重组小鼠树突状细胞因子DCF1的原核表达和纯化

目的:克隆小鼠重组树突状细胞因子DCF1蛋白进行原核表达、纯化与鉴定。方法:采用PCR从小鼠脑cDNA克隆dcf1基因,构建DCF1原核表达重组质粒(pET30a-DCF1)并转化E.coli的BL21(DE3)菌株。IPTG诱导重组蛋白表达,并在变性条件下经Ni sepharose FF6亲和层析柱纯化,再通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定。结果:成功克隆到大小为972bp的小鼠源dcf1基因片段并准确插入表达载体pET30a,0.1 mmol/L IPTG诱导转化菌2h可表达大量的DCF1蛋白,并可经Ni Sepharose FF6柱亲和层析得到高度纯化。结论:成功获得纯化的42kDa重组小鼠DCF1蛋白,为后续进行DCF1蛋白功能研究奠定了基础。

Dcf1在学习记忆及焦虑样行为中的作用

焦虑症可表现出焦虑样行为,其发病机制错综复杂且受多方面因素的影响,一线药物治疗效果也不甚理想。近年来发现,在自闭症、阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的发展中发挥作用的树突状细胞因子1(dendritic cell factor 1,Dcf1)也称TMEM59(transmembrane protein 59,TMEM59),在焦虑中也起着重要的作用。Dcf1通过调节N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDAR)和α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionic acid receptor,AMPAR)影响学习记忆和焦虑样行为的发生,但具体的作用机制仍不明确。Dcf1是当前研究热点之一,在神经系统中发挥重要作用,与帕金森症、焦虑症及脑缺血等神经系统疾病密切相关,然而,这些疾病的发生不可避免地对学习记忆产生影响。因此,Dcf1研究不仅具有实际意义,且为临床更为精确地治疗神经系统疾病提供研究基础,其理论价值在于探索大脑的功能机制。该文就Dcf1在学习记忆及焦虑样行为中的作用做一综述。