Dectin-1对侵袭性肺曲霉病大鼠半乳甘露聚糖、胸腺细胞凋亡及肺损伤的影响

目的:探究树突状细胞相关性C型凝集素-1(Dectin-1)对侵袭性肺曲霉病大鼠半乳甘露聚糖(GM)、胸腺细胞凋亡及肺损伤的影响。方法:大鼠随机分为对照组、Ad-EGFP组和Ad-Dectin-1-EGFP组。检测大鼠肺功能(肺容积变换、静息通气量);ELISA法检测大鼠肺泡灌洗液中干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)含量和血清中GM含量;H-E染色观察肺组织病理学变化;检测胸腺指数;TUNEL检测胸腺细胞凋亡;免疫印迹检测肺组织中Dectin-1、T-bet、GATA-3蛋白表达。结果:与对照组相比,Ad-EGFP组大鼠IFN-γ含量、胸腺指数、肺容积变换和静息通气量均明显降低,IL-4含量、GM值、胸腺细胞凋亡指数明显升高;与Ad-EGFP组相比,Ad-Dectin-1-EGFP组大鼠IFN-γ含量、胸腺指数、肺容积变换和静息通气量均明显升高,IL-4含量、GM值、胸腺细胞凋亡指数明显降低。与对照组相比,Ad-EGFP组大鼠肺组织中Dectin-1、T-bet蛋白表达明显降低,GATA-3蛋白表达明显升高;与Ad-EGFP组相比,Ad-Dectin-1-EGFP组大鼠肺组织中Dectin-1、T-bet蛋白表达明显升高,GATA-3蛋白表达明显降低。结论:Dectin-1重组质粒可减轻侵袭性肺曲霉病大鼠肺损伤,降低血清中GM值,通过抑制胸腺细胞凋亡维持体内免疫功能平衡,其机制可能与T-bet、GATA-3蛋白表达有关。

马尔尼菲青霉对巨噬细胞模式识别受体TLR-2、TLR-4、Dectin-1的表达及TNF-α分泌的影响

目的研究马尔尼菲青霉对巨噬细胞模式识别受体TLR-2、TLR-4、Dectin-1的表达及促炎因子TNF-α分泌的影响。方法马尔尼菲青霉酵母相菌液与小鼠腹腔巨噬细胞共培养24h,采用流式细胞技术检测巨噬细胞TLR-2、TLR-4及Dectin-1的平均荧光强度;共聚焦显微镜观察荧光染色的受体;ELISA法测定培养液上清中TNF-α的浓度;Real time PCR检测不同时间段TNF-α的mRNA表达。结果马尔尼菲青霉可使巨噬细胞TLR-2、TLR-4、Dectin-1的平均荧光强度均增高,并激活巨噬细胞产生TNF-α。结论马尔尼菲青霉上调了巨噬细胞模式识别受体TLR-2、TLR-4及Dectin-1的表达,巨噬细胞的激活与TLR-2、TLR-4及Dectin-1的表达上调相关。

Dectin-1、CARD9基因在角质形成细胞对红色毛癣菌应答中的作用

目的研究树突状细胞相关性C型凝集素-1(Dectin-1)和胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)基因在角质形成细胞对红色毛癣菌应答中的作用。方法将红色毛癣菌与正常HaCaT细胞、Dectin-1、CARD9基因敲除HaCaT细胞共培养,用ELISA分析其细胞上清液中IL-6、IL-8的表达情况。结果Dectin-1基因敲除导致HaCaT细胞IL-6和IL-8基础分泌明显增加,敲除CARD9基因导致HaCaT细胞IL-6基础分泌增加(P<0.05)。在红色毛癣菌的刺激下,和未感染相比,HaCaT细胞分泌的IL-8明显减少(P<0.05);Dectin-1基因敲除的HaCaT细胞则表现为IL-6、IL-8分泌量明显减少(P均<0.05);CARD9基因敲除的HaCaT细胞的IL-6、IL-8分泌则无明显变化(P均>0.05)。结论Dectin-1基因和CARD9基因可能参与了维持表皮免疫稳态,CARD9基因还可能介导了红色毛癣菌引起的免疫应答。

