胃癌及癌前病变原位DNA含量与核仁组成区嗜银蛋白定量分析的相关性研究

本文用图像分析的方法对正常胃粘膜、轻、中、重度异型增生、管状腺癌及低分化腺癌共30例石蜡切片标本的细胞核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)和细胞核DNA含量进行了定量检测,并进行了两者的相关性研究。结果显示AgNOR颗粒数量及DNA含量均随病变程度加重而增加,AgNOR数量与DNA含量、超二倍体及超四倍体细胞百分数、DNA直方图倍体类型之间有明显的相关性(r=0.8811,0.7288,0.8606,0.8793);提示AgNOR数量与DNA含量的变化对胃癌前病变的判断与研究具有相近的意义。与细胞核DNA含量检测相比,AgNOR计数分析具有染色简便,易于推广的优点,是胃癌及癌前病变研究中一项新的、实用的参考指标。

核仁组成区相关嗜银蛋白在原发性胆囊癌诊断中的评价

应用检测核仁组成区相关嗜银蛋白(AgNOR)染色方法,对胆囊粘膜上皮单纯增生15例、不典型增生12例及原发性胆囊癌38例进行细胞学研究。从中发现细胞核中AgNOR颗粒的多寡及大小对确定不典型增生和癌具有重要意义。不典型增生组和癌症组每个细胞核内AgNOR颗粒大小及平均数明显高于上皮增生组(P<0.01)。研究结果表明,检测核仁区AgNOR颗粒可使胆囊粘膜上皮不典型增生和癌诊断的判定更为客观。认为AgNOR技术作为组织病理学的辅助诊断技术应更广泛地运用于肿瘤研究。

活检胃粘膜核仁组成区嗜银蛋白观察研究

应用核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)技术对152例活检胃粘膜标本进行观察研究。结果良性病变AgNoR 计数在1.48至8.31个之间,银颗粒小,多数比较一致;恶性病变在4.62至19.75个之问,银颗粒大,不规则。从浅表性胃炎、萎缩性胃炎和异型增生到腺癌 AgNoR 数目渐增,颗粒体积渐大。尽管良性病变中的部分细胞银颗粒的最高值属于恶性病变中的计数范围之内,但每100个细胞中银颗粒≥4的细胞数在50%以下。提示AgNOR 技术对活检胃粘膜良、恶性病变的诊断和鉴别诊断及了解细胞增生变化的程度,判断细胞的生物学行为,上皮癌变过程与早期癌肿的发现均具有临床病理工作的实用性。

胃癌核仁组成区相关嗜银蛋白的研究

应用核仁组成区相关嗜银蛋白(AgNOR)染色技术,对56例胃粘膜活检标本进行观察。其中胃正常粘膜6例,不典型增生18例,胃高分化腺癌18例,低分化腺癌14例,光镜定量显示,胃正常粘膜、不典型增生和胃癌上皮AgNOR数目有显著差异,胃癌组(高分化与低分化)上皮AgNOR数日显著高于正常粘膜和不典型增生组。但重度不典型增生组和胃癌组AgNOR均值有一定程度重叠。结果提示核仁组成区相关嗜银蛋白技术对胃良恶性病变的诊断有益。

人卵巢耐药细胞亚株(COC1/DDP)的核及核仁组成区嗜银蛋白图像分析

目的 :建立判别卵巢癌耐药指标。方法 :以银染法 ,用自动图像分析仪 ,对卵巢癌细胞株 (COC1)及耐药细胞亚株 (COC1/DDP)的细胞核及核仁组成区嗜银蛋白 ,进行 2 3项几何参数及构造参数的测量。结果 :COC1/DDP及COC1细胞核及AgNOR测量结果差异有显著性 ,并用判别分析 ,建立判别模式 ,其回代率各为 98%及 94%。结论 :细胞核及AgNOR的测定可以作为判断细胞耐药指标之一 ,也可用于指导临床用药。

核仁组成区嗜银蛋白联合流式细胞术-DNA倍体分析对良恶性胸腹水鉴别诊断的临床价值

目的采用联合应用核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)和流式细胞术(FCM)-DNA倍体分析,以探讨其对良恶性胸腹水的鉴别诊断价值。方法选取自2004年6月起因胸腹水来我院就诊的患者共67例进行前瞻性分析。每位患者除常规胸腹水脱落细胞学检查外,均进行AgNOR染色和FCM-DNA倍体分析检测。结果恶性胸腹水与良性胸腹水AgNOR每核颗粒平均数分别为4.33±0.68和1.57±0.48(P<0.05);AgNOR染色敏感性为89.1%,特异性为90.1%;胸腹水细胞DNA倍体分析检查敏感性为71.7%,特异性为95.2%;DNA倍体分析与AgNOR检测具有一定的相关性,联合检测的敏感性为91.5%,特异性为95.3%。结论DNA倍体分析异常与AgNOR颗粒数增多均与恶性胸腹水相关,二者联合检测比单项检测更有助于胸腹水性质的鉴别诊断。

