核不均一性核糖核蛋白A2/B1在脑缺血再灌注大鼠脑皮质分布的变化

目的研究大鼠脑缺血再灌注损伤后核不均一性核糖核蛋白(hnRNP)A2/B1在大鼠脑皮质表达位置变异与再灌注损伤时间的关系。方法随机选取30只雄性SD大鼠,分为假手术组、缺血2h再灌注3h、6h、12h、24h、48h6组,每组各5只。线栓法制作稳定的大鼠右侧大脑中动脉栓塞?再灌注实验模型,采用免疫组织化学和Nissl染色法测定再灌注损伤后3h、6h、12h、24h、48h缺血侧扣带回、纹状皮质、颞叶皮质、梨状皮质区域大脑皮质hnRNPA2/B1表达分布位置的改变,并与假手术组进行比较。同时观察缺血再灌注损伤大鼠脑皮质病理学改变。结果 1.假手术组中hnRNPA2/B1蛋白主要定位于神经元细胞核中,缺血再灌注各组与假手术组相比,缺血再灌注后3h、6h、12h、24h、48h,hnRNPA2/B1出现核突易位的变异,并呈现先上升后下降的趋势。脑缺血再灌注3h后,hnRNPA2/B1表达区神经元出现核突易位(P<0.01),12h后hnRNPA2/B1易位神经元数目持续增加(P<0.01),24h达高峰(P<0.01);再灌注48h后,hnRNPA2/B1表达区神经元核浆、核突易位降至0。2.与假手术组比较,缺血再灌注各组脑皮质损伤严重,尤其缺血再灌注24h组神经细胞变性坏死显著。结论 hnRNPA2/B1可能在基因转录后水平参与调控缺血再灌注脑损伤。

核内不均一核糖核蛋白A_2/B_1在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨核内不均一核糖核蛋白A2 /B1(hnRNPA2 /B1)在非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达特征及其临床意义。方法 应用免疫组织化学S P法检测hnRNPA2 /B1在 5 8例NSCLC及癌旁组织、支气管切缘和 3 0例肺良性病变肺组织中的表达 ,并分析该蛋白表达与肺癌临床病理特征的关系。结果 NSCLC组织中hnRNPA2 /B1阳性表达率 ( 63 .79% )显著高于癌旁肺组织 ( 4 3 .10 % )和肺良性病变肺组织 ( 2 0 .0 0 % )(P =0 .0 0 0 ) ,癌旁肺组织中hnRNPA2 /B1阳性率亦显著高于肺良性病变肺组织 (P <0 .0 5 )。肺癌患者支气管切缘上皮增生组织阳性表达率 ( 4 0 .0 0 % )显著高于正常支气管上皮 ( 15 .15 % ) (P =0 .0 3 2 )。低分化肺癌hnRNPA2 /B1阳性表达率 ( 78.13 % )显著高于中 -高分化肺癌 ( 4 6.15 % ) (P <0 .0 5 ) ,伴有淋巴结转移肺癌阳性表达率 ( 75 .0 0 % )显著高于无淋巴结转移肺癌 ( 5 0 .0 0 % ) (P <0 .0 5 ) ,Ⅲ +Ⅳ期肺癌阳性表达率 ( 78.5 7% )显著高于Ⅰ +Ⅱ期 ( 5 0 .0 0 % ) (P <0 .0 5 ) ,T3 +T4肺癌阳性表达率 ( 77.42 % )显著高于T1+T2 ( 4 8.15 % ) (P<0 .0 5 )。不同组织学类型肺癌组织中hnRNPA2 /B1表达水平无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 hnRNPA2 /B1的异常表达在肺癌的发生、发展和转移中?

