DNA分子标记技术在口腔微生物研究中的应用

传统的微生物培养及鉴定方法,很难全面反映口腔微生物群落的状态及其与宿主之间的关系。近年来,随着分子生物学的发展,某些DNA分子标记技术被广泛应用于口腔微生物领域,为发现新菌种、相关口腔疾病发病机制的探讨及临床病例的快速诊断等方面开辟了新的途径。本文主要对相关DNA分子标记技术的基本原理及在口腔微生物领域的应用现状进行综述,比较各种方法的优势与不足,以期为不同的研究方向提供经验。

邻近标记技术在膜蛋白相互作用中的研究进展

膜蛋白是细胞多种生命活动的主要承担者,膜蛋白之间的相互作用参与调控细胞间的接触与信号传递,并与细胞的分化、成熟息息相关。因此,开发多种深入解析膜蛋白之间相互作用的方法具有重要的理论与现实意义。除了传统的免疫共沉淀方法之外,新开发的邻近标记技术已经逐渐成为了研究膜蛋白相互作用的重要手段。邻近标记技术主要利用生物工具酶标记与诱饵蛋白相互作用的邻近蛋白,并通过流式细胞术、质谱以及共聚焦显微成像技术等方法检测膜蛋白之间的相互作用。本文着重介绍了近些年来新开发的用于研究膜蛋白相互作用的多种邻近标记技术,并展望了该类技术在膜蛋白相互作用领域未来的发展前景。

多延迟动脉自旋标记技术在动脉重度狭窄或闭塞患者脑灌注评估中的价值

目的探讨多延迟动脉自旋标记(muti-delayed arterial spin labeling,mASL)技术评估单侧颈内动脉或大脑中动脉重度狭窄、闭塞患者脑灌注改变的价值。材料与方法前瞻性纳入我院神经内科临床诊断为单侧颈内动脉或大脑中动脉重度狭窄、闭塞的34例患者单延迟准连续式动脉自旋标记(pseudo continuous arterial spin labeling,p CASL)及mASL灌注图像进行动脉狭窄侧异常灌注区域评估,应用Kappa一致性检验评估两位观察者判断结果的一致性。分别在异常灌注区域手动勾画感兴趣区并获得灌注参数值,包括由pCASL灌注图像获得狭窄侧脑血流量(cerebral blood flow,CBF2020ms),mASL灌注图像获取狭窄侧校正后脑血流量(corrected cerebral blood flow,cCBF)、动脉到达时间(arterial transit time,ATT)、动脉脑血容量(artery cerebral blood volume,aCBV)及对侧动脉到达时间(relative arterial transit time,rATT)。利用配对样本t检验比较CBF2020ms及cCBF差异,独立样本t检验比较患者动脉狭窄侧ATT及r ATT差异。结果根据pCASL及mASL的结果显示,在34例患者中,10例灌注表现一致(8例均为低灌注,2例均为低灌注伴局部高信号),24例灌注表现不完全一致(其中3例p CASL表现为正常灌注,mASL表现为低灌注;21例pCASL表现为低灌注伴局部高信号,mASL表现为低灌注)。两位观察者间具有高度的一致性(Kappa系数=0.788,P<0.001)。mASL示动脉狭窄侧ATT值显著高于对侧(P<0.001)。pCASL及mASL均表现为低灌注的患者中,CBF2020ms值低于cCBF值(P=0.173)。pCASL及mASL均表现低灌注伴局部高信号的患者中,ATT延长,aCBV增加。pCASL表现为低灌注伴局部高信号且m ASL表现为低灌注的患者中,CBF2020ms显著高于cCBF(P<0.001)。pCASL表现为正常灌注且mASL表现为低灌注的患者中,ATT延长但a CBV保持正常。结论通过多延迟动脉自旋标记技术获得的多参数cCBF、ATT及aCBV能够更敏感、准确地评估单侧颈内动脉或大脑中动脉重度狭窄、闭塞患者脑组织灌注的变化,为临床诊治提供指导性意见。

