树舌多糖GF对HepA瘤细胞p53基因表达的影响

目的 :为探明树舌多糖GF对小鼠HepA瘤组织 p5 3基因表达水平的影响。方法 :用酶联免疫反应测定 p5 3多克隆抗体。结果 :荷瘤对照组 p5 3基因表达较空白对照组增加非常显著 (p <0 .0 1 ) ,而树舌多糖GF组较荷瘤对照组 p5 3基因表达减少非常显著 (p <0 .0 1 ) ,较正常组织有显著差异 (p <0 .0 5 ) ,其 p5 3平均表达量较空白对照组低 ;猪苓多糖对照组较荷瘤对照组 p5 3基因表达水平减少非常显著 (p <0 .0 1 ) ,接近空白对照组 (p >0 .0 5 )。结论 :初步认为树舌多糖GF可能直接作用 (或通过癌基因 )影响HepAcellsp5 3基因的表达频率。

树舌多糖对胃黏膜损伤大鼠胃黏膜PGE_2含量及血流量和黏液分泌的影响

目的:研究树舌多糖对大鼠胃黏膜损伤的保护作用及其机制。方法:采用醋酸法和幽门结扎法复制大鼠胃溃疡模型,分别测定胃黏膜PGE2含量和胃黏膜血流量及胃黏液分泌。结果:与模型对照组比较,多次灌服树舌多糖250～1000mg·kg-1可明显增加大鼠胃黏膜PGE2含量和胃黏膜血流量,对大鼠胃内游离黏液和胃壁黏液的分泌也具有显著的增加作用,且有明显量效关系。结论:树舌多糖通过提高胃黏膜PGE2含量和胃黏膜血流量及胃黏液分泌来加强胃黏膜屏障,这是其保护胃粘膜损伤的作用机制之一。

树舌多糖对大鼠胃黏膜损伤的保护作用

目的研究树舌多糖对应激性胃黏膜损伤的保护作用及机制。方法采用束缚-应激模型,评价胃黏膜损伤指数的变化,测定胃黏膜和血清中环磷酸腺苷(cAMP)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与模型组比较,树舌多糖(250、500、1 000 mg/kg)可明显增加应激性胃黏膜损伤大鼠血清和胃黏膜中cAMP、GSH水平,降低MDA量,并使SOD活力增强,且有明显量效关系。结论树舌多糖能明显抑制应激大鼠胃黏膜损伤的发生,其机制可能与增加cAMP和GSH水平,减少自由基的产生有关。

树舌多糖抗小鼠腹水型肝癌的实验研究

本实验以腹水型肝癌（ＨｅｐＡ）为模型，研究了树舌多糖ＧＦ组分的抗癌活性，结果表明：树舌多糖ＧＦ能明显延长荷瘤小鼠的生存时间（Ｐ＜０．０１），抑制瘤细胞的增殖，其抑制率为３６．９％并能提高瘤细胞的死亡率（Ｐ＜０．０１），因而提示：树舌多糖ＧＦ具有一定的抗小鼠ＨｅｐＡ活性的作用。

树舌多糖抑制胃癌MGC-803细胞增殖及对EGFR表达的影响

目的研究树舌多糖(Ganoderma applanatumpolysaccharides,GAPS)粗提物对人胃粘液性腺癌MGC-803细胞增殖、细胞周期及其对受体蛋白酪氨酸激酶EGFR表达的影响,探讨树舌多糖抗肿瘤作用机制。方法MTT法检测不同时间不同浓度树舌多糖对胃癌细胞MGC-803增殖抑制作用;流式细胞仪检测2.0 g/L树舌多糖作用72 h后MGC-803细胞的周期分布,流式细胞仪检测和免疫荧光显微镜观察树舌多糖对MGC-803细胞EGFR表达的影响。结果树舌多糖对胃癌细胞MGC-803具有增殖抑制作用,并呈时间及浓度依赖性。2.0 g/L树舌多糖作用72 h后,MGC-803细胞被阻滞于G0/G1期,S期和G2/M期细胞减少,与细胞对照组比较有差异,具有统计学意义(P<0.05)。荧光显微镜下观察树舌多糖组MGC-803细胞EGFR荧光强度较对照组明显减弱;流式细胞仪检测树舌多糖能下调MGC-803细胞EGFR表达,与细胞对照组比较有差异,具有统计学意义(P<0.05)。结论树舌多糖可以抑制胃癌MGC-803细胞的增殖,这与树舌多糖能够阻止肿瘤细胞由G1期进入S期、延缓细胞周期进程,降低受体型酪氨酸蛋白激酶EGFR的表达、阻断细胞增殖信号转导途径的信息传递有关。

