肿瘤患者T细胞核仁嗜银蛋白和辅助性T细胞亚群变化

目的 :探讨肿瘤患者外周血单个核细胞 (PBMC)中T细胞核仁嗜银蛋白 (AgNORs)表达和辅助性T(Th)细胞亚群变化的关系及其临床意义。方法 :采取肿瘤患者 86例、正常对照者 44例的外周血。PBMC经多克隆T细胞活化剂刺激 ,用图像分析法检测AgNORs区面积与细胞核仁面积的百分比 (I .S % ) ;PBMC用离子霉素和佛波醇酯活化 5h后 ,以酶联免疫斑点法 (ELISPOT)检测IFNγ和IL 4产生细胞的频度 (% ) ;用相同的活化剂刺激 2 4h ,用ELISA试剂盒检测培养上清液中的γ 干扰素 (IFNγ)和白细胞介素 4(IL 4)水平。结果 :肿瘤患者和正常人 ,AgNORs表达分别为 4.9± 1.2I .S %和 7.82± 1.2 8I .S % ,肿瘤组显著下降 (P <0 .0 5 ) ;肿瘤组PBMC中Th2细胞频度显著上升 ,Th1/Th2比值显著下降 ;同时 ,肿瘤组PBMC产生IFNγ和IL 4水平发生相应变化 ,变化方式与Th亚群变化相似 ;系统分析 5 1例肺癌 ,转移组比未转移组 ,复发组比未复发组 ,Th1细胞数、Th1/Th2和IFNγ产生水平显著下降 ;在肿瘤组AgNORs表达与Th1细胞频度、Th1/Th2、IFNγ产生和肿瘤患者生活状态的Karnofsky评分正相关。结论 :肿瘤患者PBMC中T细胞表达AgNORs下降 ,与患者Th1细胞功能下降呈正相关 。

肿瘤病人T细胞核仁嗜银蛋白和辅助性T细胞亚群变化

目的:探讨肿瘤病人外周血单个核细胞(PBMC)中T细胞核仁嗜银蛋白(AgNORs)变化和辅助性T(Th)细胞亚群变化的关系及其临床意义。方法PBMC经多克隆T细胞活化剂刺激,以图像分析法检测AgNORs区面积与细胞核仁面积的百分比(1.S％):PBMC被离子霉素和佛波醇酯活化5h后,以酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测IFNY、和IL-4产生细胞的频度(％):以离子霉素加佛波醇酯刺激24h,用ELISA试刑盒检测培养上清液中的IFNY、和IL-4水平。结果 肿瘤病人(n=86)和正常人(n=44),PBMC中活化T细胞的AgNORs表达分别为4.9±1.21.S％和.7.82±1.28 1.S％,肿瘤组非常显著下降,P<0.05:肿瘤组PBMC中1112细胞额度显著上升,Th1／Th2比值显著下降:同时,肿瘤组PBMC产生IFN和IL-4水平发生相应变化,变化方式与Th亚群变化相似:在肺癌组中,转移的与未转移的,复发的与未复发的相比,Th1细胞数、Th1／Th2之比和IFNY、产生水平非常显著下降:在肿瘤组AgNORs表达与Th1细胞频度、Th1／Th2比值、IFNY产生和肿瘤病人生活状态的Kamofsky评分正相关。结论 现有病例观察结果表明,肿瘤病人PBMC小T细胞表达AgNORs下降,与患者Th1细胞功能下降正相关。

