基于适配体亲和磁珠的黄曲霉毒素B_1单样本前处理试剂盒的制备及应用

黄曲霉毒素B_1(aflatoxin B_1,AFB_1)适配体共价偶联于磁珠表面制备适配体亲和磁珠(aptamer affinity magnetic beads,AAMB),将AAMB、孵育液、洗涤液和洗脱液预封装于试剂条中开发了AFB_1单样本前处理试剂盒,借助真菌毒素全自动净化仪实现了AFB_1前处理的自动化,使用超高效液相色谱仪对洗脱液中AFB_1的含量进行测定。通过优化磁珠粒径、适配体间接臂长度、适配体亲和磁珠用量、孵育液体积确定了AAMB的制备条件以及AFB_1单样本前处理试剂盒的使用条件,对比了手动和自动两种前处理方式下AAMB回收率的差异。在优化条件下,AFB_1的检出限(limit of detection,LOD)为0.6 ng/mL,玉米和小麦中低、中、高三个水平的加标回收率在92.8%~110.1%之间,日内精密度的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)小于5.1%,日间精密度的RSD为6.7%,具有良好的灵敏度、准确性和重复性;粮油基质(玉米、糙米、花生油和花生酱)中AFB_1成分国家有证标准物质的测定结果在其扩展范围内,具有良好的基质适用性。开发的单样本前处理试剂盒借助真菌毒素全自动净化仪仅需一步操作即可在20 min内自动完成10个样品的前处理,具有时间短、通量高、批次间差异小的优点,在真菌毒素定量检测方面具有良好的应用前景,为开发针对其它靶标的自动化前处理方法奠定了基础。

样本前处理对神经元特异性烯醇化酶检测的影响

目的探讨样本前处理对神经元特异性烯醇化酶(NSE)测定的影响。方法采用Roche E170分析仪检测在不同处理方法下收集的血清NSE含量。结果 3种不同方法处理标本采集血清,NSE检测结果有显著差异,试管左右摇动后,离心的样本NSE结果最高。结论样本前处理对NSE检测存在严重影响,避免在离心前对样本进行混匀。

LAS样本前处理流程监控的实现

目的建立临床实验室信息系统(c lin ical laboratory inform ation system CLIS)对实验室自动化系统(laboratory autom ation system LAS)的样本检测前处理流程进行实时监控,实现“高品质、高效率、高自动化”管理。方法在临床实验室信息系统的信息流管理支撑下,根据医嘱条码信息,实现CLIS实时监控LAS上的样本按检测项目分类及随机编号、离心与开盖及根据实验要求完成样本分杯和将离线检测样本传送到特定区域待检的前处理流程。结果建立完善实验室内检测的信息化监管系统,利用LAS强大的样本处理功能,改变以往样本检测前处理流程中无法有效节点实时监控,规范实验室检测管理。结论CLIS对LAS的样本检测前处理流程的实时监控,实现CLIS有效的实验室业务流监控机制,对于规范实验室管理具有重要意义。

消化道肿瘤单细胞转录组测序研究中生物样本前处理改良的探索

目的:探索在消化道上皮源性肿瘤单细胞转录组测序(简称单细胞测序)中提高组织单细胞悬液中上皮细胞占比的方法,以改善检测样本质量。方法:分析GEO公共数据库内常见消化道上皮源性肿瘤(胃癌、结肠直肠癌及胰腺癌)单细胞转录组测序数据集中的上皮细胞组分占比。比较传统酶消化法以及酶消化后辅以上机前机械性物理吹打法(改良法)处理后单细胞悬液中上皮细胞占比和细胞活力差异。结果:分析公共数据库内数据显示,4份正常胃上皮及胃癌样本的上皮细胞占比为17.05%、6.11%、8.93%和14.66%;2份结肠直肠癌上皮细胞占比为3.86%和16.60%;2份胰腺癌上皮细胞占比为3.22%和21.37%。对2份新鲜采集的胃癌样本,采用传统酶消化法制备单细胞悬液的细胞结团率为56.26%±1.98%和38.34%±1.26%,细胞活力检测提示活细胞占比分别为98.43%±0.56%和97.24%±0.48%;而对传统酶消化法处理后的单细胞悬液在上机前用0.33 mm规格的胰岛素注射器施以机械性吹打操作30 s,可使单细胞悬液的上皮结团率降至22.78%±1.38%和14.46%±0.92%(P均<0.000 1);活细胞占比分别为95.16%±0.42%和93.52%±0.82%(P<0.05)。结论:在采用传统酶消化后辅以机械性物理吹打法的组织样本前处理操作,可减少上皮细胞结团,从而提高单细胞悬液中的上皮细胞占比,活细胞占比虽有小幅下降,但可满足上机要求。

