食品微生物检测实验室标准菌株的管理措施分析

食品安全问题关系人们的生命健康,其中微生物污染是危害较大的问题之一,因此必须加强食品微生物检测工作。为解决食品微生物检测实验室标准菌株管理存在的问题,对微生物实验室标准菌株管理的现状、不足进行分析并提出有效解决措施,确保了实验室对标准菌株的规范性管理。

微生物检测中标准菌株的作用

近年来因微生物污染引发的食源性疾病、药物安全性问题频发,因此对食品以及药品的质量安全要求再次提升到新的高度。为保障食品、药品的质量安全,对微生物污染的防控给予了极高的重视度。其中,微生物检测在其中占据非常重要的地位。标准菌株不仅生物学特性稳定,而且具有溯源性,因此对微生物检测中标准菌株的来源、选择、验收、应用及其相关注意事项进行归纳总结非常必要,对检测结果的准确性可提供重要参考。

标准菌株在食品微生物检验中的重要作用

在食品微生物检验中,标准菌株(standard species, SE)是一种用于参考的特殊菌株,其是用于微生物检验的标准品,也是检验过程中必备的“标准”之一。其主要作用是作为微生物检验结果的衡量标准,便于对检验结果进行统计分析。标准菌株在食品微生物检验中,可用于食品中特定菌种或细菌的定性、定量测定,也可用于食品样品中特定微生物指标的测定。

弧菌标准菌株外膜蛋白的比较研究

对32种弧菌标准菌株的外膜蛋白(OMP)进行了比较研究。32株弧菌标准菌株外膜蛋白的SDS-PAGE图谱各不相同。不同菌株的外膜蛋白有很大差异,一般为3～7条,分子量范围为91000～14000。多数菌株有相同的主要外膜蛋白如54000,43000和27000为许多菌株所共有,但未发现所有菌株共同的外膜蛋白。

头孢噻呋等抗菌药物对4种标准菌株的药效学研究

通过用头孢噻呋等抗菌药物对兽医 临床常见的4种标准菌株的体外抗菌活性的 研究,表明头孢噻呋等对4种标准菌株的抗 菌活性较强;头孢噻呋等对4种标准菌株的 杀菌速率均较大;与氨苄西林相比,头孢噻呋 的各个浓度(8,5,2MIC)对金黄色葡萄球菌、 猪链球菌的杀菌速率较小,即它们在3h内使 活菌减少的值差异显著(P<0.05),但头孢 噻呋的各个浓度(8,5,2MIC)对鸡大肠杆菌、 鸡白痢沙门氏菌的杀菌速率均大于氨苄西林 的各个浓度;头孢噻呋与头孢曲松的各个浓 度相比较,对4种标准菌株的杀菌速率差异 均不显著(P>0.05);头孢噻呋等3种β 内 酰胺类抗生素对4种菌株的杀菌速率均不随 浓度(8,5,2MIC)的增加而增大(P> 0.05),即它们均为非浓度依赖性的杀菌药 物。

标准菌株ATCC 16404的分类学进展及影响

作为丝孢类真菌的代表菌株,标准菌株ATCC 16404被列入包括《美国药典》在内的各类标准中。2008年,Jan Houseknecht等人通过表型结合基因型的多相鉴定技术,确认该菌株为巴西曲霉(Aspergillus brasiliensis)。2010年新版《美国药典》和世界微生物菌种数据中心(WDCM)编制的《培养基相关参考菌株目录》采纳了该菌株新的分类学描述。这一变化会导致各国对标准中涉及的黑曲霉标准菌株重新进行分类学鉴定,并对内部相关的SOP进行修改。文中详细介绍了该菌株的历史、基本特征、在标准中的应用情况以及新的多相分类鉴定研究进展。

