敲低hnRNP H基因对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和细胞周期的影响及意义

目的探讨不均一核糖体蛋白H(hnRNP H)siRNA敲低hnRNP H基因表达及其对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和周期的影响。方法将hnRNP H基因的小干扰RNA(siRNA)转染至子宫内膜癌Ishikawa细胞株,细胞分对照组、阴性对照、siRNA组,通过实时定量PCR和Western印迹检测hnRNP H mRNA和蛋白水平,以确定siRNA转染效率。通过MTT实验检测各组细胞增殖情况;Western印迹检测三组细胞增殖蛋白PCNA核增殖抗原和细胞周期cyclin D1、CDK4的蛋白水平。结果敲低子宫内膜癌Ishikawa细胞hnRNP H基因的表达能有效抑制肿瘤细胞的生长,使增殖蛋白PCNA下降,下调细胞周期蛋白cyclin-D1、CDK4的表达。结论敲低hnRNP H基因可能是子宫内膜癌基因治疗靶点。

敲低hnRNP H基因对子宫内膜癌细胞侵袭转移的影响

目的探讨敲低核不均一性核糖核蛋白H(hnRNP H)基因对子宫内膜癌Ishikawa细胞侵袭转移的影响。方法将hnRNP H siRNA转染至子宫内膜癌Ishikawa细胞,利用实时定量PCR、Western印迹方法检测(对照组、阴性对照组、siRNA组),确定siRNA沉默效率(hnRNP H mRNA、蛋白表达)、上皮间质转化(EMT)相关蛋白(E-钙黏着蛋白E-cadherin、神经型钙黏附蛋白N-cadherin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-7表达情况,划痕实验及Transwell检测细胞迁移能力的改变。结果对照组E-cadherin表达少,而转染组E-cadherin表达明显升高,有统计学差异(P<0.05);对照组N-cadherin、MMP-2及MMP-7表达显著高于转染组(P<0.05)。结论沉默hnRNP H基因能抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞上皮间质转化,有效抑制子宫内膜癌细胞转移和侵袭。