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西部马脑脊髓炎病毒实时荧光RT-PCR检测方法建立及标准质控品制备 被引量:2
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作者 谷强 吴亚琼 +6 位作者 高志强 刘环 张伟 蒲静 乔彩霞 张鹤晓 吴清民 《中国动物检疫》 CAS 2013年第11期80-84,共5页
选取西部马脑炎病毒代表株进行序列比对分析,选择保守区域,设计合成引物和TaqMan探针。经对反应体系和条件进行优化,建立了检测西部马脑炎病毒的实时荧光RT-PCR检测方法,应用建立的方法对西部马脑炎病毒核酸、东部马脑炎病毒核酸、... 选取西部马脑炎病毒代表株进行序列比对分析,选择保守区域,设计合成引物和TaqMan探针。经对反应体系和条件进行优化,建立了检测西部马脑炎病毒的实时荧光RT-PCR检测方法,应用建立的方法对西部马脑炎病毒核酸、东部马脑炎病毒核酸、马动脉炎病毒核酸、马疱疹病毒1型核酸、马流感病毒H3N8亚型核酸进行检测,结果表明建立的方法只能检出西部马脑炎病毒核酸,与另外4种病毒核酸无交叉反应。进一步通过体外转录制备了西部马脑炎病毒McMillan株7442-10011的cRNA片段,经拷贝数计算、稀释、分装、均匀性和稳定性检验后,作为质控品对建立的方法进行评价。结果显示,所建立的方法其分析灵敏度可达10拷贝。对197份进口马血样品检测用时仅4小时,表明该检测技术快速、灵敏、特异。因此,本研究建立的方法可作为技术储备用于进口马匹的疫病筛查。 展开更多
关键词 西部马脑炎病毒 实时荧光RT-PCR 标准质控品
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东部马脑脊髓炎病毒荧光RT-PCR检测技术及标准质控品制备研究
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作者 谷强 吴亚琼 +6 位作者 高志强 刘环 张伟 蒲静 乔彩霞 张鹤晓 吴清民 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2014年第4期71-75,共5页
选取东部马脑脊髓炎病毒代表株进行序列比对分析,选择高度保守的区域,设计合成引物和Taq Man探针。对引物、探针浓度和反应条件进行优化,建立了东部马脑脊髓炎病毒荧光定量RT-PCR检测技术,实现了对东部马脑脊髓炎病毒的快速检测和鉴别... 选取东部马脑脊髓炎病毒代表株进行序列比对分析,选择高度保守的区域,设计合成引物和Taq Man探针。对引物、探针浓度和反应条件进行优化,建立了东部马脑脊髓炎病毒荧光定量RT-PCR检测技术,实现了对东部马脑脊髓炎病毒的快速检测和鉴别。通过体外转录,制备了含有扩增区域核酸片段的东部马脑脊髓炎病毒核酸标准质控品cRNA,经稀释、分装定量、均匀性和稳定性检验后,作为方法的质控品对建立的方法进行评价,结果表明,应用建立的方法对阳性标准品的检测其灵敏度可达10eopies,对197份临床样品检测,表明建立的东部马脑脊髓炎荧光定量RT-PCR检测技术快速、敏感、特异。该方法的建立对该病的快速检测,及时采取相应防治措施、减少疫情散播有重要意义,也为动物及其产品的进出口检疫提供了一种可靠方法。 展开更多
关键词 东部马脑脊髓炎病毒 标准质控品
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塑料食品包装中受限物质检测研究进展
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作者 杨欣 隋玲 +2 位作者 候新彤 张寒凝 石红梅 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第14期20-30,共11页
食品安全问题关系国计民生,近年来食品安全质量有了明显提高,但容易忽视却现实存在的食品安全隐患即食品接触材料,尤其是大量使用的塑料食品包装材料中有害物质迁移到食品中对食用者造成的潜在危害无时不在。本文综述了塑料食品包装材料... 食品安全问题关系国计民生,近年来食品安全质量有了明显提高,但容易忽视却现实存在的食品安全隐患即食品接触材料,尤其是大量使用的塑料食品包装材料中有害物质迁移到食品中对食用者造成的潜在危害无时不在。本文综述了塑料食品包装材料中4大类添加剂,包括增塑剂、紫外线吸收剂、抗氧化剂、荧光增白剂4类受限物质迁移至食品及食品模拟液中的风险及存在的安全问题、食品模拟物及迁移试验、受限物质检测研究现状,比较了我国与发达国家关于食品接触材料受限物质的法律法规及迁移限量,提出制备受限物质质控标准品对受限物质检测准确性和风险评估的重要性等。本文对加强我国塑料食品接触材料中受限物质的使用与监管、检测结果的方法学验证技术的开发,塑料食品接触材料添加剂的使用范围、使用限量及受限物质迁移限量值的制定,及对基于受限物质的食品安全风险评估等均具有明确的参考意义和数据支持。 展开更多
关键词 受限物 迁移 塑料食包装 标准质控品 检测
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