人DC的获取与DC特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素的表达

目的:证实体外诱导分化的人树突状细胞(DC)表面高效表达树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素因子(DC-SIGN),为进一步研究其在丙型肝炎病毒传播中的作用奠定基础。方法:F icoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),黏附2 h后接种于完全培养液中,并加入rhGM-CSF、rhIL-4刺激分化,共培养7天,光镜及扫描电镜观察细胞形态,以DC表面特异性标志DC-SIGN的特异性抗体进行荧光染色,检测DC-SIGN的表达。结果:经诱导产生的细胞具有典型的DC形态特征,高表达DC特异性标志物DC-SIGN。结论:GM-CSF与IL-4联合刺激PBMC可分化为DC,且高表达DC-SIGN,为后续研究DC-SIGN奠定了基础。

转谷氨酰胺酶3与树突细胞特异性捕获非整合素的细胞间黏附分子体外结合能力研究

的 检测树突细胞特异性捕获非整合素的细胞间黏附分子（DC-SIGN）转染的HEK293T细胞和单核细胞来源的树突细胞（MDDC）膜表面DC-SIGN受体对转谷氨酰胺酶3（TG3）的识别和摄取能力。方法 采用脂质体转染的方法将融合有DC-SIGN基因片段及真核表达载体pGCMV-EGFP（增强绿色荧光蛋白）的质粒转染至HEK293T细胞，制备DC-SIGN-EGFP-HEK293T细胞；通过磁珠阴性分选出外周血中CD14＋单核细胞，并通过粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素4诱导获得MDDC。利用激光共聚焦显微镜及流式细胞仪检测转染的HEK293T细胞及MDDC上DC-SIGN受体对TG3蛋白的识别和摄取，并设立空白对照组（不加入Alexa Fluor-647染料标记的TG3）和阴性对照组（仅加入Alexa Fluor-647染料）。结果 TG3与HEK293T和MDDC细胞孵育3 h后，激光共聚焦显微镜及流式细胞仪均显示，TG3可以被HEK293T及MDDC细胞上DC-SIGN受体识别并结合摄取入细胞内，流式细胞仪检测显示TG3与MDDC的结合可被DC-SIGN 阻断抗体部分阻断。阴性对照组和空白对照组未见HEK393T或MDDC细胞对TG3的识别和结合。结论 TG3可以作为一种自身抗原被DC-SIGN受体识别、结合，并被介导摄取进入树突细胞。

树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3捕获非整合素与结核分枝杆菌感染

结核分枝杆菌（MTB）感染所致的结核病目前仍是严重威胁人类健康的一种传染病，全球近三分之一的人口已感染MTB。MTB感染后的免疫主要是T细胞介导的细胞免疫，此过程中宿主的抗原呈递细胞起决定性作用。树突状细胞（dendritic cell，DC）是最有力的专职抗原呈递细胞，既能启动初始免疫应答，也能负向调控免疫反应，在抗MTB感染中起核心作用。DC特异性细胞间黏附分子-3捕获非整合素（DC—specific intercellular adhesionmolecule 3 grabbing nonintegrin，DC—SIGN）是DC上主要的MTB受体，与相应配体结合后能诱导Th2型免疫反应，与MTB免疫逃避和在体内的潜伏感染有关。

