保留时间两点校正反相高效液相色谱法测定持久性有机污染物的正辛醇-水分配系数

采用改进的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定了持久性有机污染物(POPs)包括多环芳烃(PAHs)、多氯二苯并二恶英(PCDDs)、多氯二苯并呋喃(PCDFs)和十溴二苯乙烷(DBDPE)等的正辛醇-水分配系数(logKow)。采用保留时间双点校正法(DP-RTC)校正因色谱柱老化等引起的保留时间漂移。以37种有可靠logKow实验值的苯系物、PAHs、PCDD/Fs类似物为模型化合物,建立了logKow和外推至纯水相的保留因子logkw的定量结构-色谱保留关系(QSRR)模型,回归方程为logKow=(1.18±0.02)logkw+(0.36±0.11),其相关系数(R2)为0.985,交叉验证相关系数(R2cv)为0.983,标准偏差(SD)为0.16。进而,用4个已有可靠logKow实验值的验证化合物(联苯、芴、PCDD 1和PCDF 114)对模型进行了外部验证,表明RP-HPLC测得的logKow值与摇瓶法/慢搅法结果有很好的一致性,尤其是对疏水性强的化合物。采用该模型测定了29种特别受关注的POPs的logKow值,这些化合物的logKow实验值均未见报道。所建立的DP-RTC-HPLC是测定强疏水性POPs的logKow值的一种值得推荐的方法。

色谱保留时间校正在非靶向筛查中的应用

目的色谱保留时间校正是有效提高鉴定准确性的重要步骤之一。本文提出了一种基于保留时间校正的生物样本非靶向筛查的策略。方法建立生物样本前处理方法,优化液相色谱条件、质谱检测条件,筛选14个化合物作为校正剂,考察不同样品、不同进样时间、不同品牌仪器、更换色谱柱、更换流动相后保留时间校正情况。结果校正剂覆盖范围广、稳定性好且不干扰样本测定,在正、负离子模式下能够均匀分布在色谱图中,将色谱图分割为若干时间段,每个时间段内使用校正剂进行保留时间线性校正,校正效果良好。结论引入保留时间校正方法后可消除实验条件造成的保留时间漂移,提高定性的准确度,有助于解决仅依据质谱信息定性的结果假阳性高的问题。

化学农药环境行为参数快速估测方法研究

农药在反相高效液相色谱(RP-HPLC)上的流动相与固定相间的分配过程与其在环境中极性介质与非极性介质间的分配,包括吸附、富集、挥发等过程有着密切的相关性,因而可用农药在 RP-HPLC 上的校正保留时间(t'_R)和容量因子(K')来快速测定其水溶解度(S_W)、分配系数(K_(OW))、吸附常数(K_(OC))、生物富积因子(BCF)和水中挥发性(K_(Wa))、土壤中挥发性(K_(Sa))等环境行为参数。本文应用该方法选择一系列已知 S_W、K_(OW)、K_(OC) 等参数的农药,在不同流动相条件下测定它们的 t'_R 和 K'值,用外推法求出流动相为纯水时的容量因子 K^0,研究了t'_R、K'、K^0与 S_W、K_(OW)、K_(OC)、BCF 及 K_(Wa)、K_(Sa) 之间的关联,通过建立相关方程来预测其它农药未知的有关环境参数,并对有关影响因素进行了探讨。在相关方程的建立上,分为结构相似的同系列农药方程,它对本系列内参数未知的农药有较好的预测能力;在结构上差异较大的非同系列农药方程,它能在大体上初步反映出不同类型农药的环境性质,其方程的相关性一般比同系列方程要差;第三种是由在类别及 t'_R 上都具有代表性的农药所建立的基准方程,它适用于任一农药上述参数的预测,其结果具有良好的可信度,不受个别误差较大的农药的影响。研究结果表明:1.用RP - HPLC测定农药的水溶解度,在流动相甲醇:水为60:40的条件下建立S_w与t'_R的相关方程:取代脲类同系列农药方程:1nS,,=14.822-3.85541nt'_R-0.01(MP一25 C)包括有机磷、取代脉类和氨基甲酸醋类的非同系列农药方程:1nS_w=14.589一3.6471nt_R -0.01(MP一25℃)基准方程:1nS W = 15.506- 4.1lnt'R-0.01(MP一25℃)用上述方程测得的S_w值与文献值得到相近的结果.2.农药的K_ow与t'_R的关系(甲醇:水=60:40):同系列方程:"lnK_ow=-1.1843 + 3.5054 lnt'R 非同系列方程:1nK_ow=-0. 6021 + 3.1215 lnt'R 基准方程:lnK_ow=-0.2230 + 2.9972 lnt'R 3.由于K_ow与农药的BCF有较好的线性关系,可得到t'_R与BCF的关系式:InBCF=A'+B'Int'_R 4.用RP - HPLC测定农药的K_oc是在流动相甲醇:水为70:30的条件下建立相关方程:同系列方程:InK_oc=0.2651+4.0764Int'_R 非同系列方程:InK_oc=1.1924+3.2825Int'_R 基准方程:InK_oc=1.8431+0.9629Int'_R 5.由于S_w可用RP - L LPLC测定,因而可以预测农药在水体中的挥发作用K_wa=C_w/C_a=S_w×8.26×10~6×T/P×M×10~6进而又可预测其在土壤中的挥发性K_wa=C_(wa)/C_a=C_w/C_a(1/г+K_d)

