血浆样本在4℃环境下保存时间对PT、APTT、TT、FIB、DD结果的影响

目的探讨血浆样本在4℃环境下不同保存时间对凝血项目[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、凝血酶时间(TT)和D-二聚体(DD)]结果的影响。方法收集苏州市立医院2023年9月—10月住院病人30例抗凝全血标本,采用仪器法检测凝血项目。标本采集后,立即离心分离血浆后检测PT、APTT、FIB、TT和DD,结果记录为初始值(Once),标本离心后分离的血浆,分别在4℃保存2、4、6 h后上机检测,记录结果并汇总统计分析。结果PT、TT在4℃下保存6 h,结果未出现显著变化。APTT在4℃下保存4 h,结果未出现显著变化;保存6 h后,结果有显著差异。FIB、DD 4℃下保存2 h后,结果出现显著差异。结论标本分离血浆后,PT、APTT、TT在4℃下可稳定4~6 h,而FIB、DD需在采集标本后及时检测,以保证结果的可靠及准确性。

不同样本保存条件对鼻咽拭子呼吸道病原体的影响分析

研究不同样本保存条件下对鼻咽拭子呼吸道病原体的影响效果。方法 选择2022年1月至2023年12月期间收治的12例病例样本,在不同条件下保存不同时间,对各种保存条件下样本通过实时荧光定量PCR技术检测的结果。结果 室温20℃,和保存0h下相比,腺病毒以及支原体病毒保存6h、12h、24h下的Ct值比较(P>0.05),保存48h、96h、192h下Ct值比较(P<0.05);甲流病毒、乙流病毒保存6h、12h下,Ct值比较(P>0.05),保存24h、48h、96h、192h时的Ct值会明显增加(P<0.05)。在室温下保存下,腺病毒、支原体病毒、甲流病毒以及乙流病毒样本的阳性减弱程度存在明显差异。在4℃保存条件下,和0h相比,腺病毒以及支原体病毒在保存6h、12h、24h、48h、96h下Ct值比较(P>0.05),保存192h后,样本的Ct值会显著提升(P<0.05),甲流病毒以及乙流病毒在保存6h、12h、24h、48h下,其Ct值比较(P>0.05),保持96h、192h下,其Ct值会提升。在4℃的保存在,腺病毒以及支原体病毒的样本阳性程度会逐渐降低,甲流病毒以及乙流病毒可能会产生假阴性反应;在-20℃的保存在,和保存0h相比,腺病毒以及支原体病毒在6h、12h、24h、48h、96h、192h下,Ct值比较(P>0.05),甲流病毒以及乙流病毒在保存6h、12h、24h、48h、96h下,Ct值比较(P>0.05),但在保存192h下,其Ct值会显著改变(P<0.05);在-80℃的保存下,和保存0h相比,腺病毒、支原体病毒、甲流病毒以及乙流病毒在保存192h下,Ct值比较(P>0.05)。结论 鼻咽拭子呼吸道病原体中,在不同样本保存条件下,其Ct值各不相同,在保存运输样本过程中,应尽可能的保持低温保存,减少保存时间,避免影响检验结果。

样本保存液和超低温冰箱保存对RT-PCR实验结果的影响

目的:通过对两种新鲜组织保存方法的比较,探讨一种简便、有效的用于抽提RNA的保存新鲜组织的方法。方法:采集人新鲜子宫内膜组织标本38例,其中26例组织用样本保存液(RNAstore Reagent)常温保存,12例组织冻存于-80℃冰箱,1周后提取总RNA。β-Actin基因mRNA的表达水平通过两种方法检测。一种经1.0%琼脂糖凝胶电泳,溴化乙锭染色,紫外透射仪下观察分析,另一种是使用ABI PRISM 7500 PCR仪进行荧光定量PCR检测。比较两组间β-Actin基因的光密度值和平均CT值的差异。结果:两种方法保存的新鲜组织标本均出现305 bp的目标带。OD值分别为2 368.24±678.01和2 493.35±696.181,平均CT值分别为13.64±3.31和14.08±1.57,两组之间无显著性差异(P>0.05)。结论:在没有超低温冰箱的情况下,样本保存液(RNAstore Reagent)可以用来保存新鲜组织样本。

