羟基分子标记示踪速度测量中的强振动干扰抑制

针对在发动机实验环境中羟基分子标记示踪速度测量技术受到的强振动干扰问题,通过实验研究分析了标记激光与不同流场作用时产生的辐射光谱特性,设计了在实验中同时拍摄标记基准图像和移动图像的振动干扰抑制方法。对于一般流场,在实验中实时拍摄标记激光瑞利散射作为标记基准图像,而对于含有煤油大分子碳氢燃料的流场甚至是CH_4燃烧场,用标记激光诱导燃料在OH荧光辐射波段的辐射光作为标记基准图像。在超燃发动机的速度测量应用尝试表明,两种方案均可以达到抑制振动的目的。在相对干净的流场区域,前者得到的标记激光图像会受到壁面散射等干扰,基准位置提取不确定度约为0.06mm。在流场中未燃燃料含量比较丰富的区域,后者能够得到清晰的标记基准图像,基准位置提取不确定度可以降至0.03mm,与采用平均方法得到的基准位置提取不确定度相当。

碘标记示踪沉淀法研究神经生长因子的药代动力学

12 5 I-神经生长因子 (nerve growth factor,NGF)用氯胺 T法制备 ,采用同位素示踪结合三氯醋酸(TCA )沉淀法 ,测定小鼠血浆 NGF的浓度 ,并研究其在体内的分布与排泄。结果表明 ,静注 1 2 5 I- NGF,小鼠体内代谢符合二房室分布模型 ;肌注 1 2 5 I- NGF,小鼠体内代谢符合一房室分布模型。静注 1 2 5 I- NGF2 5 μg.kg- 1 ,测得消除半衰期 (t1 / 2 β)为 4.431h。肌注 1 2 5 I- N GF 75、2 5、10、3.3μg.kg- 1 ,测得消除半衰期 (t1 / 2 β)分别为 2 .135、2 .70 3、3.12 7、4.2 12 h,平均达峰时间 (tmax)为 0 .5 83h。测得 1 2 5 I- N GF平均血浆清除率 (CL)为 0 .2 77L.h- 1 .kg- 1 ,表观分布容积 (Vd)为 1.0 39L.kg- 1 ,体内平均滞留时间 (MRT)为 3.2 38h。1 2 5 I- NGF在组织器官内的分布速率以颈上神经节分布最快 ,大脑、小脑、脊髓分布极低。1 2 5 I- NGF主要经尿液和粪便排泄 ,注射后 72 h内 ,小鼠粪尿中放射性总排泄量为 80 .36 % ,其中尿排泄量占 73.87%

分子标记示踪用于氧气/空气流场速度测量

利用受激喇曼激发加激光诱导电子荧光法（ＲＥＬＩＥＦ）实现对氧气和空气中氧分子的标记示踪，用于氧气和空气流场的速度的测量． 实验装置测量氧气喷流的瞬时速度为４５±５ｍ ／ｓ，改进后精度可以优于１％ ，并适合几个马赫的高速流场测量．

同位素标记示踪法测定G蛋白竞争性抑制肽-27在动物体内的分布与排泄

目的:利用同位素标记示踪法研究G蛋白竞争性抑制肽(GCIP)-27在动物体内的分布和排泄。方法:125I-GCIP采用Iodogen法标记,按组织器官直接测定法和TCA沉淀法进行体内分布实验,以每毫克组织器官的125I-GCIP放射性计数表示GCIP在小鼠体内的分布;以不同时间段大鼠胆汁、尿、粪及小鼠的尿、粪放射性总排泄量占给药量放射性的百分比表示其在体内的排泄。结果:GCIP-27在小鼠体内分布广泛,其中肾、血管、胃、肺、心、小肠等组织分布较高,肌肉、脂肪等组织相对较低,脑最低。大鼠72h粪、尿、胆汁原形药物排泄量分别为给药量的26.13%,0.95%和4.12%。小鼠72h粪、尿原形药物排泄量分别为给药量的27.92%,0.84%。结论:GCIP-27在小鼠体内广泛分布,主要经尿液排泄,肾为主要排泄器官。