磁共振动脉自旋标记技术在评估脑血管侧支循环中的研究进展

脑血管疾病指的是因多种脑血管问题导致的脑部损伤,包括脑出血、脑梗死、脑栓塞、动静脉畸形等。此外,颅内动脉炎是导致年轻女性出现脑血管疾病的重要原因[1]。一旦发生脑血管疾病会对中枢神经系统造成很大损害,引起生活质量下降,甚至致死、致残。脑血管疾病的主要症状为脑出血和脑缺血引发的一系列神经功能障碍,如头痛、失语和偏瘫等,主要病因是血管破裂和堵塞,但其背后的脑侧支循环与症状的严重程度密切相关,决定着治疗方式和临床结局,这就是脑血管的代偿与适应机制[2]。

基于CiteSpace的SCoT分子标记技术研究热点和前沿分析

采用文献计量学可视化分析的方法分析SCoT分子标记技术研究进程与现状,揭示研究热点及演化过程。检索中国知网(CNKI)和Web of Science(WOS)核心合集数据库中2000—2022年相关文献,通过Citespace 6.2.R2软件分析文献作者、机构、关键词、引文情况。结果表明,CNKI检索出297篇文献,WOS检索出319篇文献,SCoT分子标记技术研究发文量呈逐年增加趋势。中文文献大都呈散点状,没有形成复杂的网络合作关系,发文量以广西大学何新华教授居多,其次是陕西理工大学的张羽教授。英文文献发文量以Islamic Azad University的Etminan Alireza教授居多,但没有形成复杂的网络合作关系;而来自四川农业大学的张宇(Zhang Yu)教授与其他团队交流紧密,形成较大的研究团队和合作网络。高频关键词有种质资源、亲缘关系、体系优化、genetic diversity(遗传多样性)、scot(start codon targeted)(靶向起始密码子)、polymorphism(多态性)等,近年频率突现关键词为指纹图谱、猕猴桃、葛根、variability(可变性)、gene flow(基因流)、genotype(基因型)、traits(特性)等。英文分析高被引文章大都为遗传多样性分析文献,引文关键词为callus(愈伤组织)、spectral fingerprinting(光谱指纹)。综上所述,中文和英文文献对SCoT分子标记技术研究的关键词相似,前沿热点稍有不同,作者机构间应继续加强合作,促进同专业的学术交流,共同推动SCoT分子标记技术的应用发展。

邻近标记技术在弓形虫蛋白质组学研究中的应用进展

弓形虫编码数量众多的分泌蛋白,储存在微线体、棒状体和致密颗粒等虫体特有的细胞器中,于虫体入侵宿主细胞前后分泌到不同部位,并在虫体的感染、寄生和致病过程中发挥重要作用,对这些分泌蛋白的鉴定和功能研究是弓形虫致病机制研究中的热点和难点。传统的蛋白质组学技术在弓形虫亚细胞器的分离和组分鉴定上存在样品纯化困难和蛋白质组学信息覆盖率低等不足,且该技术在检测瞬时的或较弱的蛋白质相互作用时灵敏性较低。近年来,快速发展的邻近标记技术(PL)克服了传统技术的局限性。PL是将具有特定催化活性的工具酶与诱饵蛋白进行融合,进而添加生物素或生物素苯酚对诱饵蛋白邻近的靶蛋白进行生物素酰化标记的一门技术。该技术整合了酶促反应效率高的优点,可将特定空间内的蛋白进行高效标记,并可检测较弱的蛋白质相互作用,近年来在生物学研究中被广泛使用。本文对基于生物素连接酶(BirA)和抗坏血酸过氧化物酶(APEX)催化的PL在弓形虫蛋白质组学研究中的应用进行阐述,介绍2种标记方法在弓形虫分泌蛋白的挖掘和蛋白质相互作用研究中的贡献,为弓形虫致病机制的研究和弓形虫病的防控提供参考。

DNA分子标记技术及其在羊育种中的应用研究

羊是重要的经济动物,加快羊育种进程、促进羊产业的快速发展对整个畜牧业的发展至关重要。相比传统育种方法,DNA分子标记技术具有标记数量多、多态性高、遗传稳定等优势,其应用范围越来越广泛。文章介绍了DNA分子标记技术的发展情况,并概述其在羊生长性能、产肉性能和繁殖性能等方面选育中的应用,以期为我国羊育种改良研究及DNA分子标记技术在羊育种方面的应用提供一定参考。