高血压项目临床检测样本保存和稳定性标准化研究

目的探讨不同保存温度和时间条件下高血压五项检测血浆样本的稳定性。方法收集20例Renin、ALD、ACTH、Cortisol水平不同的受试者样本,分别保存在不同温度(常温、4℃、-20℃、-80℃)和不同时间(24h和48h),另外20例AⅡ水平不同的受试者样本,分别在不同时间(即时、2h、4h、8h、12h、24h)添加酶抑制剂,并在不同温度和时间(常温下2h、4h、6h、8h,4℃下4h、8h、12h、24h,-20℃下12h、24h、48h、72h)下保存,计算偏倚。结果在室温保存条件下,Renin浓度在24h内降低9%,而4℃条件下保存,24h内升高14%,在-80℃保持稳定。ACTH浓度在室温保存下降低32%,-20℃和-80℃条件下保存比较稳定。ALD和Cortisol浓度受保存温度及时间变化影响较小,48h内变幅在5%以内。AⅡ在采血后的不同时间段添加酶抑制剂,8h后升幅超过10%;样本采集后立即添加酶抑制剂,在常温保存8h条件下及4℃下保存24h后均减少超过50%,而在-20℃条件下48h降幅在10%以内。结论 Renin和ACTH需在-20℃以下的低温保存,ALD和Cortisol对温度没有要求,AⅡ需立即加入酶抑制剂并尽快检测,如果不能尽快检测,需分离血浆后保存在-20℃条件下,并在48h之内完成检测。本研究为临床检验制定完善的高血压五项样本保存条件提供了依据。

广西化学中毒急救现场样本采集与保存装备以及个体防护用品装备调查

对广西地级市的所有实验室的现场样本采集与保存装备与个体防护用品装备进行调查,发现上述装备配备不足,应尽快增加上述装备的储备和购置,加大对化学中毒专项经费的投入,努力创造用最短的时间来应对突发化学中毒事件。

干化学法和湿化学法对24h尿蛋白定量检测的比较及样本保存条件研究

目的比较罗氏Cobas 501和天津果实Hipee M1生化分析仪24h尿蛋白定量检测结果的一致性,探讨样本保存条件对检测结果的影响。方法使用Cobas 501和Hipee M1两台生化分析仪分别对119例尿液常规标本进行24h尿蛋白定量检测,比较检测结果的相关性和一致性。通过混合尿液样本进行不同保存环境以及添加不同防腐剂测试,研究24h尿蛋白样本保存方法对测试结果的影响。结果两台生化分析仪的质控检测结果的变异系数分别为2.31%~5.61%和3.25%~5.22%,具有很好的重复性。两台生化分析仪尿液样本检测结果经回归分析,检测结果的一致性符合要求,差异无统计学意义(r=0.991,P>0.05)。尿液样本(2~8)℃冷藏保存、使用防腐剂二甲苯和硼酸在常温条件下保存,24h尿蛋白在各个时间点的检测结果,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论Cobas 501和Hipee M1两台仪器之间无明显差异,均具有较高的稳定性,使用硼酸作为防腐剂可用于尿液样本的常温保存。

分离胶真空采血管样本保存时间对生化指标测定结果的影响

传统分离血清的方法需要手工操作，处理步骤较多且繁琐、工作量大、血块收缩时问长，血清还常有小凝丝，可引起结果不准确，甚至堵塞加样针管，采用分离胶制备的血清克服了上述缺点，目前已广泛应用于血液检测和血清分离。但分离胶真空采血管样本不同保存时间对检测结果的影响尚待进一步研究。作者选取本院2010年6月健康体检人员为研究对象，对分离胶试管采取的标本在不同保存时间对临床生化检测结果的影响进行比较分析。结果报告如下。