基于激光诊断的分子标记示踪测速技术研究进展

随着飞行器速度的不断提升,高超声速气流流动理论、高超声速燃烧流场分析、飞行器空气动力学特性等研究的重要性日益凸显。目前常规的速度测量方法在面对高超声速复杂流场环境时受到的限制越来越明显,需要研究新的技术以满足流场内精确速度测量需求。分子标记示踪测速技术因其非侵入、无跟随性限制等优势正在成为研究热点。本文阐述了纳秒激光分子标记示踪测速技术、飞秒激光分子标记示踪测速技术的基本原理、主要参数和工作特点,分析了这些技术在测量中所面对的挑战,并对其在科学及工程领域中的应用前景展开了讨论,为推动高超声速复杂流场环境速度测量技术发展提供借鉴。

三种示踪技术标记人脂肪组织来源干细胞的对照研究

目的比较3种不同的荧光示踪技术标记人脂肪组织来源干细胞(ASCs)的效率,以寻找脂肪组织来源干细胞最佳的标记示踪方法。方法吸脂术获取人脂肪组织,胶原酶消化法后体外贴壁法培养,获得的长梭形细胞经鉴定为脂肪组织来源干细胞。分别使用5μl DiI,10μg/ml的脱氧尿苷BrdU及50 MOI的携带绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒进行标记,荧光显微镜观察不同时间点及不同代数的脂肪干细胞的标记效率及形态变化。结果成功分离获得ASCs,经鉴定其表达间充质干细胞表面标志,并能被成功实现成脂、成骨及成软骨的诱导分化。DiI标记ASCs 48 h后,荧光显微镜下观察可见100%细胞浆呈现红色荧光,胞核未染,保持了良好的正常形态。但细胞传代后荧光衰减迅速。10μg/ml BrdU标记ASCs 48 h后,90%的胞核呈绿色荧光,传代后胞核荧光逐渐衰减。携带GFP重组腺病毒转染ASCs 24 h后胞浆内即可见绿色荧光,5 d后90%以上的细胞呈现绿色荧光。反复传代后未见明显的荧光衰减。结论 DiI,BrdU及携带GFP的重组腺病毒均能有效的标记人脂肪组织来源干细胞。DiI示踪技术为细胞膜标记,BrdU为细胞核标记,两项技术均操作简单,但传代后衰减迅速,适合于短期标记示踪。携带GFP的腺病毒标记方法较为复杂,但反复传代后仍不衰减,适合于长期的标记示踪观察。

同位素标记示踪法测定小鼠G蛋白抑制肽GCIP-27血药浓度

目的:考察小鼠静脉注射G蛋白抑制肽GCIP-27后药动学情况。方法:125I-GCIP采用氯甘脲法标记,血浆中GCIP的浓度采用同位素示踪法结合三氯醋酸(TCA)沉淀法或低分子量SDS-PAGE电泳法测定。结果:GCIP-27在小鼠体内按一级动力学代谢,并呈三室开放模型;静脉注射125I-GCIP90μg.kg-1后,电泳法和酸沉法测得t1/2α、t1/2β、t1/2γ分别为0.009、0.245、2.054h和0.025、0.306、2.323h;tmax均为0.0333h,平均血浆清除率分别为0.295、0.322L.h-1.kg-1,表观分布容积分别为0.559、1.29L.kg-1,体内平均滞留时间分别为2.353、2.515h。结论:GCIP-27在小鼠体内血药浓度下降快,分布快,自中央室迅速向周边室分布;消除、代谢缓慢。本研究结果可为GCIP-27的剂型设计和药效学研究提供重要依据。

CM-Dil标记示踪间充质干细胞可行性的体外试验

目的探讨氯苯甲酰氨-1,1′双十八烷基-3,3′,3′,3′-四甲基吲哚羰基花青高氯酸盐(CM-Dil)体外标记骨髓间充质干细胞的可行性。方法分离培养并鉴定大鼠骨髓间充质干细胞,分别用1、2、4μg/mL的CM-Dil标记间充质干细胞,观察标记后15min、24h、48h、72h、传5代、传8代的标记率;用流式细胞仪检测标记前后细胞周期的变化;用细胞计数Kit-8(CCK8)法检测细胞增殖能力。结果采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞CD44、CD29表达阳性,CD34、CD45表达阴性。1、2、4μg/mL CM-Dil标记15min后标记率分别为(31.60±1.25)%、(88.73±1.79)%、(96.89±1.31)%,差异有统计学意义(F=1 757.21,P=0.000);4组间生长曲线趋势大致相同,且4组间G1期、S期及G2/M期细胞百分比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 4μg/mL CM-Dil细胞标记率高,无细胞毒性,可作为一种高效而稳定的体外标记间充质干细胞的方法。