核内不均一核糖核蛋白A2/B1在舌鳞状细胞癌中的表达及作用

目的:舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)是口腔颌面部的常见癌症,严重危害人们的生命健康。核内不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2/B1,hnRNP A2/B1)是一种RNA结合蛋白,可调控多种基因的表达,参与多种癌症的发生和发展。本研究旨在探究hnRNP A2/B1对TSCC进展的表达及作用。方法:基于基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库中口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)相关芯片GSE146483、GSE85195分析hnRNP A2/B1在OSCC及正常口腔黏膜细胞、组织中的差异表达情况,基于TSCC相关芯片GSE4676分析hnRNP A2/B1表达与TSCC患者无病生存期的相关性。收集2021年7月至12月于湖南省肿瘤医院就诊的30例TSCC患者的癌及癌旁组织样本,采用real-time RT-PCR和蛋白质印迹法验证TSCC患者样本中hnRNP A2/B1的mRNA和蛋白质表达情况。以人TSCC细胞Tca-8113为研究对象,分别转染hnRNP A2/B1空载敲减质粒(sh-NC组)、敲减质粒(sh-hnRNP A2/B1组)、空载过表达质粒(OE-NC组)和过表达质粒(OE-hnRNP A2/B1组)。采用蛋白质印迹法检测hnRNP A2/B1敲减或过表达效率,细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测Tca-8113细胞增殖活性,流式细胞术检测Tca-8113细胞凋亡率。结果:基于GEO数据库中的OSCC相关芯片GSE146483、GSE85195分析发现:hnRNP A2/B1在OSCC及正常口腔黏膜细胞、组织中均存在差异表达(均P<0.01),同时对TSCC相关芯片GSE4676的分析证实hnRNP A2/B1表达与TSCC患者无病生存期呈负相关(P=0.006)。Real-time RT-PCR和蛋白质印迹法结果显示:与癌旁组织样本相比,TSCC组织样本中hnRNP A2/B1的mRNA和蛋白质相对表达水平均显著上调(均P<0.01)。蛋白质印迹法结果显示:Tca-8113细胞在转染敲减或过表达hnRNP A2/B1质粒后,细胞内的hnRNP A2/B1表达水平被显著抑制或促进(均P<0.01)。CCK-8及流式细胞术结果显示:抑制Tca-8113细胞中hnRNP A2/B1的表达可以降低细胞增殖活性(P<0.05),增高细胞凋亡率(P<0.01);促进Tca-8113细胞中hnRNP A2/B1的表达可以增加细胞增殖活性(P<0.05),降低细胞凋亡率(P<0.01)。结论:HnRNP A2/B1是调控TSCC细胞增殖和凋亡水平的关键因子,通过抑制hnRNP A2/B1的表达可以降低TSCC细胞的增殖活性,促进TSCC细胞的凋亡。

HSVⅠ感染L-02细胞对核不均一性核糖核蛋白H2(hnRNP H2)表达影响

单纯疱疹病毒(HSVⅠ)对宿主细胞转录及mRNA修饰翻译通路的调控是一个系统的、复杂的体系,探索其具体机制将有助于了解病毒复制过程及与宿主细胞之间的相互作用。基于2-DE分析,人正常肝细胞L-02细胞核不均一性核糖核蛋白H2(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein H2,hnRNP H2)在感染HSVⅠ前后存在表达差异,通过Western blot,Northern blot等技术方法验证其在病毒复制过程中不同时段对其表达影响。

不均一性核糖核蛋白A2/B1与肺癌的研究进展

不均一性核糖核蛋白A2 /B1(hnRNPA2 /B1)是一种RNA结合蛋白,调控mRNA前体的加工、剪接、成熟。hnRNPA2 /B1的过表达可能与细胞增生、肿瘤生成有关。其可作为肺癌早期诊断的分子标记物。本文对该蛋白在肺癌早期诊断中的作用及研究进展作一综述。

大鼠脑缺血再灌注后核不均一性核糖核蛋白(hnRNP)A2/B1在脑皮质的表达变化

目的探讨大鼠脑缺血再灌注损伤后核不均一性核糖核蛋白(Heterogeneous Nuclear Ribonulcleoprotein,hnRNP)A2/B1的表达变化与再灌注损伤时间关系。方法建立大鼠脑缺血再灌注损伤动物模型,检测缺血再灌注损伤后3、6、12、24、48h、72h在缺血侧大脑皮质四个区域hnRNPA2/B1含量变化,并与假手术对照组进行比较。结果与假手术组比较,hnRNPA2/B1表达量在脑缺血再灌注3h、6h、12h、24h明显下降(P<0.01)。48h后,hnRNPA2/B1蛋白表达量明显上升(P<0.01)。结论hnRNPA2/B1可能在基因转录水平参与保护调控缺血再灌注脑损伤。