恶性血液病患者核仁组成区嗜银蛋白表达活性的研究

目的 探讨恶性血液病患者T淋巴细胞核仁组成区相关蛋白 (Ag -NORs)表达特点及临床价值。方法 :利用KL型肿瘤免疫图象分析系统及其配套细胞培养银染试剂和方法 ,对 12 5例正常及恶性血液病患者外周血T淋巴细胞进行染色分析。结果 :恶性血液病患者rDNA转录活性明显低于正常对照组 (P <0 0 1) ,分组观察慢性粒细胞白血病 (CML) ,急性非淋巴细胞白血病 (ANLL) ,非何杰金氏淋巴瘤 (NHL)及急性淋巴细胞白血病 (ALL)组明显低于正常对照组 (P <0 0 1)和 (P <0 0 5 )。多发性骨髓瘤 (MM)、再生障碍性贫血 (AA)组与正常对照组比较 ,无明显差异 (P >0 0 5 ) ,未完全缓解组与正常对照组比较有显著差异 (P <0 0 1)。结论 :恶性血液病患者普遍存在T细胞免疫功能降低 ,T淋巴细胞Ag -NORs检测指标可以灵敏地反映各类恶性血液病患者病情进展程度和机体免疫状况的相互关系 。

对核仁组成区嗜银蛋白外周血染色的探讨

目的探索一种简便实用的能直接应用于外周血的核仁组成区嗜银蛋白染色方法。方法取25mm×55mm的双层滤纸贴盖于经固定的血片上,自然光条件下滴加按1:2现配的银胶溶液,放暗盒内30℃水浴染50min,水洗晾干,先低倍找到最佳部位后换油镜观察血膜染色后视野内背景清洁度、细胞结构和银染颗粒着色情况,并另作30 min和40 min同等条件对照。结果本法采用滤纸贴盖血膜面后,染液完全扩散于滤纸的时间较未用滤纸时以手工完全铺展液面的时间(即染色前试剂曝光时间)明显缩短,且利用了滤纸的过滤功能,使视野中杂质沉淀大为减少;适当延长染色时间能使细胞和银染颗粒着色程度加深,更易于检测识别。结论经此改进后的银染法可用于自然光条件下血片嗜银蛋白直接染色,适于各级医疗机构应用。

核仁组成区相关嗜银蛋白染色革新法

核仁组成区相关嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）银染技术已广泛用以研究细胞生长活性，根据ＡｇＮＯＲ数目多少来判定肿瘤的良恶性和对肿瘤进行鉴别诊断。然而ＡｇＮＯＲ技术至今还存在背景非特异性银颗粒沉积问题而影响结果判定。本研究发现影响背景染色结果的主要因素是明胶的质量，采用Ｆａｒｍｅｒ’ｓ液可以清除背景染色，运用微波炉染色不仅可以缩短染色时间而且可以减少银用量。

淋巴细胞核仁组成区嗜银蛋白测定在肿瘤诊断中的意义

目的 探讨外周血 T淋巴细胞核仁组成区嗜银蛋白 (Ag- NORs)检测在肿瘤诊断中的意义。方法 对 110 0例健康查体者 (对照组 ) 336例经病理证实的肿瘤患者 (肿瘤组 )、 4 18例非肿瘤患者 (良性病组 )分别取静脉血 0 .5 ml,经培养、制片、银染、图像分析 4个步骤 ,以 T淋巴细胞核仁嗜银面积与细胞核面积比值 (I.S%值 )作为 Ag- NORs的检测指标。结果 对照组、良性病组及肿瘤组外周血 T淋巴细胞 Ag- NORs结果分别为(7.2 3± 0 .4 5 ) %、 (7.0 3± 0 .4 5 ) %和 (4 .5 2± 0 .2 5 ) %经统计学分析 ,对照组、良性病组分别与肿瘤组有显著差异 (P<0 .0 5 ) ;良性病组与对照组无明显差异 (P>0 .0 5 )。结论 外周血 T淋巴细胞 Ag-

柔红霉素对培养人视网膜色素上皮细胞核仁组成区相关嗜银蛋白影响的定量分析

目的:了解视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞核仁组成区相关嗜银蛋白(ar-gyrophilic nucleolar organiser region-associated proteins,AgNORs)的表达量及柔红霉素对其影响。方法:将柔红霉素加入培养人RPE细胞的培养液中(终浓度为180μg/L)作用12小时,撤药后继续培养24小时。对培养细胞行AgNORs染色,图像分析染色结果。结果:对照组和柔红霉素组AgNORs面积(μm^2/核)分别为41.61±4.52和13.66±0.65(P<0.01);平均面密度(AgNORs面积与胞核面积之比)(%)为20.37±1.97和13.06±2.44(P<0.01)。结论:柔红霉素抑制体外培养人RPE细胞核仁组成区转录活性可能是其细胞毒作用的机理之一。眼科学报1999;15:70—73。

