大鼠海马CA1区锥体神经元树突分支的生后发育

目的 研究大鼠海马CA1区锥体神经元树突分支的生后发育。 方法 应用biocytin细胞内染色方法。 结果 CA1锥体神经元的树突在生后第 2～ 3周发育最快。顶树突的分支和长度在生后 2 1d发育成熟 ;而基树突要到生后 5 6～ 70d才发育成熟。基树突的发育较顶树突慢。 结论 细胞内染色技术可更完整地显示神经元的形态。海马CA1区锥体神经元在出生后继续发育 ,且基树突的发育较顶树突慢。

过表达原钙黏蛋白7对小鼠皮层神经元突起的影响

目的探讨过表达原钙黏蛋白7(Pcdh7)基因对小鼠原代皮层神经元突起发育的影响。方法体外原代培养C57/B6小鼠胚胎18.5 d的大脑皮层神经元,随机分为空白对照组、实验对照组(空载组)和过表达原钙黏蛋白7基因组(过表达组)。运用免疫细胞化学术检测神经元突起的标记物β-Tubulin Ⅲ的表达来反映各组培养的神经元轴突的长度和初级树突分支数,同时,采用Western blot检测各组神经元Pcdh7及磷酸化丝切蛋白的表达水平。结果过表达Pcdh7基因后,其皮层神经元轴突长度[(247.4±99.38)μm]显著高于对照组和实验对照组[分别为(179.4±97.91)μm和(172.1±65.20)μm],差异有统计学意义(P<0.01),但其初级树突分支数(2.74±1.302)却明显低于对照组和空载组(分别为3.726±0.890和3.793±1.196)(P<0.01);而Western blot结果显示,当原代培养的神经元过表达Pcdh7基因时,与对照组相比,其磷酸化丝切蛋白的表达水平明显降低(P<0.01)。结论在原代培养的小鼠皮层神经元中过表达Pcdh7基因,在致其神经元轴突过度生长的同时,并抑制其树突产生分支。其机制可能与下调磷酸化丝切蛋白的表达水平相关。

Pcdh11x蛋白对体外培养皮层神经元树突发育的影响

目的探讨Pcdh11x蛋白对神经元树突分支的影响。方法通过增加与敲低Pcdh11x的表达水平,评价Pcdh11x蛋白对神经元树突的影响。应用SPSS13.0软件使用单因素方差分析的方法对树突分支数量进行统计分析。结果培养3 d时,与对照质粒组(2.60±0.22)相比,pcdh11x-sh RNA转染组可明显增加一级(5.80±0.39)和二级(9.80±0.81)树突的数目,而pCAG-Pcdh11x-GFP转染组可减少一级(1.40±0.16)和二级树突(2.90±0.46)的数目。同时发现,过表达Pcdh11x时则会减少树突点的数目(3.11±0.51),而敲低Pcdh11x会增加树突点的数目(14.44±0.56)。通过Sholl分析发现过表达Pcdh11x时可减少树突终末分支的数目,而敲低Pcdh11x时可增加树突终末分支的数目。培养六天时,亦有相似结果。由此可见,过表达Pcdh11x可降低树突的复杂度,而抑制Pcdh11x的表达可增加树突的分支数量,增加其复杂度,因此,Pcdh11x蛋白负性调控小鼠体外培养的发育16 d胎脑源皮层神经元的的树突发育。结论 Pcdh11x蛋白抑制培养的皮层神经元一级、二级树突、树突点以及树突终末分支的发育。