一测多评法同时测定小儿金翘颗粒中7种成分的含量

目的:建立同时测定小儿金翘颗粒中7种成分含量的方法。方法:采用一测多评法(QAMS)。色谱柱为Lubex Kromasil C18,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为326 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为40℃,进样量为10μL。以绿原酸为内参物,计算新绿原酸、隐绿原酸、连翘酯苷A、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C的相对校正因子;考察不同色谱系统、色谱柱、流动相比例、流速、柱温等对相对校正因子的影响,并采用两点校正法结合相对保留时间校正法对各成分进行色谱峰定位。分别按QAMS法和标准曲线法检测7种成分的含量,并进行比较。结果:新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、连翘酯苷A、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C检测质量浓度的线性范围分别为9.27~92.70、37.36~373.60、13.02~130.20、7.15~71.50、4.56~45.60、6.32~63.20、14.69~146.90μg/mL(r≥0.9997);定量限分别为1.38、1.41、1.40、1.99、1.10、1.17、1.10 ng,检测限分别为0.41、0.42、0.42、0.60、0.33、0.35、0.33 ng;精密度、重复性、稳定性试验的RSD均小于2%,平均加样回收率为98.28%~99.15%(RSD<2%,n=9)。新绿原酸、隐绿原酸、连翘酯苷A、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C相对于绿原酸的相对校正因子分别为0.995、1.007、0.580、1.243、1.252、1.247;不同色谱条件下其相对校正因子的RSD均小于3%。采用两点校正法结合相对保留时间校正法预测的各待测成分的保留时间与实测值的相对误差绝对值均小于2%。QAMS法测得的含量分别为2.790~3.416、14.526~17.907、3.763~4.531、1.625~1.982、1.087~1.523、1.434~2.219、3.631~5.078 mg/g,标准曲线法测得的含量分别为2.811~3.438、14.512~17.893、3.739~4.508、1.656~2.012、1.108~1.544、1.460~2.245、3.597~5.045 mg/g;两种方法测得含量的相对误差均在±2%以内。结论:两点校正法结合相对保留时间校正法能准确定位各成分色谱峰;所建QAMS简便、快捷、准确、可靠,可用于同时测定小儿金翘颗粒中7种成分的含量。

替代对照品法在中药多指标含量测定中的应用与技术要求探讨

本文分析和归纳了替代对照品法的国内外应用情况及研究中存在的问题,定量方面提出相对校正因子为物质百分吸光系数之比,并以此为基础分析了影响定量准确度的因素,认为波长和对照品为影响定量的关键因素;比较了相对保留时间法和对照提取物定性法等7种定性方法的优缺点;在方法实用性方面,提出色谱仪校正和色谱柱相似度评价等可能的研究方向;为该法的后续研究提供参考。

基于数据预处理的板蓝根注射液指纹图谱模式识别

中药色谱指纹图谱具有成分复杂、图谱基线和成分保留时间易受外界因素干扰等特点。本文对获得的色谱指纹图谱进行基线校正和色谱峰保留时间校正的数据预处理,不需色谱峰的积分,直接用各色谱信号的全谱数据评价相似度、主成分投影分析和谱系聚类分析,将各厂家的注射液样本正确分类并检出其中的异常样本,为处理和评价中药色谱指纹图谱数据,提供客观、便捷的方法。