细菌回复突变试验标准菌株分子质控方法的研究

目的建立细菌回复突变试验标准菌株的分子生物学质量控制(质控)方法。方法使用分子生物学方法(16s rDNA、种属特异性鉴定PCR、组氨酸操纵子关键突变位点序列分析、凝胶电泳和多位点序列分析方法)鉴定细菌回复突变试验标准菌株,并与传统生物学特性的质控方法进行比对。结果细菌回复突变试验标准菌株的生物学特性结果符合标准要求;16S rDNA序列比对为沙门菌,且种属特异性扩增结果为鼠伤寒沙门菌;标准菌株均具有组氨酸操纵子区原始构建的突变位点;脉冲场凝胶电泳带型均不一致,最低相似度为82%;多位点序列分析可分为ST19和ST3438两个ST型。结论建立了细菌回复突变试验标准菌株的分子生物学质控方法,该方法具有操作性强和重复性好等特点,与传统生物学特征方法具有很好的一致性,特别是针对相应his基因突变位点的检测手段,确保了细菌回复突变试验标准菌株检测的遗传稳定性和准确性。

碘伏对结核杆菌标准菌株及耐多药临床菌株的杀灭效果研究

目的了解碘伏对结核杆菌标准株和耐多药株的杀灭效果。方法采用悬液定量杀菌试验。结果含有效碘250mg/L作用3min、500mg/L作用1min对H37Rv杀灭对数值>4.00;500mg/L作用1min对H37Ra杀灭对数值>4.00;125mg/L作用5min、250mg/L作用1min、500mg/L作用1min,对a株杀灭对数值>4.00;250mg/L作用1min对b株杀灭对数值>4.00;125mg/L作用5min、250mg/L作用3min、500mg/L作用1min,对c株杀灭对数值>4.00;125mg/L作用5min、250mg/L作用3min、500mg/L作用1min,对d株杀灭对数值>4.00。结论碘伏对标准株及耐多药株均有良好杀菌作用。而6株菌中qacE△1-sulI基因检出率50%,均未检测qacA/B基因。

标准菌株的培养特性

通过对在不同培养基上对标准菌株图像制备,为检验工作者提供了实用的参考资料。

七种清热解毒类中药对四种标准菌株的作用

目的为清热解毒类方药抗菌效价的生物检定法确立目标药材和目标菌株;方法观察七种清热解毒类中药对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、藤黄微球菌的抑制作用;结果连翘对四种细菌均有较好抑制作用;板兰根、丹皮对四种菌均没有出现抑制作用;苦参对四种细菌均有一定抑制作用;金银花有一定抑菌作用;鱼腥草有一定的抑菌作用;穿心莲对四种细菌均有较好抑制作用。结论不同清热解毒类方药有不同的抗菌谱。

标准菌株在进行食品微生物检测中的应用价值分析

食品安全已经成为当今社会重点关注的问题。进行食品微生物检测是保证食品安全的重要措施。标准菌株在进行食品微生物检测中具有着重要的应用价值。本文主要探讨标准菌株在进行食品微生物检测中的作用。

冷冻真空干燥保存Ames试验标准菌株的研究

Ames试验现已广泛用于检测各种环境化学物（药物、农药、食品添加剂、化学原料等）的致突变性和致癌性。此法有些实验环节要求较高,特别是测试菌株的保存。据Ashwood-Smith报道必须在液氮或-80℃超低温冰箱中保存各基因型才不易丧失,故此法影响了基层单位的推广应用。为此我们采用冷冻真空干燥法保存该菌株,经冻干前后及冻干后八个月、一年各时间点的测试得冻干菌仍保持其原有生物学性状及各基因型,现将此法介绍如下:

食品微生物检测实验室标准菌株的管理和质量控制

标准菌株是微生物检测实验室不可或缺的物质之一,稳定和有效的标准菌株对微生物检测质量的有效性起到了至关重要的作用。本文从标准菌株的选择、验收、传代及确认、保藏、期间核查、领用以及销毁等方面,分析了食品微生物检测实验室标准菌株的规范化管理程序和质量控制要素,为食品微生物检测实验室标准菌株的管理提供参考和借鉴。