直肠癌患者的血清C型凝集素受体及其下游效应分子CARD9表达与临床病理特征和预后的关系

目的探究直肠癌患者的血清C型凝集素受体(CLR)及其下游效应分子胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)表达与临床病理特征和预后的关系。方法选择2018年3月至2020年3月国药同煤总医院收治的98例直肠癌患者作为研究对象(设为观察组),另选择45名同期在该院体检的健康志愿者设为对照组。采用ELISA法检测血清可溶性树突状细胞特异性细胞间黏附分子3结合非整合素(sDC-SIGN)和CARD9表达水平,并分析其与直肠癌患者临床病理特征的关系。采用Pearson相关性分析探讨血清sDC-SIGN与CARD9表达的关系。入组直肠癌患者术后均随访3年,计算3年总生存(OS)率。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,分析血清sDC-SIGN和CARD9表达与直肠癌患者预后的关系。采用多因素Cox回归分析探讨直肠癌患者预后的影响因素。采用ROC曲线分析血清sDC-SIGN和CARD9对直肠癌患者术后生存情况的预测价值。结果与对照组相比,观察组的血清sDC-SIGN表达水平降低,血清CARD9表达水平升高,2组的差异均有统计学意义(P均<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,直肠癌患者的血清sDC-SIGN与CARD9表达呈显著负相关(r=-0.743,P<0.05)。与无淋巴结转移的直肠癌患者相比,有淋巴结转移的患者的血清sDC-SIGN表达水平显著降低,而血清CARD9表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。sDC-SIGN低表达组的3年OS率显著低于sDC-SIGN高表达组,CARD9高表达组的3年OS率显著低于CARD9低表达组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,分化程度、TNM分期、淋巴结转移、血清sDC-SIGN和CARD9均是影响直肠癌患者预后的独立危险因素(P均<0.05)。血清sDC-SIGN和CARD9联合预测直肠癌患者术后3年生存情况的ROC曲线下面积(AUC)为0.896,均大于两者单独预测的AUC(P均<0.05)。结论血清sDC-SIGN和CARD9表达水平均与直肠癌发生密切相关,且血清sDC-SIGN低表达及血清CARD9高表达均提示直肠癌患者术后预后较差,其可能成为直肠癌诊断和预后预测的新血清学标志物。

DC-SIGN受体促进肠道病毒71型体外感染树突状细胞

目的探讨树突状细胞特异性细胞间黏附分子3结合非整合素(dendritic cell specific intercellular adhesion molecule-3 grabbing non integrin,DC-SIGN)的表达对肠道病毒71型(enterovirus type 71,EV71)体外感染人树突状细胞(dendritic cells, DCs)和293T细胞的影响。方法梯度密度离心法分离人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),体外诱导培养DCs,通过RT-PCR方法克隆DC-SIGN分子,并构建稳定表达DC-SIGN分子的载体pLB-DC-SIGN,脂质体方法转染293T细胞。分别用EV71感染对照组293T细胞和过表达DC-SIGN的293T细胞,荧光定量PCR检测病毒mRNA,蛋白质印迹法检测EV71/VP1的表达水平;同时用DC-SIGN抑制剂酵母甘露聚糖阻断DCs表面的DC-SIGN分子后,荧光定量PCR检测病毒mRNA,蛋白质印迹法检测EV71/VP1的表达水平。结果过表达DC-SIGN的293T细胞与对照组293T细胞相比,感染病毒量明显增高,EV71/VP1表达量显著增加,而阻断DC-SIGN的DCs病毒感染量低于对照组DCs,EV71/VP1表达量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 DC-SIGN分子可促进EV71体外感染DCs和293T细胞,可能是EV71感染的受体之一。

树突状细胞与丙型肝炎病毒感染研究

树突状细胞(DC)在捕获丙型肝炎病毒(HCV)并向靶器官传播的过程中扮演了重要的角色.本文就病毒感染前后DC的作用及功能变化,尤其是HCV感染过程中,DC 可能通过其表面特异性C型凝集素-细胞间黏附分子3结合非整合素分子(Dc specific intercellular adhesion molecule 3-grabbing nonintegrin,DC-SIGN)保护病毒转运、促进病毒感染靶细胞的路径,DC-SIGN可能将HCV传递给肝细胞以及B或T淋巴细胞亚群等做一简要的综述.

