检测儿童肾病综合征(PNS)患者足细胞中标志蛋白的表达

目的分析和检测儿童肾病综合征(PNS)患者足细胞中标志蛋白表达的意义。方法选取我院2012年3月至2015年3月收治的90例儿童肾病综合征患者和同期86例正常健康体检者作为研究对象,均予以足细胞中标志蛋白检测。90例儿童肾病综合征患者归为观察组,86例正常健康体检者归为对照组。结果与对照组相比,观察组的PCX、Cys C、β2-MG、Cr、BUN等各项指标的数值均显著更高(P<0.05)。结论检测足细胞中标志蛋白的表达有利于判断儿童肾病综合征患者是否存在肾小球损伤及其损伤程度。

氧诱导视网膜病变小鼠模型的蛋白表达谱分析

背景视网膜新生血管（RNV）是目前世界范围内主要的致盲原因之一，而目前的治疗效果并不理想，因此需要寻找在疾病状态下异常表达的蛋白质标志物，为新生血管性视网膜疾病的治疗提供新的靶点。目的观察氧诱导视网膜病变（OIR）小鼠模型中视网膜血管的形态学特征，筛选并验证差异性表达的蛋白质分子。方法选取7日龄健康清洁级C57BL／6J幼鼠44只，分为OIR组和正常对照组。OIR组幼鼠先在氧体积分数为（75±2）％的环境下饲养5d，然后在正常空气环境中饲养5d，而正常对照组幼鼠仅在正常空气环境下饲养10d。取17日龄幼鼠经球后静脉注射高分子量异硫氰酸葡聚糖（FITC-dextran），然后制备视网膜铺片，观察视网膜血管的形态并统计视网膜无灌注区相对面积；取各组小鼠眼球行石蜡切片和苏木精一伊红染色，计数突破内界膜的血管内皮细胞核数；采用蛋白芯片法检测蛋白质分子在OIR组和正常对照组小鼠眼球中的差异性表达，并用Western blot法和ELISA法对差异表达蛋白进行验证。结果视网膜铺片结果显示，OIR组小鼠视网膜周边血管紊乱，静脉血管迂曲，视网膜中央有明显的无灌注区，在视网膜灌注区和无灌注区的交界处有大量新生血管芽，而正常对照组视网膜血管细密，静脉平滑，分布均匀整齐。OIR组小鼠视网膜无灌注区的相对面积为（25．53±2．16）％，较正常组无灌注区的相对面积（0．66±0．36）％明显增加，差异有统计学意义（t=-27．61，P〈0．01）。石蜡切片苏木精-伊红染色结果表明，OIR组小鼠视网膜平均每张切片突人玻璃体腔的血管内皮细胞核数为（28．41±3．97）／切片，而正常组为（0．16±0．31）／切片，两组间比较差异有统计学意义（t=-54．42，P〈0．001）。蛋白芯片检测结果显示，在检测的62个与新生血管和炎症相关的细胞因子中，表达变化达1．5倍以上者10个，包括3个上调因子和7个下调因子；表达变化达2倍以上的细胞因子4个，包括3个下调因子和1个上调因子。对表达差异最显著的6个细胞因子（上调、下调各3个）进行Western blot和ELISA验证，结果表明血小板因子4（PF-4）、血管内皮生长因子A（VEGF—A）、P-选择素（SELP）、血管细胞黏附分子1（VCAM-1）、可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ（sTNF—RⅡ）以及趋化因子半胱氨酸-X-半胱氨酸基元配体16（CXCL16）的表达与蛋白芯片检测的表达趋势一致，其中PF-4、SELP和VEGF—A在OIR眼球中表达显著上调，CXCLl6、sTNF—RⅡ和VCAM-1在OIR眼球中的表达显著下调，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论本研究成功建立OIR小鼠模型。细胞因子PF-4、SELP、VEGF—A、CXCL16、sTNF—RⅡ和VCAM-1在OIR模型和正常对照小鼠的眼球组织中的表达存在显著差异，提示OIR状态下血小板系统处于激活状态，而促炎因子表达下调。PF-4可能成为针对RNV的VEGF非依赖型治疗策略的新靶点。

妊娠期糖尿病新型候选生物标志物的筛选效果

目的分析新型候选生物标志物在妊娠期糖尿病(GDM)中的表达水平,并筛选生物标志物,以期为临床早期准确诊断GDM提供指导。方法将77例GDM孕妇归为GDM组,83例正常健康孕妇归为正常组,应用酶联免疫吸附法测定血清标志物蛋白表达水平,应用qRT-PCR法检测人绒毛膜滋养细胞(HTR-8/SVneo)表达水平,比较两组及GDM组不同妊娠时期的血清生物标志物及HTR-8/SVneo表达水平。结果GDM组RAB3B、HNRNPAB、CIRBP、EPPKI、PTEN、Hcy表达水平高于正常组,p-PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR表达水平低于正常组(P<0.05);随着妊娠周期不断延长,RAB3B、HNRNPAB、CIRBP、EPPKI、PTEN、Hcy表达水平呈升高趋势,p-PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR表达水平呈下降趋势(P<0.05)。结论RAB3B、HNRNPAB、CIRBP、EPPKI、PTEN及p-PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR、Hcy可作为GDM新型候选生物标志物,其应用价值有待临床深入研究。

Clinical significance of MDM2 as a tumor biomarker

MDM2 (the product of murine double minute 2 gene) is one of the most important negative regulators of p53,which can binds to p53 and initiates ubiquitin-mediated degradation.Besides,MDM2 also controls the activity of several cell-cycle regulators,e.g.pRB,p21,E2F1,independently of p53.The important role of MDM2 in cell-cycle regulation indicates it to be a point of interest in cancer research.In recent years,studies revealed that MDM2 participated in the genesis and development of human tumors.The expression levels and activity of MDM2 was associated with the invasion,metastasis,prognosis and more practical,chemosensitivity.MDM2 is becoming a novel biomarker in cancer prognosis and chemosensitivity prediction.