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致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86 fedA基因的克隆与原核表达
1
作者
宁官保
田文霞
+3 位作者
刘国刚
李宏全
马海利
高荣琨
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期390-393,共4页
以致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86的基因组DNA为模板,对去掉信号肽的456bp的fe-dA基因进行了PCR扩增,将其克隆到原核表达载体pGEX-6P-1的BamHⅠ与EcoRⅠ位点之间,经酶切鉴定与测序,在大肠杆菌中以IPTG诱导表达,并对表达产物用SDS-P...
以致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86的基因组DNA为模板,对去掉信号肽的456bp的fe-dA基因进行了PCR扩增,将其克隆到原核表达载体pGEX-6P-1的BamHⅠ与EcoRⅠ位点之间,经酶切鉴定与测序,在大肠杆菌中以IPTG诱导表达,并对表达产物用SDS-PAGE和Western-blot分析进行验证。结果表明,筛选出的阳性质粒pGEX-fedA-2(pfedA)经测序并与GenBank中收录的M61713序列进行比较,证明插入序列及读码框正确;表达产物GST-FedA经SDS-PAGE分析大小约42.4ku,Western-blot分析证实其具有良好的反应原性。所构建的原核表达载体可大量表达抗原蛋白,为进一步研究猪水肿病亚单位疫苗奠定了基础。
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关键词
水肿病
标准菌株f107/86
f
edA
克隆
原核表达
原文传递
致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86SLT-ⅡeA基因的克隆与表达
2
作者
宁官保
田文霞
+3 位作者
刘国刚
李宏全
马海利
高荣琨
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012年第5期21-23,27,189,共5页
为了克隆与表达致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86类志贺毒素Ⅱ型变异体A亚单位(SLT-ⅡeA)基因,试验以F107/86为模板,PCR扩增去掉信号肽的935 bp的SLT-ⅡeA亚单位基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-6p-1的EcoRⅠ与SalⅠ位点之间并测序,...
为了克隆与表达致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86类志贺毒素Ⅱ型变异体A亚单位(SLT-ⅡeA)基因,试验以F107/86为模板,PCR扩增去掉信号肽的935 bp的SLT-ⅡeA亚单位基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-6p-1的EcoRⅠ与SalⅠ位点之间并测序,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果表明:对筛选出的阳性重组质粒pGEX-SLT-ⅡeA-4测序并与GenBank登录的M36727序列比较,证明插入序列及读码框正确;表达产物GST-SLT-ⅡeA经SDS-PAGE分析其大小为58.3 ku;Western-blot检测证实表达产物具有良好的免疫原性。说明试验所构建的原核表达载体可大量表达抗原蛋白。
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关键词
猪水肿病
标准菌株f107/86
SLT—ⅡeA
克隆
原核表达
原文传递
五皮饮治疗仔猪水肿病模型的疗效观察
3
作者
孙新堂
王传春
+1 位作者
王成森
郭洪梅
《中兽医学杂志》
2014年第5期14-16,共3页
以昆明系小鼠为试验动物,经腹腔注射107/86肉汤菌液,复制仔猪水肿病模型并观察五皮饮的治疗效果。结果显示:用107/86肉汤菌液可以成功复制仔猪水肿病模型,剖检可见到仔猪水肿病的典型病变。在所选择的中药方剂中,五皮饮疗效显著。
关键词
107/
86
菌
株
仔猪水肿病
五皮饮
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职称材料
题名
致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86 fedA基因的克隆与原核表达
1
作者
宁官保
田文霞
刘国刚
李宏全
马海利
高荣琨
机构
山西农业大学动物科技学院
出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期390-393,共4页
基金
山西省科技攻关项目(2007031059)
文摘
以致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86的基因组DNA为模板,对去掉信号肽的456bp的fe-dA基因进行了PCR扩增,将其克隆到原核表达载体pGEX-6P-1的BamHⅠ与EcoRⅠ位点之间,经酶切鉴定与测序,在大肠杆菌中以IPTG诱导表达,并对表达产物用SDS-PAGE和Western-blot分析进行验证。结果表明,筛选出的阳性质粒pGEX-fedA-2(pfedA)经测序并与GenBank中收录的M61713序列进行比较,证明插入序列及读码框正确;表达产物GST-FedA经SDS-PAGE分析大小约42.4ku,Western-blot分析证实其具有良好的反应原性。所构建的原核表达载体可大量表达抗原蛋白,为进一步研究猪水肿病亚单位疫苗奠定了基础。
关键词
水肿病
标准菌株f107/86
f
edA
克隆
原核表达
Keywords
edema disease(ED)
standard strain
f
107/
86
f
edA
cloning
prokaryotic expression
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86SLT-ⅡeA基因的克隆与表达
2
作者
宁官保
田文霞
刘国刚
李宏全
马海利
高荣琨
机构
山西农业大学动物科技学院
出处
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012年第5期21-23,27,189,共5页
基金
山西省科技攻关项目(2007031059)
文摘
为了克隆与表达致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86类志贺毒素Ⅱ型变异体A亚单位(SLT-ⅡeA)基因,试验以F107/86为模板,PCR扩增去掉信号肽的935 bp的SLT-ⅡeA亚单位基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-6p-1的EcoRⅠ与SalⅠ位点之间并测序,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果表明:对筛选出的阳性重组质粒pGEX-SLT-ⅡeA-4测序并与GenBank登录的M36727序列比较,证明插入序列及读码框正确;表达产物GST-SLT-ⅡeA经SDS-PAGE分析其大小为58.3 ku;Western-blot检测证实表达产物具有良好的免疫原性。说明试验所构建的原核表达载体可大量表达抗原蛋白。
关键词
猪水肿病
标准菌株f107/86
SLT—ⅡeA
克隆
原核表达
Keywords
swine edema disease
standard strain o
f
f
107/
86
SLT -ⅡeA
cloning
pmkaryotic expression
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
五皮饮治疗仔猪水肿病模型的疗效观察
3
作者
孙新堂
王传春
王成森
郭洪梅
机构
山东畜牧兽医职业学院
出处
《中兽医学杂志》
2014年第5期14-16,共3页
基金
潍坊市科技发展计划项目(合同号:20121359)
文摘
以昆明系小鼠为试验动物,经腹腔注射107/86肉汤菌液,复制仔猪水肿病模型并观察五皮饮的治疗效果。结果显示:用107/86肉汤菌液可以成功复制仔猪水肿病模型,剖检可见到仔猪水肿病的典型病变。在所选择的中药方剂中,五皮饮疗效显著。
关键词
107/
86
菌
株
仔猪水肿病
五皮饮
分类号
S853.7 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86 fedA基因的克隆与原核表达
宁官保
田文霞
刘国刚
李宏全
马海利
高荣琨
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
原文传递
2
致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86SLT-ⅡeA基因的克隆与表达
宁官保
田文霞
刘国刚
李宏全
马海利
高荣琨
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012
0
原文传递
3
五皮饮治疗仔猪水肿病模型的疗效观察
孙新堂
王传春
王成森
郭洪梅
《中兽医学杂志》
2014
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
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