木质素降解菌的筛选及其对酒糟的预处理研究

为解决生物质炼制过程中木质素的生物抗性,本研究筛选出一株木质素降解菌,用其对酒糟进行预处理,并使用傅里叶红外光谱仪、X射线衍射仪、扫描电子显微镜、Zeta电位与纳米粒度仪、低场核磁共振分析仪和热重分析仪对预处理前后酒糟的微观结构与理化性质进行表征。结果表明:这株木质素降解菌是栓菌属,将其命名为Trametes sp.SCU31(T.sp.SCU31)。T.sp.SCU31能够高效降解酒糟中的木质素,可使酒糟中33.86%酸不溶木质素与50.88%酸溶木质素发生降解。经T.sp.SCU31预处理后的酒糟表面布满孔洞与碎片,更多的纤维束暴露出来,显著增加了纤维素酶的可及性,这些结果表明T.sp.SCU31预处理能够高效降解木质素,破坏木质纤维的抗性。

基于ITS序列分析鉴定栓孔菌属物种

以采自四川盆地的栓孔菌属的12个标本作为研究材料,对形态特征进行初步鉴定,结合来自GenBank的6个最相似物种(Trametes ochraceae、Trametes obstinata、Trametes purpurea、Trametes villosa、Trametes pubeacens、Tram-etes velutina)共计18种栓孔菌属的rDNA ITS区段进行序列同源性分析。结果表明,三大类群中,粗毛栓孔菌和偏肿栓菌的菌株各自聚为1组。云芝栓孔菌属的菌株聚为三组,其中,HE2807和HE21006以98%,HE2925与来自Gen-Bank上的5个菌株,HE21080、HE21084和HE2905分别以较高的同源性聚为一起。说明根据形态特征观察的同时,ITS序列分析在近缘种的分类鉴别上有一定价值,但是只能作为大型真菌分类鉴定的参考依据。

栓菌Trametes sp. G048的化学成分研究

从栓菌属真菌Trametes sp. G048的发酵液和菌丝体中分离并鉴定出6个化合物,经波谱数据分析分别鉴定为isodrimenediol diacetate(1)i、sodrimenediol 2-acetate(2)、脑苷脂D(3)、麦角甾醇(4)、过氧化麦角甾醇(5)和啤酒甾醇(6)。其中化合物1和2为新的天然产物。

产纤维素酶菌株Trametes sp. LYW-1的分离鉴定及产酶条件分析

为寻找新纤维素酶和纤维素酶基因资源,以羧甲基纤维素钠作为唯一碳源,从湿润木屑中分离和筛选获得1株高产纤维素酶目的菌株LYW-1。对该菌保守序列ITS进行扩增和测序后,提交NCBI并与相近物种ITS序列进行比对和分析,基于亲缘关系构建系统发育树。将ITS rDNA保守序列比较分析结果与形态学观察结果相结合,初步鉴定该菌株属于栓菌属(Trametes)。以羧甲基纤维素钠溶液为底物,采用3’5’-二硝基水杨酸(DNS)法测定纤维素酶活力,分析pH、温度及培养基中同碳源、氮源对该菌产纤维素酶活力的影响。结果表明,菌株LYW-1在pH 7.0、37℃、淀粉为碳源和乙酸铵为氮源时为最适培养条件,总酶活力达到最大。