日立样本前处理系统结构组成及故障维修

本文介绍了日立样本前处理系统的组成及常见故障的分析、解决过程。

浅析微生物样本全自动前处理系统WASP■的维护保养

临床微生物样本种类繁多,操作复杂,样本接种是微生物实验室最耗费人力的工作之一,但其培养出的致病菌直接影响后续的菌株鉴定/药敏试验,因此对微生物样本接种实现全自动化、标准化是提升实验室整体效率的关键步骤。微生物样本全自动前处理系统WASP■(Walk Away Specimen Processor)是一种全自动接种微生物样本的设备,该设备的使用使实验室向全自动化迈出了重要的一步。由于WASP■的重要性及设备结构功能的复杂性,对其进行维护保养,对减少设备故障、延长使用寿命显得尤为重要。维护保养工作需要由经过培训的人员来完成,要注重日常维护保养和预防性维护保养,在使用过程中也要注意正确使用,避免由于人为错误导致WASP?出现故障和造成样本破坏。

瓶内处理技术结合快速LC-MS提高利培酮血药浓度测定效率

目的 评估“瓶内处理”(Bottle-in)技术结合快速LC-MS的方法学特性,并验证其对治疗药物监测技术自动化和标准化的促进作用。方法 选择利培酮及其主要代谢物9-羟利培酮作为研究对象,针对两种血样前处理技术——Bottle-in技术与实验室现行的常规处理(RP)技术,建立并验证相应的LC-MS检测方法。实验设计遵循CLSI EP9-A3指南,对60例服用利培酮的患者血液样本应用两种方法进行利培酮和9-羟利培酮浓度的测定,并记录样本的报告时间。采用Spearman相关性分析、Passing-Bablok回归分析、Bland-Altman一致性检验以及医学决定水平(MDL)预期偏倚分析,对两种方法的检测结果进行相关性和差异性评价。结果 两种前处理技术下的LC-MS方法在测定利培酮和9-羟利培酮血药浓度时,均满足方法学验证的标准。在60例患者的样本中,两组结果均未出现异常值,显示出强烈的相关性(P<0.01)。Passing-Bablok回归模型显示了良好的线性关系。Bland-Altman一致性检验结果表明,两者具有高度一致性。MDL预期偏倚分析进一步证实,两种检测方法的结果未出现显著性偏倚,预期偏倚值(Bc)均在可接受的偏倚限值范围内。Bottle-in技术较RP技术在前处理时间上可节约66.67%,结合快速LC-MS技术对12例患者样本进行检测,全流程检出时间上Bottle-in组较RP组能缩短12.50%的时长。结论 Bottle-in技术凭借其高效的前处理方式,提高了药物监测技术自动化和标准化,可作为替代RP技术的一种有效方法,成为现代临床药学监测中的一项重要进展。

全自动样本分拣前处理系统及其应用

临床实验室自动化、信息化和智能化的不断提高使检验结果的准确性逐步提高,回报时间（turnaround time,TAT）逐步缩短。最近,我院在国内率先引进德国MUT公司HCTS2000全自动样本分拣前处理系统,并与医院信息系统（HIS）和实验室信息系统（LIS）无缝联接,实现了封闭试管样本智能化和自动化的接收、分拣,提高了工作效率,有效缩短了TAT,避免了人为差错。现以HCTS2000为例介绍全自动样本分拣前处理系统及其应用。