树舌多糖抗溃疡作用

目的 :研究树舌多糖的抗溃疡作用。方法 :采用束缚 -应激模型、醋酸致胃溃疡模型、药物诱发模型和幽门结扎法研究树舌多糖抗胃溃疡作用。结果 :树舌多糖 2 0 0～ 10 0 0mg/kg可明显对抗应激型、醋酸型、药物 (消炎痛 )诱发型和幽门结扎型胃溃疡 ,对胃酸和胃蛋白酶活性皆有抑制作用。结论 :树舌多糖对大鼠实验性胃溃疡有明显保护作用。

树舌多糖GF注射液对化疗药物的增效减毒作用及其机制研究

目的探讨树舌多糖GF注射液对化疗药物(CTX)的增效减毒作用及其作用机制。方法采用移植性H22肝癌小鼠,随机分为阴性对照组、CTX组和联合用药组。连续给药10d后,测定其抑瘤率、WBC数、吞噬指数和IL2活性。结果树舌多糖GF注射液能提高CTX的抑瘤率,能减轻CTX的毒副作用,并能提高单核吞噬细胞功能和IL2活性。结论树舌多糖GF注射液对化疗药物CTX具有明显的增效减毒作用,可能是通过增强机体的免疫功能实现的。

树舌多糖对小鼠HepA癌细胞3H-TdR和(6-3H)一Glucose掺入的影响

就树舌多糖ＧＦ抗小鼠ＨｅｐＡ癌细胞作用机制方面做７初步研究，结果发现树舌多糖６Ｆ可抑制Ｈｅｐ。Ａ细胞掺入３Ｈ－ＴｄＲ（Ｐ＜０．０１）和抑制其对［６－３Ｈ］－Ｇｌｕｓｃｏｓ掺入（Ｐ＜０．０１），从而影响ＨｅｐＡ细胞的ＤＮＡ合成和糖代谢。

树舌多糖对小鼠HepA P16 P27 Rb基因表达的影响

目的:探讨树舌多糖抗肿瘤作用的机制. 方法:通过免疫组化、ELISA法分别测定瘤体和血清中抑癌基因P16,P27,Rb表达蛋白的量;通过透射电镜观察凋亡小体是否存在. 结果:树舌多糖作用后P16,P27,Rb基因表达蛋白的量与盐水组有差异具有统计学意义,免疫组化结果:bP<0.01, vs(1)(2);aP<0.05,vs(2)(3);dP<0.01,vs(3).ELISA结果: aP<0.05,vs(3);bP<0.01,cP<0.05,vs(4);dP<0.01,vs (3)(4);fp<0.01,vs(4);gP<0.05,hP<0.01,vs(3).且P16, P27表达的量与Rb呈负相关mr=-0.094(1),nr=-0.446 (1),再有观察到凋亡小体的存在. 结论:树舌多糖通过激活抑癌基因,抑制肿瘤的生长促进肿瘤细胞凋亡.

树舌多糖的分离纯化、理化性质及抗炎镇痛活性研究

目的:分离纯化树舌多糖,获得均一多糖,并对其理化性质进行研究。对树舌多糖抗炎镇痛活性进行研究。方法:分离纯化采用DEAE离子交换色谱法和葡聚糖凝胶色谱法;纯度鉴定及分子量测定采用高效液相色谱法,示差折光检测器;单糖组成采用气相色谱质谱联用法测定。抗炎实验采用小鼠二甲苯性耳廓水肿法及大鼠角叉菜胶足肿胀法,镇痛实验采用小鼠醋酸扭体法。结果:获得三种均一多糖(GapsⅠ、GapsⅡ、GapsⅢ),峰位分子量分别为6 221、5 535、3 518D。红外光谱证实GapsⅢ结构中有β构型异头碳,核磁共振氢谱和碳谱均证实GapsⅢ结构中有α、β构型异头碳。树舌多糖明显减轻二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀和角叉菜致大鼠足肿胀,并减少小鼠扭体次数。结论:三种多糖分子量分布及单糖组成均不同,均主要由葡萄糖组成。

