疗4周后临床疗效和治疗4周内药物不良反应发生情况。结果治疗前2组临床症状总评分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗4周后,2组临床症状总评分均降低(均P<0.05),且观察组更低(分:2.99±0.41比4.13±0.59,P<0.05);治疗前2组皮疹严重程度分级比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗4周后,2组皮疹严重程度分级差异有统计学意义(P<0.05),治疗前后对照组皮疹严重程度分级差异无统计学意义(P>0.05),治疗前后观察组皮疹严重程度分级差异有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组总有效率高于对照组(90.00%比70.00%,P<0.05);治疗前,2组的血清IL-17和TNF-α水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗4周后,2组的血清IL-17和TNF-α水平均降低(均P<0.05),且观察组更低(IL-17:55.41±8.25比76.32±10.69,TNF-α:21.48±4.62比28.73±6.51,P<0.05);治疗4周内2组药物相关总不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论栀子柏皮汤联合氢化可的松软膏治疗小分子靶向药相关性皮疹疗效显著,可改善患者的临床症状,促进皮损恢复,减轻炎性反应,且安全性良好。

HPLC波长切换法同时测定栀子柏皮汤中8种成分的含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)波长切换法同时测定栀子柏皮汤中8种成分京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、4-O-阿魏酰奎尼酸、5-O-阿魏酰奎尼酸、甘草苷、盐酸小檗碱和甘草酸的含量。方法色谱柱采用Phenomenex Kinetex C18柱(150 mm×4.6 mm,2.6μm);流动相为乙腈-0.05 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(磷酸调pH至3.0)进行梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^(-1);柱温40℃;检测波长为240 nm(检测京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱)、280 nm(检测4-O-阿魏酰奎尼酸、5-O-阿魏酰奎尼酸、甘草苷、盐酸小檗碱)和250 nm(检测甘草酸)。结果京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、4-O-阿魏酰奎尼酸、5-O-阿魏酰奎尼酸、甘草苷、盐酸小檗碱和甘草酸分别在质量浓度15.57~185.9、59.18~706.6、5.316~63.48、14.10~168.3、11.92~142.4、3.078~36.76、20.57~245.6、6.150~73.43 mg·L^(-1)内与峰面积呈良好的线性关系(r>0.999),平均加样回收率分别为102.1%、99.7%、98.3%、94.8%、99.5%、99.6%、98.2%和103.5%,RSD均小于2%(n=6)。结论本研究建立的HPLC波长切换法简便可行,可用于栀子柏皮汤中上述8种成分含量的同时测定。

多指标综合评分法优化栀子柏皮汤的提取工艺

目的优化复方栀子柏皮汤(栀子、黄柏和甘草)的提取工艺。方法采用正交试验,以栀子苷、甘草苷、西红花苷-Ⅰ、盐酸小檗碱的量和浸膏得率为指标,考察浸泡时间、溶媒用量、提取次数和提取时间等4个因素对提取效果的影响。应用层次分析法结合CRITIC法确定综合权重,对实验结果进行综合评价。结果栀子柏皮汤的最佳提取工艺为加入12倍量70%乙醇浸泡1 h,提取3次,每次1.5 h。结论本实验使栀子柏皮汤试验次数减少、数据点均匀分散,可保证实验结论的稳定性与可靠性。

栀子柏皮汤及其拆方保肝利胆作用实验研究

目的:研究栀子柏皮汤及其拆方的保肝利胆作用,为探讨栀子柏皮汤的组方原理提供实验依据。方法:采用四氯化碳(CCl4)引起的急性肝损伤小鼠模型观察栀子柏皮汤及其拆方的保肝作用;采用正常大鼠胆总管引流的方法,观察药物的利胆作用。结果:栀子柏皮汤及各含栀子配伍药对均可降低CCl4所致肝损伤小鼠血清ALT、AST及肝组织中MDA水平,并显著提高正常大鼠胆汁流量及胆汁内胆红素含量,其中栀子黄柏配伍保肝利胆作用效果最佳。结论:栀子柏皮汤具有保肝利胆作用,其君药栀子在方中发挥重要作用,栀子和黄柏交互协同,发挥清热利湿作用。

