GAP质控下栽培丹参重金属内控标准物的制备和表征

目的 :用GAP质控下栽培的中药丹参作为重金属内控标准物 ,研究其制备和表征方法。方法 :采用四川中江GAP栽培条件下的丹参制备标准物 ,经浓硝酸 过氧化氢微波消解体系处理后用ICP MS测量其重金属含量 ,方法准确、可靠。结果 :用国家一级标准参考物质检验测量方法的准确性和精密度 ,回收率大部分在 90 %～110 % ,精密度小于 5%。结论 :经过不同实验室测试和不同时期稳定性测试的实验结果表明 ,丹参内控标准重金属含量的数据准确可靠 ,稳定性好 ,可作为丹参中药材重金属质量控制的参考标准 。

地质调查通用标准物质及标准方法信息系统

根据各地质实验室的特点和质量管理规范需求,结合实验室认可及检测实验室能力的需要,建立了地质调查通用标准物质和标准方法信息系统。该系统不仅能提供地质调查通用标准物质、标准方法的基本信息,还增加了与能力分析相关的检测参数信息,并实现了标准信息网上查询和维护管理。该系统适用于地质调查实验室的质量管理系统。

Y染色体STR基因座DYS385等位基因分型标准物的制备及群体遗传学研究

目的 采用分子克隆技术大量制备优质标准 STR基因座等位基因分型标准物 ,解决长期困扰STR分型上存在的准确性和标准化问题。方法 先用 PCR扩增出 Y染色体上 DYS385基因座的 9个等位基因片段 ,将其插入 p U C重组质粒中 ,经 DNA测序分析证实插入片段的结构及大小 ,按国际标准将插入的等位基因片段进行命名 ,最后经转染、扩大培养、扩增及再鉴定后制备出标准的 DYS385等位基因分型标准物。结果 应用此法制备出大量的 DYS385等位基因分型标准物 ,并将其成功地应用于该基因座在中国成都地区汉族及德国美茵茨地区高加索人群体中的基因型分布频率调查。结论 该法制备的 STR基因座等位基因分型标准物在法科学实践中应用价值极高 。

利用PCR技术快速制备DNA分子量标准物

目的:制备一套DNA分子量标准物。方法:利用多聚酶链式反应技术(PCR),以连接有9个不同大小DNA片段的pMD18-T载体为模板,M13引物为通用引物,进行大规模扩增,并进行2%琼脂糖凝胶电泳分析和利用TanonGIS凝胶图像处理系统对凝胶扫描及拍照。结果:DNA分子量条带大小依次为1653bp、1173bp、691bp、606bp、496bp、401bp、326bp、238bp、155bp,条带分布适度、亮度清晰。结论:制备了能满足研究和实验室的要求DNA分子量标准物,和市售的相比,成本大大降低。

D7S817、D10S1432、D10S1213及D18S865分型标准物的制备及其遗传多态性研究

目的 利用重组质粒制备四个新的 STR基因座 (D7S817、D10 S14 32、D10 S12 13及 D18S86 5 )的分型标准物 ,并进行群体遗传学研究。方法 从聚丙烯酰胺凝胶中分离出经 PCR扩增后的等位基因片段 ,二次扩增后纯化的等位基因片段被分别插入到 PU C质粒载体中。利用 DNA测序证实插入片段大小及结构的正确性后 ,用国际标准将插入的等位基因片段进行命名。再转染到适当的 E.coli DH5αTM细胞内选择培养 ,以纯化质粒为模板 ,扩增出各基因座的等位基因片段后混合。结果 得到四个 STR基因座 (D7S817、D10 S14 32、D10 S12 13及 D18S86 5 )分型标准物 ,应用所制备的分型标准物研究汉族和东乡族群体中的基因型分布频率。结论 制备出的四个 STR基因座的分型标准物在法科学领域中有很高的应用价值 。

分子克隆技术制备miniSTR基因座等位基因分型标准物

目的调查D9S2157、D9S1122、D10S1435、D12ATA63和D2S1776共5个miniSTR基因座在河北汉族人群中的遗传多态性,并用分子克隆的方法制备等位基因分型标准物。方法用荧光PCR和ABI310遗传分析仪对河北汉族120份无关个体血样中的5个miniSTR基因座进行遗传多态性分析。用分子克隆的方法构建等位基因分型标准物。结果5个基因座在河北汉族人群中分别检测出了8、8、7、5和8个等位基因,多态信息含量分别为0.790、0.720、0.750、0.630和0.850。结论5个基因座在河北汉族人群中有较高的多态信息含量,其分子克隆法制备的等位基因分型标准物具有较高的法医学应用价值。

