真菌漆酶在树脂D380上的固定及固定化漆酶的性质

为寻求一种廉价高效的漆酶固定化方法,以树脂D380为载体、戊二醛为交联剂,结合吸附法和交联法固定真菌漆酶,并研究固定化漆酶的性质。最优固定化条件:1 g载体在20 mL 0.7%的戊二醛溶液中交联2 h后,加入2 mL稀释酶液和5 mL pH为4的醋酸-醋酸钠缓冲溶液,在25℃下吸附反应6 h,最终获得的酶活回收率为65.94%。固定化漆酶的最适温度为20℃,最适pH为4,在4℃下保存14 d仍保持约80%的酶活力。自由漆酶和固定化漆酶的Km值分别为1.207mmol/L和1.616 mmol/L,说明固定后漆酶对底物的亲和力有所下降。

大孔树脂D380固定化硫酸软骨素裂解酶

目的以大孔树脂D380为载体,戊二醛为交联剂,进行硫酸软骨素裂解酶(ChSase)的固定化,并考察固定化酶的酶学性质。方法分别考察加酶量、吸附温度、吸附时间、吸附pH值、戊二醛交联浓度、交联时间及交联温度对ChSase固定化效果的影响,并分析该固定化酶的最适反应温度、最适反应pH值、米氏常数(Km)及其操作稳定性。结果ChSase的最佳固定化条件为:加酶量150U/g树脂,吸附温度15℃,吸附时间6h,吸附pH值7.0,戊二醛交联浓度0.01%,交联时间3h,交联温度4℃。以此条件制备的固定化酶,其酶结合效率可达79.1%。该固定化ChSase的最适反应温度为45℃;最适反应pH值为7.0;Km达1.46×10-1g/L,较游离酶高;具有较好的操作稳定性。结论以大孔树脂D380为载体固定化ChSase是可行的,所得固定化酶有较高的使用效率和稳定性,适合于工业化生产。

胰蛋白酶的固定化及其性质的研究

以大孔弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂D380为载体,以戊二醛为交联剂,固定化胰蛋白酶。研究了交联剂浓度、交联时间、交联温度、酶液的pH值等条件对活力回收率的影响,并研究了固定化胰蛋白酶的性质。

离子交换法从含磷溶液中提取钼的研究

采用D380大孔弱碱性阴离子交换树脂从某铀矿高浓度含磷萃余水中回收钼。结果表明：吸附时间30min,每g干树脂的吸附容量为248mg;采用80g/L NaOH溶液进行解吸,解吸时间40min,钼质量浓度峰值为60～80g/L,钼和磷解吸率均大于99%,铀的解吸率超过80%。

3种固定化尖吻蝮蛇毒金属蛋白酶的比较

【目的】筛选出一种最优的固定化尖吻蝮(Deinagkistrodon acutus)蛇毒金属蛋白酶(Snake venom metalloproteinase,SVMP)的方法。【方法】采用D380大孔树脂、海藻酸钠-壳聚糖、溶胶-凝胶等3种载体固定化SVMP,用分光光度法检测固定化金属蛋白酶和游离金属蛋白酶的酶活性,计算它们的酶搭载率、酶活回收率,并检验它们的温度耐受性、pH耐受性和重复使用性,并由此筛选出最优固定化方法。【结果】溶胶-凝胶固定化酶、海藻酸钠-壳聚糖固定化酶和D380大孔树脂固定化酶的酶搭载率分别为91.47%,78.14%和49.44%;D380大孔树脂固定化酶、海藻酸钠-壳聚糖固定化酶和溶胶-凝胶固定化酶的酶活回收率分别为39.00%,39.53%和41.17%;重复使用4次后,溶胶-凝胶固定化酶的酶活回收率最高;溶胶-凝胶固定化酶pH耐受性最优,对温度的耐受性也最高。【结论】溶胶-凝胶固载体固定尖吻蝮蛇SVMP的效果最优。