一种对基于甲基丙烯酸甲酯(MMA)包埋的非脱钙组织切片进行免疫组化染色的方法

本文旨在探讨对于甲基丙烯酸甲酯树脂包埋的未脱钙组织切片进行免疫组化染色的可行性。方法 在本实验中,传统的环氧树脂包埋剂被替换为甲基丙烯酸树脂包埋剂。在切片制备完成并进行正式染色前,对切片进行脱钙处理以增加碱性染料的着色。采用血管平滑肌标志物α-SMA为目的蛋白。抗体孵育过程中,多种封闭剂被采用以降低背景着色——非特异性蛋白采用血清白蛋白封闭;内源性生物素采用未标记链霉素封闭;内源性碱性磷酸酯酶采用左旋咪唑封闭。Fast-red TR显色剂的采用使得阳性区与较暗的背景能够更好的区分。最后采用甲基绿染料对细胞核进行复染。结果 在聚甲基丙烯酸甲酯包埋的骨组织切片中,α-SMA成功标记了血管的形态。结论 本实验提供的方法使树脂包埋的未脱钙组织切片能够成功地进行免疫组化染色,使得对于这类样本进行蛋白表达的检测成为可能。