栀子柏皮汤及含栀子配伍组对免疫性肝损伤小鼠的保护作用

目的探讨栀子柏皮汤各及含栀子配伍组对刀豆蛋白(ConA)诱导免疫性损伤小鼠的保护作用及可能作用机制。方法观察栀子柏皮汤及各含栀子配伍组对尾静脉注射刀豆蛋白(ConA,20 mg·kg^(-1))诱发的免疫性肝损伤小鼠肝脏病理变化及血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性、肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响。酶联免疫吸附实验(ELISA)测定血清中干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-6(IL-6)的水平。Western blot法检测与免疫炎症相关的NF-κB-p65的蛋白表达情况。结果栀子柏皮汤及各含栀子配伍组均能够降低血清ALT、AST及肝组织中MDA的含量;提高肝组织中SOD活性;降低NF-κB-p65及NF-κB-p-p65的表达,其中栀子柏皮汤全方组对免疫性肝损伤小鼠保护作用最佳。结论栀子柏皮汤对ConA诱导的免疫性肝损伤小鼠具有保护作用,其作用机制可能与调控免疫反应的NF-κB通路有关。

栀子柏皮汤对小鼠急性肝损伤的保护作用及对大鼠的利胆作用研究

目的研究栀子柏皮汤对小鼠急性肝损伤的保护作用及对大鼠的利胆作用。方法采用四氯化碳(CCl4)引起的急性肝损伤小鼠模型观察药物的保肝作用;采用正常大鼠胆总管引流的方法,观察该药的利胆作用。结果栀子柏皮汤低、中、高剂量组可显著降低CCl4致急性肝损伤小鼠血清ALT和AST的水平及肝组织MDA水平,改善CCl4引起的小鼠肝细胞肿大、肝小叶中央区弥漫性多发性点状坏死和灶性坏死等症状,显著增加给药后60 min内正常大鼠的胆汁流量及胆汁内胆红素含量。结论栀子柏皮汤具有明显的保肝利胆作用。

栀子苷与栀子柏皮汤中栀子苷在MDCK细胞跨膜转运模型上的转运研究

目的考察栀子苷与栀子柏皮汤中栀子苷在MDCK细胞跨膜转运模型上的转运特性。方法利用MTT实验筛选出栀子苷和栀子柏皮汤在MDCK细胞上的安全浓度,以MDCK细胞跨膜转运模型研究药物的双向转运,考察时间、药物浓度、P-糖蛋白(P-gp)抑制剂及EDTA对栀子苷转运的影响,然后比较相同浓度的栀子苷和栀子柏皮汤中栀子苷吸收转运的差异,采用HPLC法检测栀子苷的浓度,计算其表观渗透系数(Papp)。结果栀子苷在MDCK细胞模型上的转运量具有一定的时间和浓度依赖性,P-gp抑制剂对其转运没有明显影响,EDTA能够增加其跨膜转运量,各浓度栀子柏皮汤中栀子苷的吸收Papp分别为(8.96±0.35)×10-7cm·s-1,(8.95±0.38)×10-7cm·s-1和(9.16±0.30)×10-7cm·s-1、明显高于栀子苷单体的吸收Papp(5.85±0.44)×10-7cm·s-1、(6.88±0.38)×10-7cm·s-1和(6.31±0.19)×10-7cm·s-1(P<0.05)。结论栀子苷在MDCK细胞模型上表现为被动扩散,且不受P-gp的影响,可能有细胞旁路转运,栀子柏皮汤能促进栀子苷的吸收。