树舌多糖GF对小鼠HepA癌细胞PTEN蛋白表达的影响

目的探明树舌多糖(GAPS)GF对小鼠HepA癌细胞PTEN蛋白表达的影响。方法昆明种小鼠随机分肿瘤组和树舌多糖组。接种后各组肌肉注射给药,分别给予生理盐水和树舌多糖GF。连续10d,于末次给药24h,处死小鼠,剥离肿瘤组织。Dot blot技术检测各组样品PTEN蛋白的表达量。结果肿瘤组检测结果为阴性,树舌多糖组检测结果为阳性。结论树舌多糖GF抗肿瘤的作用靶点之一可能为抑癌基因PTEN。

树舌多糖GF注射液与环磷酰胺联合抗肿瘤作用的实验研究

目的 :探讨树舌多糖GF注射液与环磷酰胺 (CTX)联合应用的抗肿瘤作用 ;方法 :采用移植性H2 2肝癌小鼠 ,随机分为阴性对照组、树舌多糖GF单用组、CTX单用组和两药合用组。连续给药 10d后 ,测定其抑瘤率、WBC数、胸腺指数和脾指数 ;结果 :树舌多糖GF注射液与CTX合用抑瘤率比单用时明显升高 ;树舌多糖GF注射液能减轻CTX的毒副作用 ,对CTX所致WBC减少、免疫器官萎缩等有一定保护作用 ;结论 :树舌多糖GF注射液对CTX具有明显的增效减毒作用 ,是一种有效的抗肿瘤辅助药。

树舌多糖抑制胃癌MGC-803细胞增殖及对酪氨酸激酶活性的影响

目的探讨树舌多糖对人胃癌MGC-803细胞增殖、细胞周期分布及其对酪氨酸激酶表皮生长因子受体(EGFR)、血小板衍生生长因子受体β(PDGFRβ)表达的影响。方法 MTT法检测树舌多糖对胃癌细胞MGC-803增殖抑制;流式细胞仪检测树舌多糖作用后MGC-803细胞的周期分布、EGFR及PDGFRβ表达变化;荧光显微镜下观察细胞EGFR、PDGFRβ表达情况。结果树舌多糖对胃癌MGC-803细胞增殖具有抑制作用,并呈时间及剂量依赖性。2mg/ml树舌多糖作用MGC-803细胞2h后,细胞周期阻滞于G0/G1期,S期和G2/M期细胞减少,与对照组细胞比较有差异(P<0.05)。树舌多糖下调MGC-803细胞EGFR、PDGFRβ的表达,与对照组细胞比较有差异(P<0.05);荧光显微镜和流式细胞仪检测结果一致。结论树舌多糖抑制胃癌MGC-803细胞增殖,下调酪氨酸激酶EGFR、PDGFRβ表达和阻止胃癌细胞由G1期进入S期,延缓细胞周期进程。

树舌多糖GF对小鼠肝癌H_(22)细胞P53及RB基因的影响

目的:为探明树舌多糖GF对肝癌H22瘤细胞RB基因及P53基因的影响。方法:用ELISA法检测RB基因及P53基因用药前后表达的差异。结果:树舌多糖GF组中P53基因、RB基因的表达量均显著高于荷瘤组(P<0.01)。树舌多糖组、环磷酰胺组无显著差异。结论:树舌多糖GF能使肝癌H22细胞P53及RB基因的表达上调。

树舌多糖GF对肝癌细胞E2F1基因表达及细胞增殖的抑制作用

目的:研究树舌多糖GF对肝癌SMMC7721细胞E2F1基因表达及细胞增殖抑制的影响。方法:不同浓度树舌多糖GF处理SMMC7721细胞后,采用MTT法检测SMMC7721细胞的增殖;用Real-timePCR和Western blot检测E2F1 mRNA及其蛋白表达。结果:2.5,10μg/mL树舌多糖GF对肝癌细胞SMMC7721的增殖抑制效果最为显著。树舌多糖干预SMMC7721细胞后,E2F1mRNA表达下调,E2F1蛋白表达减少。结论:树舌多糖GF可下调E2F1的表达从而抑制肝癌细胞增殖。