基于铷元素标记技术分析多异瓢虫在甘草带与棉田间的迁移范围

【目的】研究铷元素标记技术分析多异瓢虫在甘草带与邻近棉田间的迁移范围,丰富铷(Rb)元素标记技术在昆虫迁移扩散的作用。【方法】在室内利用铷元素标记技术检测多异瓢虫体内的铷元素滞留期;在田间利用铷元素标记技术,研究多异瓢虫从甘草带向棉田的迁移范围。【结果】铷元素在多异瓢虫成虫体内滞留期为15 d左右;多异瓢虫成虫和幼虫从甘草向棉田的转移范围有所不同;成虫的铷元素检出率0~15 m>30~50 m>15~30 m>50~100 m。【结论】铷元素标记技术可以在田间有效的跟踪多异瓢虫成虫和幼虫的迁移范围。

分子标记技术在农作物品种鉴定中的应用

分子标记技术在农作物品种鉴定中发挥越来越重要的作用。主要介绍了分子标记技术发展历程,常见的分子标记原理、特点及在农作物品种鉴定中的应用,并对其今后在农作物品种鉴定中的应用进行了展望。

大麻哈鱼苗耳石标记技术研究

为提高大麻哈鱼标记质量,减少对鱼苗的伤害,降低标记成本,本团队研究并实践了一种方法简单、全标记、无伤害的大麻哈鱼标记技术,即通过控制水温变化,可以使大麻哈鱼耳石部位产生轮纹,根据2种水温作用时间的不同,形成的纹距不同,可以产生不同标记轮,从而达到精确判定该标记鱼苗的归属。连续三年对放流大麻哈鱼苗进行不同号段的耳石温度标记,每年随机抽取标记鱼苗进行采样检测,结果表明放流大麻哈鱼耳石温度标记率为100%。

磁共振动脉自旋标记技术诊断非血管性和血管性轻度认知障碍的临床应用价值

目的探讨磁共振动脉自旋标记(ASL)技术诊断非血管性和血管性轻度认知障碍的临床应用价值。方法从驻马店市第二人民医院神经内科随机选取23例非血管性轻度认知障碍患者(A组)、23例血管性轻度认知障碍患者(B组)以及23例健康的老年人(对照组),选择时间为2019年9月至2021年9月,运用ASL技术对上述3组人员的认知功能脑区域的脑血流量进行测量,探讨ASL技术对非血管性轻度认知障碍和血管性轻度认知障碍的临床诊断价值。结果相较于对照组,A组双侧楔前叶、扣带回等的脑血流灌注下降,双侧额叶、双侧海马等的脑血流灌注升高(P<0.05);相较于对照组,B组双侧的楔前叶、丘脑等的脑血流灌注下降,双侧额叶、扣带回的脑血流灌注升高(P<0.05);相较于A组,B组右侧颞叶、双侧放射冠的脑血流灌注降低,左侧颞叶、双侧扣带回升高(P<0.05)。结论非血管性和血管性轻度认知障碍脑功能区域脑血流灌注特点不同,通过磁共振动脉自旋标记技术可有效鉴别两者差异,为临床早期诊断提供了有效的数据支持,值得推广。

三维动脉自旋标记技术在急性缺血性脑血管病患者中的临床应用价值

目的探究三维动脉自旋标记(3D-ASL)技术在急性缺血性脑血管病(ICVD)患者中的临床应用价值。方法选择2020年1月至2021年12月期间于医院治疗的78例ICVD患者并作为ICVD组;同时选取同期在医院体检的健康者70名作为对照组。两组均进行颅脑磁共振血管成像(MRA)、3D-ASL检查,分析两组3D-ASL脑血流灌注情况,计算3D-ASL、颅脑MRA诊断符合率。结果ICVD组灌注减低占比高于对照组,相对脑血流量(rCBF)比值低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);3D-ASL诊断ICVD符合率及小面积脑梗死符合率均高于颅脑MRA,差异有统计学意义(P<0.05);3D-ASL与颅脑MRA诊断大面积脑梗死符合率、短暂性脑缺血发作(TIA)符合率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论3D-ASL技术有利于为ICVD患者提供可控的脑血流灌注信息,提高ICVD诊断符合率,为ICVD的临床诊断及治疗、预后判断提供指导。