栀子柏皮汤对α-萘异硫氰酸酯诱导的肝内胆汁淤积大鼠的保护作用

目的探讨栀子柏皮汤对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导的肝内胆汁淤积大鼠的保护作用及可能机制。方法实验组大鼠灌胃给予栀子柏皮汤7 d,第7天给药后4 h给ANIT造模。48 h后,测血清总胆红素(TBIL)含量、碱性磷酸酶(ALP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)活性及肝匀浆组织中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。RT-PCR法及Western blot法检测胆汁代谢相关的转运体胆盐输出泵(BSEP)、钠-牛磺酸共转运体(NTCP)及氧化应激相关酶细胞色素CYP2E1的表达。结果栀子柏皮汤能够呈剂量依赖性的降低血清TBIL、ALP、ALT、AST、GGT及肝组织中MDA、GSH含量;提高肝组织中SOD、GSH-Px活性;增加肝组织中BSEP的表达,降低NTCP及CYP2E1的表达。结论栀子柏皮汤对ANIT诱导的肝内胆汁淤积大鼠具有保护作用,其作用机制可能与调控胆汁代谢相关转运体及抗氧化损伤有关。

双波长梯度洗脱法测定栀子柏皮汤制剂中栀子苷、甘草苷的含量

目的:研究以HPLC法同时测定栀子柏皮汤制剂(栀子、黄柏、甘草)中栀子苷、甘草苷含量的方法。方法:采用Kro-masil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.5%冰乙酸为流动相,梯度洗脱,体积流量:1.0 mL/min,λ1=238 nm(检栀子苷),λ2=276 nm(检甘草苷),柱温:30℃。结果:栀子苷在49.1μg/mL^147.4μg/mL与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 8,甘草苷在6.1~18.4μg/mL与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 9。平均加样回收率(n=9):栀子苷为99.40%;甘草苷为99.94%。结论:本法操作简便,结果可靠,重现性好,可作为该产品质量控制的方法。

HPLC-DAD法同时测定复方栀子柏皮汤中8种有效成分的含量

目的:采用HPLC-DAD法建立同时测定栀子柏皮汤中栀子苷、甘草苷、西红花苷-Ⅰ、盐酸药根碱、西红花苷-Ⅱ、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱和甘草酸8种有效成分含量的方法。方法:采用Agilent TC-C18(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相A为乙腈,B为0.2%磷酸水溶液,流速为0.8 mL/min,梯度洗脱,柱温30℃。应用DAD检测器确定各成分的最佳检测波长。结果:各成分均能有效检出且分离度良好。栀子苷、甘草苷和甘草酸最佳检测波长为238 nm,盐酸药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱最佳检测波长265 nm,西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ最佳检测波长440 nm。结论:利用HPLC-DAD法可同时测定栀子柏皮汤中8种有效成分的含量,该法简便可靠,重现性好,可为复方栀子柏皮汤的质量控制与评价提供新的方法。

用均匀设计优选栀子柏皮汤半仿生法提取的工艺条件

[目的]优选栀子柏皮汤半仿生提取工艺条件。[方法]采用均匀设计法,在方药规格、煎提温度、煎提用水量、滤过、浓缩等条件相同的情况下,以分子量≤1 000 u提取物、栀子苷、小檗碱、甘草次酸、总生物碱为指标,综合评判,优选该方药半仿生提取的工艺条件。[结果]3煎用水的pH值依次为2.031 1、7.495 5、8.419 3,3煎总计时间为4.016 2 h。[结论]结合实际生产,确定3煎用水的pH值依次为2.0、7.5、8.5;提取时间依次为2、1、1 h。