NF-κBp50参与IL-4在THP-1细胞中诱导DC-SIGN的表达(英文)

树突状细胞表面特异的胞间黏附分子3捕获非整合素(DC-specific intercellular adhesion molecule-3-grabbing nonintegrin,DC-SIGN)是树突状细胞表面特异的蛋白,在抗原呈递过程中起关键作用.这种特异性的表达和DC-SIGN的调节机制有关.到目前为止,DC-SIGN表达调控的机制还不是很清楚.IL-4是诱导DC-SIGN表达的最重要的细胞因子之一,而NF-κB是调控细胞信号转导的一个重要调控因子,两者都和DC-SIGN的表达调节相关.研究了IL-4和NF-κB对DC-SIGN启动子活性、对DC-SIGN表达的影响以及IL-4和NF-κB之间相互作用的关系.发现:DC-SIGN启动子中NF-κB位点缺失可以使DC-SIGN启动子活性下降大约50%,NF-κBp50可以促进DC-SIGN在THP-1细胞的表达,IL-在THP-1细胞诱导DC-SIGN表达的同时,也促进了NF-κBp50的表达.这些结果显示,在THP-1细胞中NF-κBp50参与IL-4诱导的DC-SIGN表达.

慢性荨麻疹患者外周血单个核细胞Toll样受体和DC-SIGN的检测和分析

目的检测慢性荨麻疹(CU)患者外周血单个核细胞(PBMC)Toll样受体2(TLR2)、TLR7、TLR9与树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3-结合非整合素分子(DC-SIGN)的表达。方法分离CU患者20例与正常对照组20例外周血PBMC,部分细胞提取RNA,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测TLR2、TLR7、TLR9和DC-SIGN mRNA表达,采用流式细胞术检测剩余PBMC中TLR2、TLR7、TLR9和DC-SIGN的蛋白表达。结果 CU患者PBMC的DC-SIGN mRNA表达明显低于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。CU患者PBMC TLR2蛋白表达高于正常对照组(P<0.05),DC-SIGN蛋白表达低于正常对照组(P<0.05)。结论 CU患者PBMC的DC-SIGN表达降低,TLR2蛋白表达增强。

DC-SIGN真核表达载体的构建及其稳定转染HeLa细胞系的建立

为研究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)与树突状细胞特异性粘附分子-3-结合非整合素分子(dendritic cell specific intercellular adhesion molecule-3-grabbing non-integrin,DC-SIGN)的相互作用对NDV感染树突状细胞(dendritic cell,DC)的影响,本研究拟构建能够稳定表达DC-SIGN蛋白的细胞系,为研究DC-SIGN蛋白与病毒蛋白互作提供基础。以小鼠DCs提取的c DNA为模板,通过PCR方法获得DC-SIGN基因,连入真核表达载体,并命名为pcDNA-DCSIGN,利用LipofectamineTM 2000转染HeLa细胞,G418进行药物压力筛选,经RT-PCR和Western blot鉴定,获得了一株可以高效表达DC-SIGN蛋白的HeLa细胞,且经过多次传代后仍然可以稳定表达DC-SIGN,说明该细胞系构建成功。

发热伴血小板减少综合征病毒细胞表面受体的初步研究

为初步研究树突细胞特异性细胞间黏附分子3结合非整合素因子(DC-SIGN)是否能作为发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)的细胞表面受体,首先通过实时反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同细胞系DC-SIGN mRNA水平及SFTSV感染水平,并用DC-SIGN特异性单克隆抗体封闭SFTSV敏感细胞,研究其对SFTSV感染水平的影响。此外,将DC-SIGN表达载体转染不同细胞系,研究转染前后细胞中SFTSV感染水平的变化。结果显示,在SFTSV感染水平较高的Vero细胞中,DC-SIGN mRNA水平较高;而在SFTSV感染水平低于Vero细胞的CHO-K1细胞中,DC-SIGN mRNA水平较低。DC-SIGN单克隆抗体在一定程度上能抑制病毒进入宿主细胞,并呈现剂量-效应关系,DC-SIGN可提高Vero和CHO-K1细胞中SFTSV的感染水平。本研究表明DC-SIGN为SFTSV的可能受体。