医院自动血液样本检验前处理系统的设计

目的:设计一种医院自动血液样本检验前处理系统。方法:利用RS-485总线控制结构,通过开发AT89C2051的单片机模块控制技术实现传送带和机械手等各部件的控制,以完成医院血液样本检验前处理过程的自动化。结果:由医师为每个患者的血液样本设置需要进行的检验方式并生成条形码,前处理系统根据扫描条形码信息完成指定的检测前处理任务,包括分送样本、保存样本物流在各节点的实时状态、对血液样本进行离心处理等血液检验的流水线操作。系统可实现全自动控制,无需人为操作。结论:该医院自动血液样本检验前处理系统具有自动化程度高,使用方便,杜绝人为操作失误,出现问题后易追溯等优点。

化学检测样品前处理技术

在分析化学当中,样品的前处理技术占据了比较重要的地位。有关技术的分析以及研究直接影响了化学检测技术的健康发展。各类样品前处理技术以及方法逐渐变为目前分析化学主要的发展方向。因此,论文在对这项技术的内容及特点进行介绍的基础上,分析了固相萃取技术、超临界的流体萃取技术以及离子液体分散的液相微萃取技术。

食品农药残留检测中样品前处理技术探究

食品安全直接关系人们的身体健康,一直是全社会关注的热点问题,农药残留是影响食品安全的重要因素,加强对食品安全的有效管理需要做好农药残留检测。样本前处理技术是食品中农药残留检测非常关键的环节,直接影响检测结果准确性。本文的详细分析了食品中农药残留检测的样品前处理技术,以期为食品安全监管部门提供技术支持。

化学样品前处理技术研究进展

分析了化学分析样本前处置方法的关键地位、类型与研究进展状况,且对超临界物质提取、固液相提取、膜分离法等几类近些年发展迅速的样本前处理新办法的原理与特征进行了分析,这类方法可以明显减少在分析环节因样本前处置时造成的偏差,操作过程方便快捷,而且能和分析检测联用,实现操作过程的智能化。

免疫磁性分离技术在病原微生物检测中的应用

免疫磁性分离技术是通过磁场作用使得磁珠表面所吸附的靶标物从样品中分离的前处理技术。免疫磁珠捕获靶标后,免疫磁珠-靶标复合物磁吸固定在管壁,洗脱杂质即可得到靶标。免疫磁性分离技术富集效果主要受抗体特异性、磁珠直径、磁珠添加量、孵育时间和样本pH影响,其中抗体特异性是影响磁珠富集效果的关键。利用免疫磁珠可吸附抗体的特性,在酶联免疫吸附测定方法中替代包被步骤,可大幅减少检测时间;免疫磁性分离技术作为前处理方法,与其他检测方法联用后,可提高检测方法的灵敏度和检测效率。笔者从免疫磁性分离技术原理、一般分离步骤、常见影响因素,以及在酶联免疫吸附测定、免疫层析法、PCR、实时荧光定量PCR、环介导等温扩增反应、流式细胞术、电化学传感器、液相色谱法等应用方面进行阐述,为免疫磁性分离技术的研究及推广提供参考。