核不均一性核糖核蛋白H2(hnRNP H2)对单纯疱疹病毒(HSVⅠ)复制影响

本文研究了单纯疱疹病毒(HSVⅠ)在感染与复制过程中影响宿主细胞RNA转录,蛋白表达,进而为病毒的潜伏和持续感染创造必要条件.采用基于2-DE分析,人正常肝细胞L-02细胞核不均一性核糖核蛋白H2(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein H2,hnRNP H2)在感染HSVⅠ前后存在表达差异,构建pcDNA-hnRNP H2真核表达载体及hnRNP H2稳定转染的293T细胞系的方法,研究在核不均一性核糖核蛋白H2(hnRNP H2)稳定过表达后对HSVⅠ病毒复制周期的影响.结果表明,病毒滴度和生长曲线显示,hnRNP H2可以显著影响病毒复制周期.过表达hnRNP h2的细胞系与对照相比,其病毒滴度明显下降,hnRNP H2在HSVⅠ病毒复制中起到比较明显的抑制作用,其作用机理还有待进一步研究.

核内不均一核糖核蛋白A2/B1在子宫内膜异位症组织中的表达

目的:研究核内不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2/B1,hnRNP A2/B1)在正常子宫内膜、子宫内膜异位症(EMs)患者在位内膜、患者异位内膜间的表达差异。方法:用免疫组织化学法和Western blot分析,研究3例增生中晚期正常子宫内膜、3例增生中晚期EMs患者的在位内膜和异位内膜中,hnRNP A2/B1蛋白的表达差异。结果:hnRNP A2/B1主要表达于间质和腺上皮细胞的细胞核内,且EMs患者在位内膜和异位内膜中的表达强度,均低于正常内膜中的表达(P<0.05);而患者在位内膜和异位内膜中的表达,无明显差异(P>0.05)。结论:hnRNP A2/B1可能参与EMs的发生和发展。

核内不均一核糖核蛋白A2/B1及p53蛋白诊断肺癌的价值

目的探讨检测支气管肺泡灌洗液(BALF)脱落细胞中核内不均一核糖核蛋白(hnRNP)A2/B1和血细胞中p53蛋白在肺癌诊断中的价值。方法收集经病理确诊的肺癌患者30例BALF,以30例肺部良性疾病患者BALF为对照组,采用流式细胞术(FCM),检测两组患者BALF脱落细胞中hnRNPA2/B1表达率及血中p53蛋白表达率。结果肺癌组hnRNPA2/B1为(74.04±22.34)%显著高于肺部良性疾病组(28.03±9.01)%(P<0.01);hnRNPA2/B1水平与非小细胞肺癌临床TNM分期无关(P>0.05)。肺癌组p53蛋白水平为(2.16±1.88)%显著高于肺部良性疾病组(0.93±0.51)%(P<0.01);hnRNPA2/B1和p53蛋白诊断肺癌的敏感性分别为86.7%、70.0%,特异性为96.7%、83.3%;联合检测hnRN-PA2/B1和p53的敏感性为93.3%,特异性为100%。结论hnRNPA2/B1和血细胞中p53蛋白水平对肺癌有辅助诊断价值,尤其对早期肺癌的诊断有重要意义,两种指标联合检测可提高诊断敏感性。

痰中检测核不均一核糖核蛋白A2/B1早期诊断肺癌的意义

目的:探讨检测痰中核不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2/B1,hnRNP A2/B1)在肺癌早期诊断中的意义。方法:收集63例疑诊肺癌患者的痰标本,分别采用痰涂片、痰细胞块切片细胞学检查(镜检找到癌细胞即诊断为肺癌)及痰细胞块切片免疫组织化学检测hnRNP A2/B1(表达阳性即诊断为肺癌)进行诊断,比较2种诊断方法的结果。结果:痰涂片及痰细胞块切片细胞学检查诊断肺癌的敏感度为31.8%,特异度为100%。痰细胞块检测hnRNP A2/B1诊断肺癌的敏感度为80%,特异度为68.4%。检测痰hnRNP A2/B1的敏感度显著高于痰细胞学检查(P<0.01)。结论:痰细胞块结合免疫组织化学法检测hnRNP A2/B1有助于发现早期肺癌。