肿瘤病人T细胞核仁嗜银蛋白和辅助性T细胞亚群变化

目的 探讨肿瘤病人外周血单个核细胞 (PBMC)中T细胞核仁嗜银蛋白 (AgNORs)变化和辅助性T(Th)细胞亚群变化的关系及其临床意义。方法 PBMC经多克隆T细胞活化剂刺激 ,以图像分析法检测AgNORs区面积与细胞核仁面积的百分比 (I.S % ) ;PBMC被离子霉素和佛波醇酯活化 5h后 ,以酶联免疫斑点法 (ELISPOT)检测γ干扰素 (IFNγ)和白细胞介素 4(IL 4)产生细胞的频度( % ) ;以离子霉素加佛波醇酯刺激 2 4h ,用ELISA试剂盒检测培养上清液中的IFNγ 和IL 4水平。结果86例肿瘤病人和 44名正常人 ,PBMC中活化T细胞AgNORs表达分别为 ( 4 90± 1 2 0 )I S %和 ( 7 82±1 2 8)I S % ,肿瘤组下降非常显著 (P <0 0 5 ) ;肿瘤组PBMC中Th2细胞频度显著上升 ,Th/Th2比值显著下降 ;同时 ,肿瘤组PBMC产生IFNγ 和IL 4水平发生相应变化 ,变化方式与Th亚群变化相似 ;肺癌转移组与未转移组、复发组与未复发组相比 ,Th1细胞数、Th1/Th2之比和IFNγ 的产生下降非常显著 ;在肿瘤组AgNORs表达与Th1细胞频度、Th1/Th2比值、IFNγ 产生和肿瘤病人生活质量评分呈正相关。结论 肿瘤病人PBMC中T细胞表达AgNORs下降 ,与患者Th1细胞功能下降呈正相关。

T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)检测对恶性肿瘤临床意义的探讨

目的 探讨T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白 (Ag NORs)在恶性肿瘤诊断及疗效观察中的临床价值。方法 制作银染T淋巴细胞涂片 ,显微镜下选取转化良好的T淋巴细胞 ,利用KL型肿瘤免疫图像分析系统检测其Ag NORs含量 (Ag NORs面积与细胞核面积的比值 ,即I /S % )。结果 检测 6 6例正常人、117例恶性肿瘤患者和 2 5例良性肿瘤患者 ,发现 :(1)正常人的T淋巴细胞Ag NORs含量与良性肿瘤患者和恶性肿瘤患者均有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,其均值分别为 :7.0 9± 0 .79、6 .31± 0 .75、5 .4 4± 1.13。 (2 )正常人和良性肿瘤患者的T淋巴细胞AgNORs含量与鼻咽癌、食管癌、乳腺癌、肝癌患者之间有显著性差异(P <0 .0 5 )。鼻咽癌、食管癌、乳腺癌、肝癌患者T淋巴细胞AgNORs检测的阳性率分别为 6 2 .86 %、71.4 3%、6 6 .6 7%、70 %。 (3)观察 6 7例鼻咽癌患者放疗过程的不同阶段 ,发现放疗中和放疗结束患者的T淋巴细胞Ag NORs均值分别为 4 .38± 1.16和 4 .16± 1.2 7,较放疗前 (均值 5 .5 5± 1.2 0 )低 ,但放疗一年后有所上升 (均值 5 .75± 0 .4 8)。 (4)观察 2 8例食管癌患者的不同治疗阶段 (术前、术后七天和术后一月 ) ,发现其T淋巴细胞AgNORs值没有显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,分别为 :5 .2 3± 1.16、5 .11±

核仁形成区嗜银蛋白在肿瘤免疫监测中的意义

目的:探讨T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)的检测与肿瘤患者机体细胞免疫、生物治疗之间的关系,了解它在肿瘤免疫状态监测中的意义。方法:采用KL型肿瘤免疫图像分析系统及配套试剂对正常人、良性疾病及肿瘤患者,及肿瘤患者生物治疗前后外周血T淋巴细胞进行染色分析。结果:恶性肿瘤患者与正常人及良性疾病患者之间、化疗后完全缓解者和复发转移者间、免疫细胞治疗前后均有显著差异。结论:外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白检测可准确反映肿瘤患者的免疫状态,与肿瘤负荷和病情进展呈负相关,与机体免疫状态呈正相关,它是恶性肿瘤病情、免疫状态监测的重要指标。