用于粪便DNA检测的样本保存液制作和效果评估

目的:研发一种粪便样本保存液,可用于结直肠癌早筛人群粪便样本的常温保存与运输,且保存样本可用于后续粪便样本DNA检测。方法:改良配方,配制自制粪便样本保存液,将其用于常温保存粪便样本3和7 d,以及7 d内-80℃冻融一次后,采用琼脂糖凝胶电泳定性及实时荧光定量PCR(qPCR)检测人源看家基因β-globin的DNA拷贝数测试其阻遏DNA降解及微生物增殖的效能,并与RNAlater进行比较。自制粪便样本保存液应用于501例结直肠癌筛查人群,采用qPCR检测人源看家基因ATCB的DNA拷贝数,评估其对粪便DNA的保存效能。结果:自制保存液常温保存粪便样本3和7 d后琼脂糖凝胶电泳结果显示β-globin条带无明显变化,qPCR结果显示ΔC_(t)≤0.2;采用自制保存液保存粪便样本并在7 d内-80℃冻融一次条件下,琼脂糖凝胶电泳结果显示β-globin条带无明显变化,qPCR结果显示ΔC_(t)<1;与RNAlater相比,自制保存液保存粪便样本的条带更单一,ΔC_(t)值变化更小。应用于结直肠癌筛查人群时,自制粪便样本保存液保存的样本合格率>70%,明显优于未使用保存液的样本合格率(<40%)。结论:本研究开发了一种经济有效的粪便样本保存液,既不需要冷链运输,又能较长时间保存粪便DNA完整性并抑制微生物的增殖,为将其用于大样本量结直肠癌人群的早期无创筛查提供研究基础。

流式样本保存时间对肝癌患者外周血T淋巴细胞和NK细胞的影响

目的观察样本保存时间对流式细胞仪检测肝癌患者外周血T淋巴细胞亚群的影响。方法随机选取肝癌患者16例,采血后6 h内分离外周血单核细胞,将细胞分成五组,包括立即上机组、4℃PBS保存1 d、2 d、3 d及5 d检测组,分别进行流式检测。结果样本保存3 d组淋巴细胞的物理参数发生变化;样本保存3 d组CD3+T淋巴细胞百分比显著降低(P <0. 05);样本保存3 d组NK细胞百分比显著降低(P <0. 05)。结论临床样本在收集后进行外周血单核细胞分离,将细胞用PBS于4℃条件下保存3 d内进行淋巴细胞和NK细胞的上机检测结果比较稳定。

北方地区针叶树外生菌根真菌样本的采集与保存

随着对菌根研究的不断深入,菌根研究在林业上的作用逐渐被重视。文章总结了外生菌根真菌调查、采集和保存的方法。

不同采血管对血清胃泌素17样本保存时间的影响研究

目的探讨不同采血管对血清胃泌素17样本保存时间的影响。方法使用不同厂家的采血管采集样本,在不同时间点检测胃泌素17的含量,与首次检测结果比较,降幅在10%以内作为样本保存时间的判定标准,分析不同厂家采血管采集的样本保存时间。结果普通管样本,不同厂家的保存时间均小于4 h;促凝管和分离胶促凝管样本,河南驼人、广州阳普、武汉致远的保存时间可长达5 d;浏阳三力、江苏康健、积水医疗的保存时间均小于1 d。结论临床在检测胃泌素17时,推荐优选促凝管和分离胶促凝管进行样本采集。临床实验室使用前,建议先对所选的促凝管和分离胶促凝管进行胃泌素17稳定性验证。

精液样本保存方式对精子DNA碎片率检测影响的实验研究

目的研究精液样本新鲜度对精子DNA碎片率(DNA fragmentation index,DFI)检测结果的影响,探讨在实际工作中该如何正确保存样本。方法随机选择38份2020年12月期间柳州市妇幼保健院生殖中心男科门诊日常送检的精液样本,采用流式细胞术(flow cyto metry,FCM)进行精子DFI检测,每个样本充分液化后混匀分成4等份,分为A,B,C和D共4组:A组当即检测,然后放置室温保存,每2h再测1次,共测得A1,A2,A3三组数据;B组放置2℃~8℃冰箱保存,每24h检测1次,连测3天,共获得B1,B2,B3三组数据;C组放置-20℃冰箱冷冻,每周解冻测1次,测完放回冰箱复冻,连测4周,共获得C1,C2,C3,C4四组数据;D组放-20℃冰箱冷冻,30天后解冻检测1次,获得D1组数据。将新鲜样本当即检测组(A1组)作为对照组,与其他组的DFI结果进行单因素配对t检验,验证样本在不同保存方式下的结果变化。结果A1组DFI较A2,C1,C2,C3,C4和D组[14.33(5.72~22.94)%vs 14.68(6.72~22.54)%,14.59(6.52~22.66)%,14.73(6.62~22.95)%,14.91(6.89~22.93)%,14.96(7.20~22.72)%,14.65(6.85~22.45)%],差异无统计学意义(t=-0.827,-1.003,-1.483,-1.834,-1.786,-0.844,均P>0.05);A1组DFI低于A3,B1,B2,B3组[14.33(5.72~22.94)%vs 16.44(8.07~24.81)%,20.99(11.93~30.05)%,20.71(11.19~30.23)%,23.10(12.57~33.63)%],差异具有统计学意义(t=-3.091,-6.172,-5.108,-6.056,均P<0.05)。结论为保障精子DFI检测结果的可靠性,精液样本应在采集后2h内完成检测,样本在室温或2~8℃放置时间过长会使检测结果偏高,若需较长时间保存建议及时将新鲜样本放置-20℃冰冻保存,时长可达一个月。