遗传标记技术及其在林木遗传育种中的应用分析

遗传标记技术属于一种全新的技术,这项技术的问世为包括林木在内的各种植物遗传育种研究都提供了全新的方式和理念,最关键的是缩短了育种的周期,实现了育种效率全面提高等,而此项技术在长期应用中也展现出了非常广阔的发展前景。文章也详细论述了不同遗传标记技术的原理和实际特点,阐述了遗传标记技术在林木遗传育种中的应用研究进展,为林木遗传学和育种学的研究提供有效参考。

分子标记技术在农作物种子检测中的应用

在对农作物种子进行检测过程中,借助分子标记技术可以促使种子检测工作质量得到提升。介绍了分子标记技术以及分子标记技术的发展历程,梳理了应用成本较高、工作人员存在不规范操作的情况、应用的技术与种子类型不匹配等分子标记技术应用中存在的问题;从种子真实性的检测、种子纯度的检测2个方面,概述了分子标记在农作物种子检测中的具体应用,提出了降低分子标记技术应用成本、充分调查操作环境制定标记方式对照表等促进分子标记技术推广应用的建议。

分子标记技术在旱稻育种中靶向的应用

随着人口的增长和资源的有限性,如何提高旱稻的产量和适应性成为迫切的问题。分子标记技术作为一种高效、准确的遗传分析工具,为旱稻育种带来了新的机遇和挑战。本文旨在探讨分子标记技术在旱稻育种中的靶向应用,重点关注抗病性状、逆境适应性和品质特性的筛选与改良。通过深入研究和应用分子标记技术,有望推动旱稻育种的快速进展,为实现粮食安全和可持续农业发展做出贡献。

分子标记技术及其在植物遗传育种中的应用

本文对遗传标记技术的发展历程作了简要的回顾。概述了目前常用的RFLP和RAPD等分子标记技术的基本原理和特点,及其在构建分子遗传图谱、品种间遗传关系分析、进行基因定位和测定遗传距离等遗传育种中的应用。

AFLP分子标记技术在茶树遗传育种研究中的应用

AFLP(Amplified Fragment Length Ploymorphism)是一种实用的,有效的DNA分子标记技术。与RFLP、RAPD相比,AFLP具有在一次实验中可同时观察到大量的限制性片段的优点。本文阐述了AFLP的基本原理,评述了AFLP在茶树遗传育种研究中的应用前景。

SSR标记技术在玉米杂交种种子纯度测定中的应用

以 2 1份玉米骨干自交系及其组配的 13个杂交种为材料 ,进行 SSR标记分析。从 2 2 0对引物中 ,筛选出扩增带型稳定、多态性丰富的 5 8对引物 ;杂交种的 SSR图谱基本上表现为双亲互补带型。利用两个或三个引物组合构建的SSR图谱 ,通过统计测验可以将 13个杂交种区分。实验表明 ,应用 SSR标记技术结合单籽粒 DNA快速提取方法 ,可以快捷。

SCAR分子标记技术在香菇菌株鉴定上的应用研究

为了建立一套基于DNA分子标记技术快速鉴定香菇菌株的有效方法,本研究首先通过对生产上常用的14个香菇菌株进行RAPD多态性分析,从香菇菌株162中扩增获得了一个片段长为1166bp的特异RAPD标记XG1166,随之利用分子克隆技术将该特异RAPD标记成功转化为稳定的SCAR标记。用同样的方法,本研究又从另一香菇菌株申香10号中获得了一段长度为347bp的特异SCAR标记SX347。试验结果表明,利用本研究获得的香菇菌株162和申香10号的特异SCAR标记,能在一天时间内准确鉴定出香菇菌株162或申香10号菌株的真伪。由此可见,SCAR分子标记是一种快速、稳定、准确鉴定香菇菌株的新方法, 可应用于食用菌种质资源保护利用、品种分类与鉴定和假种辨别。

ISSR标记技术及其在作物遗传育种中的应用

ISSR(inter-simplesequencerepeat)标记技术是在SSR基础上发展起来的一项新的标记技术,由于其引物设计比SSR简单,不需要知道SSR两端的碱基序列,多态性高,重复性好,能够提供更多的信息,已在多种动植物的种质鉴定、遗传作图、基因定位、遗传多样性等研究方面得到应用。本文对ISSR技术的特点、实验操作及其在作物遗传育种领域的应用进行了概述。