树舌多糖对人胃癌SGC-7901细胞增殖及CyclinD1、p16表达的影响

目的探讨树舌多糖对人胃癌SGC-7901细胞增殖及CyclinD1、p16表达的影响,进一步研究其抗胃癌的可能机制。方法培养人胃癌SGC-7901细胞,MTT法观察不同时间(24 h,72 h)不同浓度树舌多糖对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。用流式细胞法检测树舌多糖对细胞周期阻滞及其凋亡的影响。实时荧光定量法检测树舌多糖作用人胃癌SGC-7901细胞72 h后CyclinD1及p16的表达情况。结果随着树舌多糖浓度增高和作用时间的延长,对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制率逐渐增高(P<0.05),同一浓度不同时间的细胞增殖抑制率相比有显著性差异(P<0.05)。人胃癌SGC-7901细胞在G0/G1期表现出明显的增加,S期细胞明显的减少,各浓度组均明显诱导细胞凋亡,其凋亡率随树舌多糖浓度增加而提高。实时荧光定量法检测显示,随着树舌多糖浓度的增加,CyclinD1表达逐渐减少,p16表达逐渐增加。树舌多糖浓度0.5mg/ml,1.0 mg/ml时,CyclinD1及p16表达存在显著性差异(P<0.05)。结论树舌多糖对人胃癌SGC-7901细胞有抑制增殖和促凋亡作用,呈时间和浓度依赖性,且G0/G1期细胞数量增多,S期细胞数量减少。RT-PCR法检测显示,CyclinD1呈现低表达,p16呈现高表达,由此推测,CyclinD1表达下调与p16表达上调可分别发挥细胞周期的正、负反馈调节,共同作用产生细胞增殖抑制及促进凋亡,从而发挥抗肿瘤作用。

树舌多糖GF注射液对小鼠HepA瘤细胞可溶性蛋白质组影响的实验研究

目的:研究树舌多糖GF注射液对小鼠HepA瘤细胞可溶性蛋白质组的影响。方法:应用SDS-PAGE分离瘤组织的可溶性蛋白,同时应用PDQest软件分析电泳结果。结果:在可溶性蛋白的SDS-PAGE中,与空白组相比,肿瘤组有3个蛋白质组分条带表达下调,11个蛋白质组分条带表达上调。树舌多糖GF注射液可以使肿瘤细胞3条表达下调的蛋白质组分条带和8条表达上调的蛋白质组分条带恢复至正常水平。结论:树舌多糖GF注射液对小鼠HepA瘤细胞可溶性蛋白质组有质和量的影响。

树舌多糖对小鼠HepA瘤细胞的caspase-8、TNF-α及MAP-2的表达的影响

目的研究树舌多糖抑制肿瘤的作用机制。方法通过随机分组实验,测定树舌多糖对小鼠HepA瘤的抑瘤率,经Western blot检测caspase-8与TNF-α的表达,免疫荧光法检测MAP-2的表达,并通过电镜观察树舌多糖作用后细胞结构的变化。结果树舌多糖的抑瘤率为51.82%,经其作用后,Western blot显示caspase-8、TNF-α表达均显著增加,免疫荧光法检测MAP-2的表达也显著增加。电镜下观察到树舌多糖作用后细胞结构发生改变并形成凋亡细胞。结论树舌多糖通过促进caspase-8的表达,刺激TNF-α表达增加,进一步影响细胞骨架的重排从而促进细胞凋亡抑制小鼠HepA瘤的生长。

树舌多糖对HepA小鼠的抑瘤作用及血清LSA含量的影响

目前,国内外对多糖类的研究方兴未艾,许多研究表明糖类化合物具有较强的免疫刺激和抗肿瘤作用,如云芝多糖能提高荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的舌噬能力,并使因带瘤而降低了的T细胞功能全面恢复,牛膝多糖能提高荷瘤小鼠低下的血清IgG含量,提高其NK细胞活性等,这就为人们从天然植物中寻找出一种毒性低、抗瘤作用强的新药开辟了途径。树舌多糖就是从小兴安岭产树舌中提取的多糖,实验证明它能明显延长L^(7811)白血病和H_(22)小鼠的生存时间,抑制肿瘤胞的生长,为进一步研究其抑瘤作用,本文研究了它对实体型肝癌(HepA)