HBV感染与宿主细胞高尔基体α^1甘露糖苷酶Ⅰ活性关系的研究

目的:研究慢性HBV感染与宿主细胞高尔基体α1甘露糖苷酶I(Golgi MⅠ)活性的关系。方法:培养Hep G2细胞和Hep G2.2.15细胞,采用蔗糖密度梯度离心法分离纯化高尔基复合体,比色法检测Golgi MⅠ的活性,RT-PCR法检测基因MAN1A1(人甘露糖苷酶1A类成员1)、MAN1A2和MAN1C1 m RNA的表达,Western blot法检测上述3种基因编码蛋白的表达情况。结果:与Hep G2细胞相比,Hep G2.2.15细胞Golgi MⅠ的活性明显升高,MAN1A1、MAN1A2的m RNA水平显著上调,所编码的MAN1A1、MAN1A2蛋白量也显著增加,而MAN1C1的m RNA和蛋白的表达量无明显变化。结论:HBV感染可提高宿主细胞Golgi MⅠ的活性,这一作用可能是通过上调MAN1A1、MAN1A2基因m RNA和蛋白表达的量介导。

DC-SIGN基因多态性及表达差异与宿主易感性之间的关系

树突状细胞(DCs)是体内功能最强的抗原呈递细胞,其表面的DCs特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素因子(DC-specific ICAM-3 grabbing nonintegrin,DC-SIGN)一方面可介导DCs对病原体的结合和抗原呈递,有利于宿主免疫应答;另一方面也可被胞内寄生病原体利用,协助其感染宿主T细胞,并通过干扰DCs成熟来影响其抗原呈递能力,抑制宿主免疫功能。目前研究认为,DC-SIGN基因多态性及表达差异可能会影响宿主对病原体的易感性。

DC-SIGN在原发性肝癌组织中的表达及意义

目的探讨树突细胞特异性细胞间黏附分子3结合的非整合素(DC-SIGN)在原发性肝癌组织中的表达及意义。方法选择原发性肝癌患者手术切除的肝癌组织标本30例及对应的距离肝癌组织2 cm以上的癌旁肝组织标本30例。采用免疫组化法检测肝癌组织和癌旁组织DC-SIGN蛋白表达,采用RT-PCR检测肝癌组织和癌旁组织DC-SIGN mRNA表达。结果肝癌组织DC-SIGN光密度值高于明显癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。肝癌组织DC-SIGN mRNA相对表达量明显高于癌旁组织(P<0.05)。肝癌组织DC-SIGN蛋白表达与肝癌包膜、TNM分期、血清甲胎蛋白(AFP)水平有关(P<0.05),与肝癌患者年龄、性别、组织分化、肿瘤大小、肝外转移、静脉侵犯无关(P>0.05)。肝癌组织DC-SIGN mRNA水平与肝癌包膜、肝癌TNM分期、血清甲胎蛋白水平有关(P<0.05),与肝癌患者的年龄、性别、组织分化、肿瘤大小、静脉侵犯无关(P>0.05)。结论原发性肝癌组织中DCSIGN表达量升高,DC-SIGN表达量和肝癌的包膜是否完整及肝癌TNM分期有关。

DC-SIGN与微生物感染研究进展

树突状细胞(DC)在抵御病原体的过程中至关重要.然而, 近来的研究表明,一些病原体破坏了DC的功能以逃脱免疫监视.许多细胞表面分子与病毒包膜糖蛋白结合后并不介导病毒抗原的加工和呈递,相反,他们可作为捕获受体将病毒颗粒传递给靶器官或敏感细胞.HIV-1就可与DC特异的C型凝集素DC-SIGN(Dc specific intercellular—adhesion—molecule-3 grabbing nonintegrin,树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素因子;即CD209)结合,“绑架”C,感染宿主.DC—SIGN除了可与HIV-1、HCV结合外, 还可与其他多种病原体结合.对病原体和DC—SIGN的相互作用以及对DC功能的进一步研究,必将有助于抗感染的治疗.本文就DC—SIGN与微生物感染的研究进展作一综述.