间充质干细胞标记示踪方法研究进展

间充质干细胞（MSCs）具有很强的自我更新能力和多向分化潜能，现已成为组织修复的理想种子细胞和基因治疗的靶细胞。但MSCs移植入体内的标记和示踪是当今研究的热点和难点问题。目前常用的标记示踪技术按不同的标记分类有：荧光染料标记，分子细胞标记，影像学成像技术标记等。就这些标记示踪方法的优缺点加以综述。

稀土元素作为示踪标记在海洋沉积动力学中应用前景的初步探讨

根据对长江等5条河流和东海陆架区总计146个沉积物样品的稀土元素和粒度分析结果,借助统计学方法,讨论了河流和东海近岸沉积物稀土元素分布格局的形成因素及其对沉积动力作用的响应,结果表明,各河流沉积物在稀土元素总量和轻重稀土分异等参数上有差异;在长江口沉积物中稀土元素在小于2和2~31μm粒级中较富集,全岩稀土元素含量受物质组成占优的粒级控制;在东海陆架研究区稀土元素含量由岸向海有减小的趋势,在河口附近相对较高,轻重稀土分异自28°N向南有增大的趋势。

长江粘土矿物示踪标记稳定性的初步研究

选择物质来源相对单一、区域较广的浙江沿岸东海内陆架区 ,以 4种主要粘土矿物(伊利石、蒙皂石、高岭石、绿泥石 )为研究对象 ,以探讨长江粘土矿物作为示踪标记的稳定性问题。研究区 5组沉积物样品中粘土矿物的X射线衍射实验及含量分析结果表明 ,伊利石、蒙皂石和高岭石的相对含量较稳定 ,具有作为长江物源示踪标记的价值 ,而各区域的绿泥石含量之间不具有显著的统计相似性。现有资料还不能完全解释长江口及邻近东海内陆架区内粘土矿物组合的相对稳定状态 ,今后应对絮凝作用、沉积分异作用。

应用划痕标记染料示踪技术检测草苁蓉甲醇提取物对大鼠肝癌细胞功能的影响

目的：通过划痕标记染料示踪实验,初步筛选出对大鼠肝癌细胞G JIC功能有较强恢复和促进作用的草苁蓉甲醇提取物药物终浓度。方法：大鼠肝癌细胞随机分为5个组：分别为1个对照组、4个实验组。4个实验组加入草苁蓉甲醇提取物药物终浓度分别达到0.25g/L、0.5g/L、0.75g/L、1.0g/L。结果：大鼠肝癌细胞经草苁蓉甲醇提取物（BR）0.75g/L、1.0g/L作用48h后的细胞中,荧光染料出现在划痕的附近细胞内至划痕以外的5~6列甚至7~8列细胞内,半定量为（）,形成连片状的荧光染色,荧光亮度明显增加,细胞间染料传输功能显著增强。结论：通过划痕标记染料示踪实验,初步筛选出草苁蓉甲醇提取物0.75、1.0g/L对细胞G JIC功能有较强恢复和促进作用。

荧光染料CFSE差异浓度标记活细胞体内示踪方法

背景:利用荧光染料标记活细胞体内示踪的方法较多,但是应用荧光染料浓度差异实现不同细胞体内示踪的方法目前仍不成熟。目的:观察不同浓度荧光活性染料CFSE标记的小鼠脾细胞体内示踪情况,建立稳定的单染料差异浓度标记活细胞的体内示踪方法。方法:取C57BL/6J及BALB/c小鼠脾脏制备脾细胞单细胞悬液,分别用不同浓度CFSE染色后制备1∶1混合细胞悬液;锥虫蓝染色鉴定细胞活性;将染色的混合细胞输注BALB/c小鼠后不同时间点,流式细胞仪检测小鼠外周血两种荧光细胞的比例。结果与结论:CFSE标记的小鼠脾细胞活力良好,荧光显微镜下见全部细胞标记后均发绿色荧光,形态正常,CFSE标记阳性率为95%。CFSE染色时,在浓度相差20倍时流式直方图才显示为两个完全独立的峰,即CFSE低浓度用0.3μmol/L高浓度用6μmol/L。异基因的C57BL/6J脾细胞在输注1d后就快速消失,而同基因BALB/c脾细胞能够在BALB/c小鼠外周血中长期存在,但是两种细胞荧光强度均未见降低,说明荧光染料CFSE差异浓度标记活细胞进行体内示踪是一种稳定的示踪方法。