检测核不均一核糖核蛋白A2/B1在胸水细胞学鉴别诊断中的意义

目的:观察核不均一核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2/B1)在胸水转移性肺腺癌细胞和间皮细胞中的表达,评价其用于两者鉴别诊断的价值。方法:采用细胞块技术对100例胸水进行免疫组织化学检测,观察hnRNPA2/B1在肺腺癌细胞和间皮细胞中的表达。结果:hnRNPA2/B1标记肺腺癌细胞的敏感度为100%,特异度为70%。结论:检测hnRNPA2/B1对鉴别胸水肺腺癌细胞和间皮细胞很有帮助。

核不均一核糖核蛋白C2基因克隆及其对肝癌细胞生长的影响

目的:探讨人核不均一核糖核蛋白C2(RNPC2)基因在肝癌细胞生长增殖中的作用。方法:采用RTPCR方法扩增肝癌细胞SMMC-7721 RNA中RNPC2基因编码区的目的片段,构建真核表达载体p EGFP-RNPC2并进行细胞转染;采用G418抗生素筛选稳转细胞,SDS-PAGE和Western blot法测定稳转细胞内RNPC2蛋白表达,CCK-8法测定稳转细胞的增殖能力。结果:从培养的肝癌细胞SMMC-7721中抽提总RNA并反转录成c DNA,通过RNPC特异性引物扩增出RNPC2基因;测序鉴定获得双酶切分离纯化目的片段后,插入真核表达载体p EGFP-C1中,成功构建真核表达载体p EGFP-RNPC2;通过细胞稳定转染、G418药物筛选和荧光显微术获得表达外源融合蛋白GFP-RNPC2的稳转细胞株,并用Western blot验证及CCK-8分析证明GFP-RNPC2稳转细胞的生长增殖速率增加。结论:RNPC2可以促进肝癌细胞生长增殖。

核内不均一核糖核蛋白A2/B1研究进展

目前肺癌发病率居高不下，绝大多数肺癌早期表现无特征性，明确诊断一般已属晚期，治疗亦受限制，故5年生存率〈15％，为降低癌症死亡率，提高早期检测率，核内不均一核糖核蛋白A2／B1（heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2/BI, hnRNPA2/B1, hnRNPA2/B1 ）研究作为新的早期标记物，在临床表现之前，运用痰脱落细胞学预测肺癌可提高至1年，下面对近期研究进展做一综述。

核不均一性核糖核蛋白在RNA加工过程中的作用

在真核细胞中， 初始转录产物（ 前体ｍＲＮＡ） 经过一系列复杂的转录后加工过程形成成熟的ｍＲＮＡ． 在这一过程中， 大量蛋白质和加工因子有序汇集在核糖核蛋白复合体中并参与对前体ＲＮＡ 的加工过程． 该复合体中的蛋白质部分主要由一类约２０ 种称为核不均一性核糖核蛋白的多肽分子构成． 除了早期了解的一些结构性功能外， 近来已有许多证据显示这些蛋白质在细胞中ＲＮＡ

核不均一性核糖核蛋白与肺癌的关系进展

近年来,肺癌因为其高发病率和高死亡率,严重威胁人类的健康。通常肺癌一旦确诊,多已处于晚期或已发生转移,从而丧失手术机会,因此对肺癌的早期诊断变得至关重要。另外,通过寻找新的治疗靶点,将能为肺癌的早期治疗提供更多可能。核不均一性核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein,hnRNP)家族,是属于RNA结合蛋白的一种。随着对hnRNP家族研究的不断深入,发现该家族成员可通过调控细胞增殖、凋亡等多种途径参与肿瘤的发生和发展,hnRNP A2/B1是hnRNP家族中最重要的成员之一,与肺癌关系密切。本文就hnRNP A2/B1与肺癌的关系及其在肺癌发生发展中的作用进行综述。