Dectin-1在角膜抗真菌免疫中的作用

β-葡聚糖是真菌细胞壁多糖成分中一种高度保守的结构成分，树突状细胞相关性C型植物血凝素-1（dectin-1）作为β-葡聚糖的主要模式识别受体，广泛分布于单核巨噬细胞系统、树突状细胞（DC）及中性粒细胞等细胞中，通过对真菌的识别作用及细胞的信号转导，诱导机体产生一系列的细胞因子及趋化因子，启动非特异性免疫及特异性免疫，对机体的抗真菌免疫反应发挥重要作用。就dectin-1的分子结构、组织细胞分布、信号传导及其在角膜免疫、炎症反应中的作用等进行综述。

Dectin-1受体信号通路研究进展

β-葡聚糖是真菌细胞壁的主要成分,近年研究发现,树突状细胞相关性C型植物凝集素-1(dectin-1)受体可作为真菌的主要模式识别受体,通过对β-葡聚糖的识别及信号转导,诱导机体产生一系列的细胞因子和趋化因子,启动免疫功能。Dectin-1受体广泛分布于单核巨噬细胞系统、树突状细胞及中性粒细胞等。本文主要对Dectin-1受体的结构、作用机制和信号通路进行综述。

姬松茸多糖对树突状细胞Dectin-1、Syk及CARD9基因表达和T淋巴细胞增殖的影响

目的:探讨低相对分子质量姬松茸多糖(low molecular weight polysaccharide isolated from Agaricus blazei Murill,LMPAB)对树突状细胞C型植物血凝素1(Dectin-1),脾酪氨酸激酶(Sky)和胱天蛋白募集域蛋白9(CARD9)基因表达和T淋巴细胞增殖的影响。方法:体外培养ICR小鼠骨髓来源的树突状细胞;通过流式细胞术检测树突状细胞表面CD11c和CD86分子的表达;采用WST方法检测LMPAB增强树突状细胞对T淋巴细胞的增殖作用;应用实时定量PCR方法检测Dectin-1,Sky和CARD9 mRNA的表达水平。结果:树突状细胞表面CD11c表达98.6%,CD86表达96.97%;与正常组(4.84±0.21)比较,LMPAB+OVA组(6.59±0.19)可增强树突状细胞对T淋巴细胞的增殖作用(P<0.05);与正常组Dectin-1(6.13±0.27),Sky(0.36±0.11)和CARD9(1.85±0.20)比较,LMPAB+OVA组Dectin-1(8.25±0.19),Sky(1.63±0.16)和CARD9(4.40±0.19)明显升高,统计学具有显著意义(P<0.05)。结论:所培养的髓系细胞为树突状细胞;LMPAB可通过调控树突状细胞Dectin-1,Sky和CARD9 mRNA的表达增强树突状细胞的免疫效能。

烟雾暴露对大鼠肺泡巨噬细胞曲霉防御功能的影响

目的研究烟雾暴露对大鼠肺泡巨噬细胞(AM)曲霉防御功能的影响。方法建立烟雾暴露大鼠模型,分离肺泡巨噬细胞,并用免疫荧光法进行鉴定。加入烟曲霉孢子共培养,测定AM的吞噬率及吞噬指数;用ELISA方法检测培养上清中TNF-α和IL-1β的浓度;用免疫组化检测树突状细胞相关性C型植物血凝素-1(Dectin-1)蛋白的表达。结果烟雾暴露组AM对烟曲霉孢子的吞噬率下降(P<0.05),吞噬指数无显著变化。孢子刺激后,烟雾暴露组培养上清中TNF-α和IL-1β的浓度显著低于对照组(P<0.05)。烟雾暴露组AM中Dectin-1蛋白的表达低于对照组(P<0.05)。结论烟雾暴露使大鼠AM吞噬能力下降,对曲霉的防御功能受损,这种功能变化可能与Dectin-1蛋白表达降低有关。

模式识别受体在抗真菌免疫中的作用

真菌感染机体后，通过模式识别作用及细胞内信号传导，启动固有免疫和适应性免疫应答。模式识别作用是抗真菌免疫的始动环节，Toll样受体（TLRs）和树突状细胞相关性C型凝集素-1（Dectin-1）是参与抗真菌免疫的主要模式识别受体（RPP）。两者活化后启动机体免疫应答，产生各种细胞因子和趋化因子，并直接诱导巨噬细胞、自然杀伤细胞吞噬和杀灭病原体。TLRs和Dectin-1的信号传导、抗真菌感染的免疫机制以及两者之间的相互作用等已成为目前研究的热点．