用^(15)N示踪标记法测定人工诱发黄瓜根瘤固氮酶活性

报道了用１５Ｎ示踪标记法对人工诱发黄瓜根瘤固氮酶活性的测定结果。将长有人工诱发根瘤的黄瓜根系暴露在１５Ｎ２的气体中，部分根系浸在无氮培养液内，标记４８ｈ后，质谱分析测定结瘤黄瓜根系中１５Ｎ的丰度为０．４３１原子％１５Ｎ，对照样品为０．３６９原子％１５Ｎ，对１５Ｎ示踪标记结果进行了统计学ｔ检验，ｔ＝３．１５＞ｔ０．０１＝２．８１９，表明黄瓜根系通过根瘤内细菌固氮作用所提供的氮与对照相比达９９．９％极显著性水平，同时用乙炔还原法测定黄瓜离体根瘤的乙炔还原率每克鲜重为（０．２９９±０．０７６）μｍｏｌ／ｈＣ２Ｈ４。

分子标记速度测量技术及应用研究进展

分子标记示踪技术是用于流场显示和速度测量的一类激光诊断技术。通过分析目前常用的分子标记方法、分子标记显示方法以及数据处理方法及其研究进展,对分子标记示踪测量技术进行了较为全面的介绍;列举了OH和NO分子标记示踪技术在超声速流动、边界层流动及发动机尾流的测量应用实例,并对实际应用中反应流场背景干扰、测量环境的强振动和内流场测量中光学窗口的影响进行了讨论和分析。

利用基因示踪分子标记对水稻淀粉合成基因进行功能分析

细粒粘连淀粉合成酶、淀粉分支酶1和淀粉分支酶3是关系到水稻胚乳中淀粉生物合成的3种主要酶。为了鉴定籼稻品种93-11和粳稻品种日本晴基因组数据库中的同源区域，已经使用了编码相应淀粉分支酶1和淀粉分支酶3的Sbe1、Sbe3基因的通用序列。使用序列多样性来开发出基因示踪标记，以便区分这两个位点Sbe1和Sbe3中的籼稻等位基因和粳稻等位基因。

高生物诱导活性复合人工骨整复骨缺损的四环素示踪观察

采用四环素标记示踪法，对ＨＡｂＢＭＰＣｏ和ＨＡＣｏ两种不同复合人工骨材料植入整复节段性骨缺损术后新骨生成的情况进行了示踪对比观察。结果表明：ＨＡｂＢＭＰＣｏ复合人工骨植术后一周界面即出现一条较明显的荧光带，提示术后一周已有新骨生成。随时间推移，缺损区荧光现象愈显著，且直接包绕ＨＡ微粒，显示出ＨＡｂＢＭＰＣｏ复合人工骨良好的骨诱导作用和组织相容性。而同期ＨＡＣｏ复合人工骨组荧光现象均不如前者。

放射性同位素示踪法和酶联免疫法研究重组人碱性成纤维细胞生长因子在家兔体内的药代动力学

目的比较用放射性同位素示踪法和酶联免疫法两种方法研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)在家兔体内的药代动力学结果的异同。方法用放射性同位素125I标记示踪法和酶联免疫法(ELISA)两种方法测定rhbFGF在家兔血清中的经时浓度。结果家兔耳缘静脉注射4,2,1μg/kgrhbFGF后,用放射性同位素125I标记示踪法测得的t1/2分别为9884,7515,7157min,Cltot约5min;酶联免疫法测得的t1/2分别为1718,1624,2392min,Cltot约10min;剂量与AUC皆有良好的线性关系(r同位素=09999;rElisa=09982)。两种方法所得的结果有相关性,同时也存在较大差异,rhbFGF在家兔体内的消除比125IrhbFGF快。结论放射性标记的药物在动物体内的处置不等同于非标记药物。