HBV-DNA测定标本处理的探讨

目的:观察不同标本处理方法对实时荧光定量聚合酶链反应(PCR-荧光探针法)检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA结果的影响。方法:收集本院50例经临床确诊门诊病人血清及产科住院的HBV阳性的乳汁作为检测标本,采用不同处理方法(煮沸法、核酸纯化法、Chelex100树脂法)平行处理后,用PCR-荧光探针法测定HBV-DNA的含量,分析结果。结果:50例乙肝确诊患者标本采用煮沸法、核酸纯化法、Chelex100树脂法处理后定量PCR检测阳性结果分别为24例(48.0%)、50例(100.0%)、26例(52.0%);核酸纯化法处理标本定量检测结果均大于102copy/μL,与其他两种方法定量结果比较,差异具有显著性。结论:核酸纯化法提取标本进行FQ-PCR定量检测HBV-DNA,可保证标本的提取质量,对乙型肝炎的诊治具有重要意义。

标本预处理对HCV-RNA检测结果的影响

目的研究血标本离体后的预处理及保存方式对HCV-RNA检测结果的影响。方法取20份丙肝患者未分离及已分离的血浆标本,于不同时间及不同温度保存后,采用RT-PCR法,检测标本中HCV-RNA含量。结果抽血后1h内立即分离血浆的标本,分别保存于室温、4℃及-20℃,并于1 d及1周后分别检测HCV-RNA含量,结果取对数后进行比较,差异无统计学意义。抽血后不分离血浆的标本,保存于4℃,于24 h后进行检测,与已分离血浆,同样保存条件的标本检测结果取对数进行比较,结果差异有统计学意义。结论进行HCV-RNA检测时,为保证检测结果准确,血标本离体后应立即分离血清或血浆进行保存。