日本血吸虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白的研究

目的 通过研究日本血吸虫成虫与童虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNORs)含量及β-巯基乙醇对培养细胞AgNORs的影响,探讨AgNORs能否作为评价日本血吸虫培养细胞增殖的指标以及β-巯基乙醇对培养细胞的促增殖作用。方法 联合法培养虫龄分别为18d和24d的日本血吸虫童虫与成虫,将童虫细胞随机分成对照组和实验组,对照组细胞与成虫细胞使用常规培养基培养,实验组在常规培养基中加入50μmoL/L β-巯基乙醇和1mmoL/L丙酮酸钠。培养第5d,运用胶银法染色,使用HPIAS-2000图像分析系统,计算培养细胞核内AgNORs颗粒数,测定银染颗粒面积与核面积的百分比和平均光密度。结果 日本童虫培养细胞(对照组)的AgNORs颗粒数目、颗粒面积与核面积百分比、平均光密度均高于成虫培养细胞。统计学分析显示,两者之间的AgNORs颗粒数日,银染颗粒面积与核面积百分比、平均光密度两两比较均有统计学差异(P<0.01或P<0.05);实验组培养细胞与对照组比较,AgNORs颗粒数目明显增多颗粒面积与核面积百分比、平均光密度均显著升高。统计学分析可知,两组细胞三组参数之间均有统计学差异(P<0.01或P<0.05)。结论 AgNORs可作为评价日本血吸虫培养细胞增殖的一个简便、敏感的指标。日本血吸虫童虫培养细胞较成虫培养细胞更具增殖潜能;

亚精胺对日本血吸虫成虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白的影响

目的以日本血吸虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(Argyrophilicnucleolarorganizerregionassociatedproteins,AgNORs)为评价指标,探讨亚精胺(Spermidine,Spd)对培养细胞的促增殖作用。方法采用联合法将虫龄为24d的日本血吸虫成虫细胞接种于小盖玻片上,培养于常规培养基中。接种后第3天,随机分为实验组和对照组。将实验组细胞用无血清培养基配制的终浓度为75μmol/L的Spd处理48h,对照组细胞则用不含Spd的无血清培养基处理,时间相同;PBS清洗3次后换用常规培养基继续培养。于第7、14、21、28、35天分别对培养细胞进行AgNORs染色。使用HPIAS-2000图像分析系统,计算培养细胞核内AgNORs颗粒数及平均吸光值,并作统计分析。结果经Spd处理,各实验组培养细胞AgNORs着色明显深于对照组;但随着培养时间的延长,实验组与对照组细胞着色均逐渐变浅。各实验组细胞AgNORs颗粒数目与平均吸光值高于对照组,二者比较差异有统计学意义(u7=50.95、43.78;u14=55.23、43.54;u21=36.65、32.25;u28=31.6、32.95;u35=28.86、9.54;P<0.01)。各实验组AgNORs吸光值两两比较,除第7天与第14天之间差异无统计学意义外(q=0.008058,P>0.05),其余差异都有统计学意义(P<0.01)。结论Spd具有促进日本血吸虫培养细胞增殖的能力,每周用Spd处理培养细胞1次,能更大限度地促进血吸虫培养细胞的生长。

T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白在不同人群中表达含量的探讨

目的:探讨T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)在新生儿、正常人和恶性肿瘤患者中免疫功能评价的意义。方法:对培养后的新生儿、恶性肿瘤患者及正常成年人的淋巴细胞进行普通细胞银染色,用KL型肿瘤免疫图像分析仪检测T淋巴细胞核仁银染面积与细胞核面积比值(I.S%)。结果:新生儿的T淋巴细胞Ag-NORs测定值是7.79±0.57%,正常成年人为7.56±0.51%,恶性肿瘤患者为5.15±0.68%。恶性肿瘤患者的T淋巴细胞Ag-NORs较正常人及新生儿均显著降低(均P<0.01),新生儿与正常人相比无显著性差异。结论:恶性肿瘤患者T淋巴细胞的Ag-NORs测定值较低,可能与免疫系统受损有关。

病毒性心肌炎患儿外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白含量测定

目的 :探讨病毒性心肌炎患儿外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白 (Ag -NORs)的变化和意义。方法 :选择急性期病毒性心肌炎患儿 32例 ,迁延期 17例 ,对其外周血T淋巴细胞经培养后制片进行银染 ,检测并计算淋巴细胞核仁银染面积和细胞核面积比值。结果与 2 5例健康对照比较。结果 :病毒性心肌炎急性期患儿外周血T淋巴细胞Ag-NORs含量较对照组显著降低 (P <0 .0 1) ;迁延期Ag -NORs含量逐渐恢复 ,但与对照组比较差异仍有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ,与急性期比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论