testo Saveris为疾控中心样本保存提供监测保障

日前,德图testo Saveris温度监测系统服务疾病预防控制中心,为其提供整套监测系统的方案设计,现场勘察、安装、调试到交付使用,以及后期的维护保养;保证实验过程和分析所需样本等的储存安全,实现过程温度的连续监测和超限本地或远程报警,以及事件的可追溯。据了解,该套系统主要应用于疾控相关实验室设置的样本保存间、血清保存、菌株保存等的超低温冰箱的监测和及时报警。整个系统采用高精度的PT100温度传感器,为样本的环境监测提供精确的数据保证;系统符合FDA21CFR Part11要求,满足GMP和GSP要求及附录《温湿度附录监测系统》关于监测系统要求。德图也为药品生产企业和第三方冷链公司提供专业的仓库验证咨询服务,为企业进行GSP认证符合性提供有效的系统和验证支持。

灭活型保存液对甲型流感病毒核酸检测结果的影响

目的通过大样本甲型流感病毒感染阳性标本的检测,明确灭活型样本保存液在不同保存条件和保存时间对甲流病毒核酸检测结果的影响。方法对2022年2月至2022年3月山西白求恩医院疑诊流行性感冒的2377名患者同时采集两份口咽拭子标本,一个拭子放在含有灭活型保存液的采集管中,另外一个拭子放在含有非灭活型保存液的采集管中。标本在生物安全二级实验室中分装在3个EP管中,1管即刻(采集后4小时内)进行核酸检测,另外两管分别保存在冷藏条件(2~8℃)和冷冻条件(-20℃以下),48小时后进行核酸检测。采用实时荧光逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法对其进行病毒核酸检测。结果不一致时采用第二种核酸检测试剂进行比对。比较两种保存方法、保存条件和保存时间对病毒载量的检出差异。结果即刻检测时两组甲型流感病毒的阳性检出率相同,均为74.5%(1771/2377),非灭活组平均循环阈值(Ct)值为(29.60±3.99),灭活组为(31.30±2.67),差异无统计学意义(t=0.35,P>0.05);2~8℃和-20℃以下分别保存48小时后两组甲型流感病毒的阳性检出率无变化:非灭活组的平均Ct值为(31.70±4.91)和(30.30±4.03),灭活组为(33.90±5.11)和(32.20±4.62),差异无统计学意义(t=0.67、0.54,P>0.05)。结论灭活型样本保存液不影响甲型流感病毒qPCR核酸检测的结果,在灭活型样本保存液中于2~8℃或-20℃条件下可至少稳定保存48小时。

食品微生物检验样品采集和保存的注意事项及其检验技术

避免和降低食品受到微生物污染是保证食品安全的重点工作内容。微生物污染食品具有广泛性和不确定性的特点,这需要在实际工作中做好食品微生物检验工作,从而保障食用者食品安全。食品微生物检验样品的采集与保存是保证微生物检验工作质量的基础,也是影响检验结果的重要因素。在食品微生物检验样本采集和保存时,要保证采集过程中的无菌操作;选择具有代表性的样品并做好密封、检查标志;保存和运输期间尽可能保持原样。同时,要根据实际情况和可能污染微生物种类的不同,选用不同的检验技术,切实保证检验质量。