D1S549基因座分型标准物的克隆制备方法及其群体遗传学研究

目的 采用分子克隆技术建立制备大量优质标准 STR基因座等位基因分型标准物的方法，解决长期困扰 STR分型上存在的准确性和标准化问题。方法 先用 PCR扩增出 D1S549基因座的 8个等位基因片段，将其插入 pUC重组质粒中，经 DNA测序分析证实插入片段的结构及大小，用国际标准将插入的等位基因片段进行命名，最后经转染、扩大培养，扩增及再鉴定后制备出标准的 D1S549等位基因分型标准物。结果应用此分型标准物，调查了成都地区汉族 ,甘肃回族及新疆维族群体 D1S549基因座的基因型分布频率。结论 表明该法制备的 STR基因座等位基因分型标准物适用于法医学鉴定实践， D1S549基因座是一个适合我国群体分析和法医学遗传分析的遗传标记。

亚微米级聚苯乙烯微球粒度标准物质的研制

以NaHCO3/Na2CO3为pH稳定剂和离子强度调节剂,用无皂乳液聚合法合成了亚微米级聚苯乙烯(PS)微球,用正交实验考察不同因素对合成聚合物微球粒径及粒径分布的影响,优化制备600~1000nm单分散PS微球的工艺条件,放大批量制备了标称粒经是600,800和1000nm的PS微球,合成的PS微球球形度好,相对标准偏差小,均匀性和稳定性都满足国家一级粒度标准物质的要求.

检测有机汞的标准物质氯化甲基汞的合成条件

选择两步法合成ＣＨ３ＨｇＣｌ，即ＣＨ３Ｉ与Ｈｇ通过光化学反应制得ＣＨ３ＨｇＩ，再使用ＡｇＣｌ将ＣＨ３ＨｇＩ转化为ＣＨ３ＨｇＣｌ。以白炽灯作为光反应的光源；选用无水乙醇或丙酮或乙醚作为转化反应的溶剂，在进行转化反应操作时，必须加以搅拌；同时，确定在相应的溶剂中重结晶３次及操作条件。揭示了ＡｇＣｌ转化ＣＨ３ＨｇＩ的反应为固液异相反应，并确定了相应的溶剂。合成ＣＨ３ＨｇＣｌ的熔点为１６９～１７０℃，元素分析的结果为Ｃ：４．８９％、Ｈ：１．１１％，与文献值一致。使用合成的ＣＨ３ＨｇＣｌ配成标准溶液。

DXS6804基因座等位基因分型标准物的克隆制备及其群体遗传学研究

目的用分子克隆技术制备DXS6804基因座等位基因分型标准物,并用于中国云南普米族人群的群体遗传学研究,解决长期困扰短串联重复序列分型上存在的准确性和标准化问题。方法用PCR扩增出DXS6804基因座的各等位基因片段,PCR产物克隆后,DNA测序证实插入片段的大小和结构,按国际标准进行命名后,经扩大培养、扩增及再鉴定后,制备出该基因座的等位基因分型标准物,进行群体研究。结果调查了中国云南地区普米族人群基因座的基因型分布频率,发现DXS6804基因座两个分型标准物外等位基因。结论分子克隆技术是制备等位基因分型标准物的可靠方法,DXS6804基因座是一个适合我国法医学和群体遗传学分析的遗传标记。

回收试验中不同浓度标准物的回收率分析

目的 观察回收试验中加入不同浓度标准物对回收率的影响。方法 在混合血清样品中加入不同浓度的标准物进行回收试验。结果 加入标准物浓度为样品浓度的 10 %、2 0 %、5 0 %和 10 0 %时 ,它们的回收率分别为112 .4%、10 6.2 %、96.3 %和 99.5 % ,四种不同加入量的回收率差别有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论 回收试验中标准物加入量为样品浓度的 5 0 %～ 10 0 %时 ,有较好的加收率。

用PCR-PAGE切胶回收-PCR测序法制备DXS9898基因座等位基因分型标准物

目的:探索一种快速制备X染色体短串联重复序列(short tandem repeat,STR)基因座等位基因分型标准物的简便方法。方法:采用PCR-聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)切胶回收-二次PCR-测序的方法制备X-STR基因座等位基因分型标准物。结果:应用此法制备出大量的DXS9898基因座等位基因分型标准物。结论:利用PCR-PAGE切胶回收-PCR测序制备STR基因座等位基因分型标准物是一种简便易行的方法。

用分子克隆技术构建D12S375基因座等位基因分型标准物及汉、回、维族群体遗传学研究

采用分子克隆技术大量制备STR基因座等位基因分型标准物 ,解决长期困扰STR分型的准确性和标准化问题。PCR扩增出D12S375基因座的 7个等位基因片段 ,将其插入pUC重组质粒中 ,经DNA测序分析证实插入片段的结构及大小 ,按重复单位的重复次数对插入的等位基因片段进行命名 ,最后经转染、扩增及再鉴定后制备出标准D12S375基因座等位基因分型标准物。应用此分型标准物 ,调查D12S375基因座在成都汉族 ,甘肃回族及新疆维族群体中的基因型分布频率 ,评估其在法医学实践中的应用价值。