新型冠状病毒核酸检测7种振荡混匀方法效果评价

目的对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测7种振荡混匀方法进行比较,确定有效方法的最优参数。方法分2个阶段进行研究:第1阶段,采用小样本(每种方法30例),从形态学、流式细胞术、实时荧光聚合酶链反应(PCR)3个层面评价7种振荡方法的有效性,并确定最优时间参数;第2阶段,采用大样本(2150例),验证最优参数下多管涡旋和超声振荡的效果。结果形态学和流式细胞术分析结果显示,除超声振荡外,其他6种振荡混匀方法均会导致保存液中上皮细胞明显增多(P<0.05)。实时荧光PCR结果显示,颠倒和回旋振荡处理后,核酸扩增未见内参循环阈值(Ct)明显下降(P>0.05);吹打6次和往复振荡5 min处理后,核酸扩增未见内参Ct值下降;单管/多管涡旋和超声振荡处理后,核酸扩增内参Ct值显著下降(P<0.0001)。大样本量实时荧光PCR结果显示,多管涡旋振荡2 min较超声振荡5 min效果更优(P<0.0001)。结论SARS-CoV-2核酸检测采用2min涡旋振荡混匀的方法进行前处理可提高检测效率。

盐析辅助均相液液萃取法在体内药物分析中的应用进展

盐析辅助均相液液萃取(SHLLE)法是利用盐使均相混合溶液产生相转变分离现象,并同时萃取目标分析物的新型液液萃取法。近年来,SHLLE法在体内药物分析中的应用备受关注,技术日益成熟。综述SHLLE法的原理和应用条件及其在体内药物分析领域的应用进展,探讨盐析给后续分析带来的问题及其解决方法,并介绍高通量SHLLE的实现和发展。

气质联用技术在基因毒性杂质检测中的应用进展

基因毒性杂质在极低暴露水平下就可能导致DNA损伤,从而引发肿瘤,对患者的健康造成威胁。药物中基因毒性杂质的控制已经成为各制药企业和药监机构关注的焦点。气质联用技术是目前较为成熟的用于基因毒性杂质的分析检测方法之一。本文概述了气质联用技术结合不同的前处理方法在卤代烷烃、磺酸酯、环氧化物、芳香胺及肼类化合物等5种基因毒性杂质检测中的应用,期为药物中基因毒性杂质的检测提供参考。

基于渐进式、开放式架构的实验室自动化系统设计

实验室自动化系统技术在近年来得到了极大的发展,目前限制其取得更广泛地应用的主要瓶颈是其高昂的成本与低兼容性,具体体现在一次性初始设备投入大、实验室原有仪器设备难以兼容复用。该文提出了一种系统实现思路,通过支持渐进式升级来降低初始应用成本,通过开放式架构和接口来实现对不同仪器设备的无缝连接。在此思路下,该文详细探讨了开放式架构设计所需遵循的机械、电气通信、信息交互等方面的标准,及系统实现过程中涉及到的关键技术点。

基于液相色谱-串联质谱技术的治疗药物监测方法研究进展

液相色谱-串联质谱技术具有高特异性、高通量的特点, 因此在临床检验领域有快速的应用和发展, 其在治疗药物监测中的应用可有效提升定量准确性与灵敏度, 为患者制定个性化的最佳给药方案。但该技术目前仍面临一些挑战, 自动化、质量控制、量值溯源等将是今后的发展方向。

采用随机聚合酶链反应方法对临床样本中未知核糖核酸病毒检测的研究

目的探索一种不依赖于病毒培养,直接对临床样本中未知核糖核酸(Ribonucleic Acid,RNA)病毒作出鉴定的分子生物学方法。方法对经前处理后的临床样本提取病毒RNA,进行随机聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)扩增,通过对扩增产物的纯化、克隆、测序以及序列的在线比对,根据同源性确定核酸片段的来源,并最终实现对未知病毒的鉴定。对临床样本的前处理以及前处理方法的优化,即通过冻融、离心、过滤、聚乙二醇浓缩,以及核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶的处理,尽可能地去除样本中的无关核酸,以增大病毒核酸在样本中所占比例,提高阳性检出率。结果通过对样本前处理方法的改进,从病毒载量为4.8×103Copy/ml(拷贝/毫升)的含漱液样本中,以70%的阳性克隆率检测出未知RNA病毒。结论所建立的方法能提高对RNA病毒鉴定的阳性率,这将在不明原因传染病病原体的鉴别诊断中,发挥重要的作用。