T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白含量的对比

目的 探讨核仁形成区嗜银蛋白 (Ag -NORs)含量检测对肺癌和肺结核患者的诊断及鉴别诊断的意义。方法 采用KL型免疫分析系统检测正常人、肺癌和肺结核患者外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白含量 ,用I .S %表示。以反映T淋巴细胞核内rDNA的转录活性。结果 肺癌患者和肺结核患者的I.S值均明显低于正常人 (P<0 0 1) ;肺癌患者的I .S %值显著低于肺结核患者 (P <0 0 1)。结论 Ag -NORs检测对于鉴别正常人、肺癌。

急性非淋巴细胞白血病细胞核仁组织区相关嗜银蛋白的研究

目的研究核仁形成区相关嗜银蛋白(Ag-NORs)对评估急性非淋巴细胞白血病(AML)细胞增殖分化水平的价值。方法用嗜银染色方法检测AML细胞的嗜银颗粒数目和形态,观察Ag-NORs形态与细胞形态学之间的关系,Ag-NORs分数与染色体、荧光分子原位杂交(FISH)检查以及AML预后的关系。结果不同Ag-NORs形状特征的细胞比例与细胞形态学的原幼稚细胞比例有显著相关性。Ag-NORs分数比较,染色体和FISH检查异常组高于正常组;治疗前未缓解组高于缓解组;持续缓解1年以上组高于1年内复发组;生存期1年以上组高于1年内死亡组(均P<0.01)。结论用嗜银染色方法检测AML细胞Ag-NORs分数和形态可观察白血病细胞的增殖状况,可作为白血病细胞动力学研究的一项指标,由于操作简便和易于普及,可为白血病的临床诊治提供快捷有效的实验依据。

人卵巢耐药细胞亚株(COC1/DDP)的核及核仁组成区嗜银蛋白图像分析

目的 :建立判别卵巢癌耐药指标。方法 :以银染法 ,用自动图像分析仪 ,对卵巢癌细胞株 (COC1)及耐药细胞亚株 (COC1/DDP)的细胞核及核仁组成区嗜银蛋白 ,进行 2 3项几何参数及构造参数的测量。结果 :COC1/DDP及COC1细胞核及AgNOR测量结果差异有显著性 ,并用判别分析 ,建立判别模式 ,其回代率各为 98%及 94%。结论 :细胞核及AgNOR的测定可以作为判断细胞耐药指标之一 ,也可用于指导临床用药。

放疗对直肠癌组织核仁形成区嗜银蛋白(Agnor)的影响

目的探讨放疗对直肠癌组织核仁形成区嗜银蛋白(Agnor)的影响。方法选择首次确诊的直肠癌患者32例,均为手术前放疗患者,男18例,女14例。病理类型均为腺癌,病理分级高分化4例;中分化10例;低分化18例。Dukes分期A期3例;B期11例;C期18例。纤维结肠镜于放疗前后取直肠癌组织标本,用免疫组化SP法检测32例直肠癌的Agnor的表达,并进行统计学分析。结果32例直肠癌中放疗后细胞核面积、Agnor数、Agnor面积分别是,10415.1±208.9、1.21±0.28、28.4±15.2,较放疗前321018.1±394.6、4.47±1.05、242.2±35.6明显缩小,各组间比较有显著性差异(P<0.01)。结论放疗对直肠癌的Agnor既明显降低其面积,又明显降低其数目,能控制直肠癌的增殖。

葛根素对T淋巴细胞核仁区嗜银蛋白的影响

目的观察葛根素对外周血T淋巴细胞核仁区嗜银蛋白(Ag鄄NORs)的影响。方法采用KL型免疫图像分析系统检测T淋巴细胞Ag鄄NORs。结果使用葛根素前、后T淋巴细胞Ag鄄NORs分别为(5.67±0.95)%、(6.19±1.16%),二者相比,P<0.05,有显著差异,使用葛根素治疗后T淋巴细胞Ag鄄NORs含量增加。结论葛根素有增强机体细胞免疫功能的作用。