聚甲基丙烯酸甲酯锥形量热仪标准物质候选物的均匀性和稳定性考察

介绍聚甲基丙烯酸甲酯锥形量热仪标准物质候选物的制备过程,对其配方设计、制备工艺、均匀性检验、稳定性考察进行了研究。采用锥形量热仪研究了炭黑的种类、炭黑的添加量、聚甲基丙烯酸甲酯的熔融指数对标准物质候选物热释放速率的影响。当添加质量分数0.5%的炭黑于熔融指数为16.0 g/(10 min)的聚甲基丙烯酸甲酯中时,该标准物质候选物具有良好的均匀性和稳定性。

国产遗传分析仪测试专用等位基因标准物的新型制备方法研究

利用定点突变技术,以D2S441基因座为靶位点,通过体外克隆重组的方法建立包含该STR位点重复单位为8-17的等位基因克隆库,调整模板的浓度后,采用荧光标记引物,对上述模板混合物进行复合模板PCR扩增,最终获得了高质量的等位基因分型标准物。测试结果表明,该方法制备的等位基因标准物可完全满足GA118-16A等国产遗传分析仪的测试和验证要求。

纳米标准物及长时稳定性

纳米级尺度实物标准是纳米尺寸传递体系中的关键环节,也是评价和校正压电驱动等微扫描微定位装置的重要工具。该文针对一维台阶实物标准的材料选择、加工和评价方法等方面进行研究,并对已试制的纳米标准台阶进行了长时稳定性的跟踪研究。实验结果表明,该标准物的台阶高度制造精度为±1.1nm,长期稳定性优于±0.5nm。

DXS8378基因座等位基因分型标准物的制备及其遗传多态性

目的采用分子克隆技术制备X染色体DXS8378位点等位基因分型标准物,了解该STR位点在中国云南傈僳、普米、德昂三个群体的遗传多态性及其法医学应用价值。方法用PCR扩增和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分离各等位基因片段,回收纯化后进行二次扩增,分别插入到pGEM(-T Easy质粒载体中,DNA测序证实插入片段的大小和结构,等位基因片段按国际标准进行命名后,经转化、扩大培养、扩增及再鉴定后制备出该位点的等位基因分型标准物,进行群体遗传学研究。结果得到DXS8378位点分型标准物,应用此分型标准物研究中国云南傈僳、普米、德昂族人群中基因型分布频率。结论该法制备的STR位点等位基因分型标准物适用于法医学鉴定实践,具有较高的应用价值,适合于群体遗传学的分析。

用克隆技术制备STR等位基因分型标准物的研究

用克隆技术制备D2S1338基因座等位基因分型标准物,首先在人群中筛选出D2S1338基因座的13个等位基因,经聚丙烯酰胺凝胶分离纯化;然后进行PCR扩增,并将纯化后的扩增产物与pGM-T质粒载体连接,转化到DH5α感受态大肠杆菌中;第三,鉴定阳性克隆产物并对重组质粒进行测序,按国际标准对插入的等位基因命名;第四,经扩大培养、提取质粒DNA,以后者为模板制备出等位基因分型标准物。结果表明克隆技术制备方法,能长期、大量、稳定地保存等位基因,同时解决了STR分型标准化的问题。

4个Y-STR基因座遗传多态性及分子克隆技术制备分型标准物

目的研究Y染色体4个新发现的STR基因座在成都汉族群体中的遗传多态性,寻找适合于法医学应用的Y-STR基因座并用分子克隆法制备其等位基因分型标准物。方法用PCR扩增和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对105名成都地区汉族无血缘关系男性个体的4个Y-STR基因座进行分型。并通过分子克隆技术制备DYS643基因座的等位基因分型标准物。结果DYS632、DYS634、DYS642和DYS643四个STR基因座均具有Y染色体特异性,在成都汉族群体中等位基因个数分别为2、4、3和5,共检测出31种单倍型;DYS643基因座的等位基因分型标准物可以用于群体研究。结论DYS643基因座及其分子克隆法制备的等位基因分型标准物具有较高的法医学应用价值。

中国汉族人群apoB VNTR等位基因的多态性分析及其分型标准物的克隆制备

目的对中国汉族人群的apoB VNTR等位基因进行分布频率、序列结构等多态性分析,并通过分子克隆技术制备apoB VNTR等位基因分型标准物。方法通过PCR扩增并结合电泳、测序等方法分析人群apoB VNTR等位基因的多态性,并将该人群中得到的所有类型等位基因片段插入pUC重组质粒,经转染、扩大培养、扩增及再鉴定后,制备出apoB VNTR等位基因分型标准物。结果所检测人群中共检测出16种apoB VNTR等位基因,发现核心序列存在变异体,并成功制备出分型标准物。结论对apoB VNTR的多态性分析应结合等位基因的分布频率与核心序列的结构,所制备的apoB VNTR等位基因分型标准物使apoB VNTR电泳法分型更加准确。