外敷栀子柏皮汤对田径运动员胫骨疲劳性骨膜炎治疗的作用

目的:探讨外敷栀子柏皮汤是否具有缓解和治疗胫骨疲劳性骨膜炎的作用。方法:60例患有胫骨疲劳性骨膜炎的田径运动员随机分为A、B、C、D 4组,每次进行训练之后,A组通过按摩缓解症状,B、C、D组在按摩后,分别将浓度1、5、10 g/ml的栀子柏皮汤外加温水水浴并外敷于疼痛的小腿胫骨上,每次1 h,每天上下午训练后各一次,用有效率和视觉模拟评分法(visual analog scale,VAS)指标对患者治疗前后的疗效进行评定。结果:经5 d治疗后,C、D组的有效率显著高于A、B组(P<0.05,P<0.01),D组有效率明显高于C组(P<0.05);C、D组的VAS指数明显低于A、B组(P<0.05,P<0.01),D组VAS指数明显低于C组(P<0.05)。结论:外敷有效浓度的栀子柏皮汤对田径运动员胫骨疲劳性骨膜炎患者有显著的治疗作用,可以作为田径运动员胫骨疲劳性骨膜炎的治疗方法。

HPLC测定栀子柏皮汤中甘草次酸的含量

目的建立栀子柏皮汤中甘草次酸的含量测定方法。方法采用HPLC法，Phenomenex Luna C18柱；流动相为乙腈-水-冰醋酸（65：35：0．8）；检测波长250nm。结果甘草次酸在0．276-5．530μg范围内线性良好（r=0．9999），平均回收率为100．7％，RSD=2．2％（n=6）。结论所建方法准确、简便、专属性好。

煎煮时间对栀子柏皮汤药效组分的影响

目的:研究煎煮时间对栀子柏皮汤药效组分的影响,为栀子柏皮汤的质量控制与临床实际应用提供理论依据。方法:采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)法同时测定不同煎煮时间(10,20,30,40,50,60 min)栀子柏皮汤药效组分栀子苷-京尼平龙胆双糖苷-木兰花碱-甘草苷(λ=238 nm)、盐酸小檗碱-盐酸巴马汀-甘草酸(λ=265 nm)、异甘草苷(λ=360 nm)、西红花苷Ⅰ-西红花苷Ⅱ(λ=440 nm)的含量。结果:当煎煮时间改变时,各成分的变化趋势不尽相同;栀子、黄柏、炙甘草药效组分及药效组分总量不同煎煮时间下变化显著,栀子、黄柏、炙甘草药效组分以及药效组分总量在10～20 min均有大幅度上升,20 min后出现不同程度的减少后含量增加,最终含量与20 min时大致相近。结论:不同煎煮时间影响栀子柏皮汤药效组分的溶出,从而影响疗效;当煎煮时间为20 min,各组分含量较高,且避免了因受热时间过长对西红花苷类成分的破坏,验证了传统煎煮时间的合理性。

栀子柏皮汤对α-萘异硫氰酸酯致大鼠肝损伤的保护作用

目的观察栀子柏皮汤对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)所致大鼠急性肝损伤的保护作用。方法将Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,阳性对照组,栀子柏皮汤低、中、高剂量组,ig给药10 d。各组于实验第8天,ig ANIT造模,48 h后取血,分离血清,以血清肝功能、SOD的活性以及肝脏病理组织学的改变为观察指标。结果与模型组比较,栀子柏皮汤低、中剂量组的血清ALT、AST、ALP、GGT和TBIL均显著下降(P<0.01或P<0.05),血清SOD显著升高(P<0.01或P<0.05);肝脏病理组织学检查表明,栀子柏皮汤低、中剂量组能明显减轻肝细胞变性、坏死以及炎细胞浸润。结论栀子柏皮汤低、中剂量组对ANIT所致大鼠急性肝损伤有明显的降酶保肝作用。

栀子柏皮汤合五苓散加味治疗湿热质间歇期痛风临床观察

目的研究栀子柏皮汤合五苓散加味治疗湿热质间歇期痛风的临床疗效。方法将70例湿热质间歇期痛风患者随机分为2组,各35例。对照组给予苯溴马隆片治疗;治疗组在对照组基础上加用栀子柏皮汤合五苓散加味治疗。结果2组治疗后血尿酸明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05);2组治疗前后中医证候积分比较均有明显改善(P<0.05),并且治疗组优于对照组(P<0.05);2组的总有效率进行比较,治疗组优于对照组(P<0.05);治疗结束后3个月,治疗组复发率明显低于对照组(P<0.05)。结论栀子柏皮汤合五苓散加味治疗湿热质间歇期痛风具有较好的临床疗效。