核内不均一核糖核蛋白A3与疾病关系的研究进展

核内不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein,hnRNP)是人体内一大类的RNA结合蛋白家族,该家族可作为“RNA骨架”,参与核酸代谢的多个环节,包括可变剪接、信使核糖核酸(message RNA,mRNA)稳定以及转录和翻译调控等方面,并最终在细胞的生物学过程中发挥关键作用。与该家族中被广泛关注的成员hnRNP A1、hnRNP A2/B1相比,hnRNP A3是一个较少被研究的蛋白。本文就hnRNP A3在多种疾病中的表达情况、临床价值以及内在机制的研究进展做一综述,旨在为相关疾病的机制探讨及新型治疗靶点的挖掘提供依据。

异质性胞核核糖核蛋白A2/B1 hnRNP A2/B1基因克隆及其在滑膜组织中的表达

目的获得hnRNPA2/B1cDNA序列,研究其在滑膜组织中的表达水平,探讨它在类风湿滑膜炎中可能的致病作用。方法从人外周血单个核细胞中提取总RNA进行逆转录反应,经PCR扩增目的片段,将其克隆于PUC-T1质粒上,并经酶切电泳、DNA测序鉴定分析。采用免疫组化和原位杂交方法,分别利用单克隆抗体和特异的cDNA探针,检测滑膜组织中hnRNPA2/B1的含量及表达水平。结果从人外周血单个核细胞总RNA中扩增得到目的片段,并经测序证实该片段为hnRNPA2/B1的编码序列。免疫组化和原位杂交显示hnRNPA2/B1在类风湿关节炎(RA)滑膜中的表达水平整体上较骨关节炎(OA)和正常对照滑膜组高(P<0.05)。结论成功克隆hnRNPA2/B1cDNA;初步证明hnRNPA2/B1水平在RA关节局部增高,推测它可能参与了类风湿滑膜炎的发病。

异质性胞核核糖核蛋白A2在类风湿关节炎诊断中的临床意义

目的探讨异质性胞核核糖核蛋白A2(hnRNP A2)在类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)诊断中的临床意义,建立简便、快捷的ELISA检测方法,并与国外Anti-RA33 Ab试剂盒的结果对比,以作为验证国内试剂盒可用性的依据。方法以高纯度的具有抗原反应性的重组hnRNP A2蛋白作为抗原,对临床上包括137例RA在内的多种结缔组织病患者的血清中的相应抗体进行ELISA检测。应用国外Anti-RA33 Ab试剂盒ELISA法检测并对比检测结果。结果hnRNP A2在RA患者中的敏感性为37.23%,特异性为85.44%,抗hnRNP A2/RA33抗体在RA患者中阳性率均明显高于其他疾病组(P<0.05)。抗hnRNP A2/RA33抗体在早期RA患者中的阳性率为43.75%。与国外Anti-RA33 Ab试剂盒检测结果比较,在各组患者中检测抗RA33抗体的阳性率无明显差别(P>0.05),且总体符合率高达86.88%。另外,该抗体与年龄、病程、晨僵时间、血沉、C反应蛋白、关节功能、X线分期、类风湿因子(RF)、抗角蛋白抗体(AKA)、抗核周因子抗体(APF)及抗CCP抗体之间均无相关性(P>0.05)。结论我们初步纯化了RA33抗原,对hnRNP A2进行了基因的克隆、重组蛋白的表达和纯化,并以其为抗原,用ELISA方法检测抗hnRNP A2/RA33抗体是早期诊断RA的可靠方法。与国外Anti-RA33 Ab试剂盒的检测结果对比无明显差异,自制的抗RA33抗体试剂盒可以可靠地应用于临床检验。

痰液异质性核核糖核蛋白A2/B1与端粒酶逆转录酶检测在肺癌诊断中的探讨

肺癌是世界范围内致死率最高的癌症,而肺癌的预后与诊断时的临床分期密切相关,因此"早期发现、早期诊断、早期治疗"是降低肺癌病死率的重要措施。肺癌高危人群痰脱落细胞中有异质性核核糖核蛋白A2/B1与端粒酶逆转录酶活性的高表达,通过联合检测是否可发现处于早期和可治疗阶段的肿瘤,从而潜在降低肺癌的病死率,因此痰液异质性核核糖核蛋白A2/B1和端粒酶逆转录酶的联合检测是对肺癌早期诊断的一个有益探索。