器官移植生物样本库的建立及意义

目的探讨规范化的器官移植生物样本库建立对器官移植领域研究提供优质样本的应用价值。方法选取2014年9月-2016年9月天津市第一中心医院生物样本库经过采集、处理及保存流程储存的生物样本。样本均为依据国际环境与生物样本库协会(ISBER)和中国医药生物技术协会组织生物样本库分会制定的规范化生物样本。随机抽取200例恶性肿瘤肝移植患者保存的肿瘤样本石蜡切片,苏木素-伊红(HE)染色法检测肿瘤坏死程度,琼脂糖凝胶电泳条带分析肿瘤组织内DNA和RNA的完整性。结果随机抽检200例储存的恶性肿瘤样本中,HE染色切片病理分析显示其中192例(占96%)肿瘤面积≥80%。组织中RNA的A260/A280均在1.9~2.0,琼脂糖凝胶电泳显示28S及18S色带清晰,无拖尾现象,表明RNA的完整性良好。组织中DNA的A260/A280均在1.8~1.9,凝胶电泳检测显示DNA条带清晰无明显降解。结论建立规范化器官移植样本采集、处理及保存方法可为器官移植领域的科研提供优质的样本资源。

不同保存温度及高温灭活处理对RNA病毒保存效果的影响

目的:探究不同保存温度及高温灭活处理对在常用的RNA病毒样本保存液中保存效果的影响。方法:以禽IBV冠状病毒(弱毒株)作为模型,采用等渗盐溶液Hank’s液、胍盐保存液和市售商品化CWY076保存液保存禽IBV冠状病毒时,比较高温灭活过程对病毒核酸完整性和后续荧光定量PCR核酸检测的影响。结果:保存在常用Hank’s液中的样本,经60℃灭活30 min后采用荧光定量PCR检测循环阈值(Ct值)显著增加(P<0.05),且病毒检测灵敏度仅达到病毒原液的10-6稀释梯度;而保存在自配胍盐保存液中的样本在-80℃和4℃下保存7 d,60℃灭活30 min后,病毒检出率与检测灵敏度则无明显影响;但在37℃保存7 d后,检测灵敏度降为10-6稀释梯度;保存在商品化CWY076保存液(康为世纪产品)中的样本,在-80℃、4℃和37℃下保存7 d后,以及60℃灭活30 min,对病毒检出率与灵敏度均无明显影响,在10-7稀释梯度的检出率仍为91.70%。结论:采用Hank’s保存液无法在灭活处理过程中有效保存RNA病毒样本,而在胍盐保存液和市售CWY076保存液中均能在60℃灭活处理后有效保证后续荧光定量PCR核酸检测过程中病毒RNA核酸的检出率,其中在CWY076保存液中保存的效果优于其他保存液,即便在37℃条件下保存7 d后,RNA病毒仍保持很高的检出率和检测灵敏度。

谈高校图书馆样本书的开发利用

高校图书馆一般都建有样本书库。样本书也称保存本,库本书。样本书的建立,其优点是保护入藏图书的品种,满足本校教师和科研工作者的长远需要,为其提供藏书品种的保障,但这种制度也存在着明显的缺欠、即减少了第一线用书数量、降低了图书的利用率,有些图书因宣传不力变成死书,降低了读者对图书馆的满意程度。以往样本书的使用,只是在外借和内阅不足时才能查找使用,平时只是典藏保管,这种作法是不符合现代图书馆建馆思想的,高校图书馆藏书建设唯一目的就是利用,特别是在目前书价大幅度上涨,购书经费严重不足,藏书复本极低的情况下,把本来有限的入藏图书的一部分提取成样本保存起来,严格限制其使用,这明显是一种文献资源的浪费。面对这样的现实,样本书不能再象以前一样的保管了。各馆都在寻求更好的办法。一笔者拟结合我馆具体情况,就高校图书馆样本书如何开发利用,谈一点粗浅的看法。

保存植物的专门诀窍

你家附近的自然史博物馆很可能收藏有丰富多彩的当地植物。在整个美国，这类收藏品提供了绝好的实物记录，使现在和未来的生物学家能够利用它们来研究土生土长的植物怎样在对自然和人类因素的反应中生活。历史上业余爱好者们对于这一植物学档案的形成曾起了关键的作用，特别是从Mcriwcthcr Lcwis和William Clark在西北地区进行了探险考察之后更是如此(他们保存并带回了数百种当时科学界尚不知晓的植物)。