RP-HPLC法同时测定栀子柏皮汤不同剂型甘草苷与甘草酸铵的含量

目的：建立RP-HPLC同时测定栀子柏皮汤传统汤剂、经方颗粒剂及单味配方颗粒剂中甘草苷、甘草酸铵含量的分析方法。方法：采用Agilent Extend-C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,以乙腈-0.05%磷酸水溶液-甲醇为流动相梯度洗脱,流速为0.8ml/min,检测波长为237nm,柱温30℃。结果：甘草苷及甘草酸铵进样量分别在0.10~0.80μg和0.10~0.50μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率（n=9）分别为100.36%（RSD=0.76%）、100.43%（RSD=1.10%）。结论：本法适用于不同剂型栀子柏皮汤中甘草苷、甘草酸铵的同时测定。

薄层扫描法测定栀子柏皮汤不同剂型中盐酸小檗碱的含量

目的:考察栀子柏皮汤传统汤剂、复方颗粒剂和配方颗粒中盐酸小檗碱的含量差异。方法:硅胶G薄层预制板(100×200mm),定量点样机点样,展开条件:苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-水(6∶3∶1.5∶1.5∶0.3),置氨蒸气和展开剂等体积饱和层析缸内展开,取出,晾干,测定波长340 nm,狭缝0.4×0.4mm。结果:盐酸小檗碱含量为:配方颗粒剂>复方颗粒剂>传统汤剂。结论:用薄层扫描法测定栀子柏皮汤中盐酸小檗碱的方法可靠,简便易行。

栀子柏皮汤方药3种方法≤1000Da提取液保肝退黄作用比较

目的 :考察栀子柏皮汤3种提取液(SBEE法、SBE法、WE法)的保肝退黄作用,进一步验证优选出的SBEE法提取工艺的科学性和合理性。方法:以血清肝功能、SOD活性以及肝脏病理组织学的改变为观察指标,考察栀子柏皮汤3种方法(SBEE法、SBE法、WE法)≤1 000 Da提取液的保肝退黄作用。结果:栀子柏皮汤3种方法≤1 000 Da提取液的保肝退黄作用为:SBEE法优于SBE法优于WE法。结论:栀子柏皮汤≤1 000 Da提取液以SBEE法制备较佳。

栀子柏皮汤不同配伍对四氯化碳诱导肝纤维化小鼠的治疗作用

目的研究栀子柏皮汤不同配伍组合的抗肝纤维化药理作用。方法采用四氯化碳(CCl_4)引起的肝纤维化小鼠模型观察栀子柏皮汤各配伍组的抗肝纤维化作用,同时给予不同配伍的栀子柏皮汤进行灌胃治疗。生化检测相关肝纤维化及炎症指标,运用Masson染色和HE染色检测肝纤维化的变化,Western blot法检测Ⅰ型胶原及α-横纹肌肌节肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。结果栀子柏皮汤及各配伍组均可不同程度的降低小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、羟脯氨酸(Hyp)及透明质酸(HA)水平,改善肝脏的病理变化,其中栀子黄柏甘草配伍组抑制CCl_4诱导的小鼠肝纤维化效果最佳(P<0.01),并能显著抑制肝组织中Ⅰ型胶原和α-SMA的蛋白表达(P<0.01)。实验结果表明栀子柏皮汤亦可明显降低血清中转化生长因子β(TGF-β)的表达水平。结论栀子柏皮汤不同配伍组能不同程度改善小鼠肝纤维化,但栀子黄柏甘草配伍,即全汤组抗肝纤维化作用最明显,并且栀子柏皮汤的抗肝纤维化作用可能与降低TGF-β水平有关。