酶制剂抗菌活性检测标准菌株的药敏性分析

即将正式颁布的国家标准《食品加工用酶制剂通用卫生标准》首次将酶制剂的抗菌活性列入检验指标,并采用了国际标准检验方法。研究针对国际标准方法中规定的6株酶制剂抗菌活性检验标准菌,选择了9大类40种常用抗生素,采用Kirby-Bauer法进行药敏性测定与分析。结果显示,6株标准菌对不同类的抗生素表现为不同的敏感性,但这一菌株组合对全部40种抗生素均为敏感。因此,此菌株组合具有较为广谱的药物敏感性,能较为全面的检测酶制剂中的抗菌物质;且标准菌株的药敏性图谱可为今后进一步分析酶制剂中抗菌活性物质的种类提供参考。

致泻大肠埃希氏菌检验用标准菌株的研究

对7株大肠埃希氏菌(Escherichia coli)进行分类学鉴定及毒力基因验证,评价其作为GB 4789.6—2016《食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验》标准菌株的可行性。采用细菌多相分类学鉴定方法对7株E.coli进行菌种鉴定,根据GB 4789.6—2016标准方法对7株菌进行致泻大肠埃希氏菌相关毒力基因PCR进行确认试验。结果表明,菌株CICC 10003携带uidA基因,CICC 10667携带uidA、sth、lt基因,CICC 10670和CICC 24187携带uidA、escV、stx 1、stx 2基因,CICC 24186携带uidA、pic、astA、aggR基因,CICC 24188携带uidA、invE基因,CICC 24189携带uidA、bfpB、escV基因。CICC 10667、CICC 24186、CICC 24188、CICC 24189分别属于产肠毒素大肠埃希氏菌、肠道集聚性大肠埃希氏菌、肠道侵袭性大肠埃希氏菌、肠道致病性大肠埃希氏菌,CICC 10670和CICC 24187属于肠道出血性大肠埃希氏菌,CICC 10003为非致泻大肠埃希氏菌。7株菌毒力基因检测结果均满足GB 4789.6—2016标准中相应E.coli类别性能要求,可作为致泻大肠埃希氏菌检验用标准菌株。

中国药典中5种标准菌生长曲线的测定

为测定《中国兽药典》(2015版)中5种标准菌的生长曲线,并对其方法的合理性进行讨论,参照《微生物学实验》(第4版)中细菌生长曲线的制作方法,以《中国兽药典》(2015版)规定的5种标准菌株大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、黑曲霉为研究对象,进行了菌株生长曲线的测定。结果表明:大肠埃希菌在1.5~4.5 h处于稳定期,金黄色葡萄球菌在1.0~5.5 h处于稳定期,铜绿假单胞菌在2.0~7.0 h处于稳定期,白色念珠菌在3.0~12.0 h处于稳定期,黑曲霉菌在96.0~110.0 h处于稳定期。多种标准菌株稳定期的测定完成,对相关微生物实验的进行具有重要的参考意义。

14种市售抗菌药对金黄色葡萄球菌标准菌株的体外抑菌作用

目的：通过测定我院使用的14种市售抗菌药对金黄色葡萄球菌标准菌株的体外抑菌浓度与美国临床和实验室标准协会（CLSI）标准比较，了解市售抗菌药抑菌作用的达标情况。方法：采用试管倍比稀释法测定药物的最低抑菌浓度。结果：有12种达标，2种超范围，其中克林霉素测定值为3.13μg/mL ，与 CLSI允许抑菌浓度范围（0.06～0.25μg/mL）比较存在较大差距；磺苄西林测定值为12.5μg/mL ，远高于同类抗菌药测定值。结论：此法可以作为市售抗菌药抑菌作用是否达标的监测方法。