DC-SIGN在病毒感染中的作用机制研究进展

树突状细胞(DCs)表面特异性细胞间黏附分子3结合非整合素(SIGN)主要分布在DCs表面,通过依赖Ca2+的碳水化合物识别区域(CRD)识别与结合内源性和外源性抗原,介导细胞与细胞之间的相互作用,参与DCs对病原体的识别和捕获,在HIV、HCV、登革热病毒(DENV)以及肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)等的感染和传播中发挥重要作用。本文就DC-SIGN与病毒感染相关研究进展作一综述。

DC-SIGN与肿瘤关系的研究进展

树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素因子(dendritic cell specific intercellular-adhesionmolecule-3 grabbing non-integrin,DC-SIGN)是一种主要表达于树突状细胞(dendritic cell,DC)表面的特异性受体,属于C型凝集素超分子家族。DC-SIGN不仅能与细胞间黏附分子-2(intercellular adhesion molecule-2,ICAM-2)和细胞间黏附分子-3(intercellular adhesion molecule-3,ICAM-3)等结合,还能识别HIV、登革病毒、巨细胞病毒等病原微生物,从而参与了这些病原体的感染过程,与多种感染性疾病的发病机制密切相关。近年来,有学者发现DC-SIGN还与肿瘤的发生、免疫、易感性有关,也因此受到了更广泛的关注。对DC-SIGN与肿瘤之间的关系进行更深一步的研究将有助于了解相关肿瘤疾病的发生机制,为促进其诊疗进展奠定基础。

DC-SIGNR与肿瘤关系的研究进展

肿瘤是一种威胁生命的疾病,目前肿瘤的具体发展过程和作用机制还没有完全研究清楚。C型凝集素受体是一大类蛋白质,具有抑制炎症和抗菌功能。DC-SIGNR属于C型凝聚素的其中一员,越来越多的临床证据分析表明,DC-SIGNR也极有可能与恶性肿瘤的发展有关。本文综述了DC-SIGNR表达与肿瘤发生、发展之间的关系,深入探究DC-SIGNR在肿瘤各个环节的作用,为进一步了解肿瘤的机制提供了一个全新的角度。

DC—SIGN启动子区-139和-336位点多态性与HIV感染的关系

目的研究树突细胞特异性细胞间黏附分子一3结合非整合素因子（dendritic cells specific intercellular adhesion molecule-3-grabbing nonintegrin, DE-SIGN ）启动子区-139和-336位点多态性与HIV易感性、感染途径以及疾病进展的关系。方法比较160例HIV感染者和178名健康对照人群DC—SIGN启动子区-139位点和-336位点基因型分布的差异，采用Spearman秩和相关检验分析DC—SIGN启动子区-139和-336多态性与HIV感染的关系。结果在160例HIV感染者中，出现92例（57．5％）-139C和68例（42．5％）-139T，29例（18．1％）-336C和131例（81．9％）-336T。-139T／C和-336T／C基因型分布在HIV感染者与健康对照者中的差异无统计学意义（X2=0．121和1．754，P值均〉0．05）。通过性接触或静脉注射毒品而感染HIV的患者中，-139T／C和-336T／C分布差异无统计学意义（z2=0．435和0．103，P值均〉0．05）。在所有研究对象中，-139C基因型的个体多伴随-336C基因型（r=0．359，P〈0．01）。在外周血CD4＋T细胞计数≤50个／μL的患者中，-139T基因型出现的频率（27．9％）高于-139C基因型（23．0％）（x2=4．055，P〈0．05）。-139T／C和-336T／C对HIVRNA载量影响不明显（t=-0．643和-1．637，P值均〉0．05）。结论DC—SIGN启动子区-336C常与-139C耦联出现；-139或-336位点多态性与HIV的易感性和感染途径无明显相关性，但-139T基因型患者更易出现CD4＋T细胞数量的下降。