睾丸畸胎瘤核仁组成区嗜银蛋白图像分析

为进一步探讨睾丸良恶性畸胎瘤的鉴别方法，本文应用银染和图像分析技术，对睾丸正常组织、畸胎瘤、畸胎癌细胞进行了研究，结果发现：正常睾丸及畸胎瘤的ＡｇＮＯＲｓ颗粒呈圆形、规则、边界清楚、大小均匀，位于胞核偏中或边缘部位；畸胎癌的颗粒呈圆或卵圆形、欠规则、边界欠清、大小较不一致，偏中、散在或成簇分布于核内。畸胎癌的ＡｇＮＯＲｓ数目、面积、大颗粒数、平均面积、圆度比正常及畸胎瘤要大（Ｐ＜０．０１），前３项参数在畸胎瘤比正常组大（Ｐ＜０．０１）。故我们认为ＡｇＮＯＲｓ图像分析对睾丸良恶性畸胎瘤的鉴别具有意义，可为临床提供一项较为客观的指标。

肺鳞癌及癌前病变的核仁组成区嗜银蛋白测定分析

本文应用ＡｇＮＯＲｓ染色法，对肺鳞癌癌变不同阶段的支气管活检粘膜组织共８５例石蜡切片作定量分析，结果表明，在这一癌变过程中，ＡｇＮＯＲ颗粒既有数量的增加，也有形态的异常，组织学分级与ＡｇＮＯＲ／核均数及畸异型胞核呈正相关ｒ＝０．９１０和０．９０７，ｐ值均＞０．０５），与核仁型胞核负相关ｒ＝（－Ｏ．９６２，Ｐ＜０．００５）。对ＡｇＮＯＲ的数量及颗粒形态的分计数综合分析，试图为肺鳞癌和癌前病变的诊断及其癌变趋势大小的预测等寻找客观定量的指标。

核仁组成区嗜银蛋白在甲状腺良恶性病变中的定量研究

应用染技术定量研究了57例甲状腺良、恶性病变中核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)的数目和分布,表明此法不仅可作为定量或半定量指标,区分甲状腺良、恶性肿瘤而且提示与癌分型和临床预后相关。

喉鳞状上皮良、恶性肿瘤核仁组成区相关嗜银蛋白的研究

采用胶银染色技术,对70例喉鳞状细胞癌和25例喉乳头状瘤进行核仁组成区相关嗜银蛋白(AgNORs)的定量研究。结果表明,喉鳞状细胞癌的AgNORs计数高于对照组,喉乳头状瘤的AgNORs计数介于二者之间,差异有高度显著性意义(P<0.01)。在喉鳞状细胞癌中,分化较低者AgNORs计数高于分化较高者,声门上癌AgNORs计数高于声门癌,晚期者AgNORs计数高于早期者,有颈淋巴结转移者AgNORs计数高于无转移者,差异均有高度显著性意义(P<0.01)。提示AgNORs技术是喉肿瘤研究中有价值的手段。

核仁组成区嗜银蛋白在小肝癌的表达

作者应用细胞核仁组成区嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）染色技术，对２６例早期肝癌（单个结节直径≤５ｃｍ），１８例肝硬化和１１例正常对照组增殖情况进行研究。结果表明：正常肝脏、癌旁肝硬化、肝癌组织的ＡｇＮＯＲ值分别为１．７７±０．２３、２．８０±０．３７、４．９０±０．５７，统计学差异显著；ＡＦＰ阳性肝癌、肿瘤侵犯包膜、肿瘤肉眼形态分型Ⅱ～Ⅳ型、肿瘤细胞分级高、伴门静脉癌栓及术后早期复发的肝癌，ＡｇＮＯＲ均较高，统计学差异显著。因此，作者认为ＡｇＮＯＲ可作为反映肝细胞癌生物学行为与预后的辅助指标之一。

核仁组成区嗜银蛋白染色技术在病理诊断中的应用

1987年以来Crocker.J等已广泛应用核仁组成区嗜银蛋白(Argyrophilic NOR-associated proteins-AgNOR)技术于人体组织,认为它对鉴别良恶性肿瘤及区别恶性淋巴瘤的恶性程度有重要意义。 有关NOR及AgNOR的研究,国内学者也已开始重视,但尚未见研究成果的报道,我们应用此技术于乳腺肿瘤组织,借以研究良恶性乳腺肿瘤AgNOR的情况,为今后临床的病理诊断中的应用奠定基础。