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核内小RNA的研究进展
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作者 刘彤戈 徐济责 《现代农业科学》 2009年第4期28-28,73,共2页
针对目前分子生物学研究比较热的核内小RNA进行了综述,分别介绍了核内小RNA的发现、主要特征、作用机制、真核生物原核生物和病毒体内的核内小RNA和对核内小RNA的研究技术进行展望。
关键词 核内小rna 基因 分子
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基于中性粒细胞活化核内小RNA宿主基因14在急性肺损伤中的调控作用机制分析
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作者 杨莹 朱金源 《中外医药研究》 2022年第7期139-141,共3页
目的:探讨基于中性粒细胞(PMN)活化核内小RNA宿主基因14(SNHG14)在急性肺损伤(ALI)中的调控作用机制。方法:生物信息学验证SNHG14、miR-331-3p和趋化因子受体1(CCR1)的靶向结合关系,合成相应的双荧光素酶报告基因。培养小鼠骨髓中性粒细... 目的:探讨基于中性粒细胞(PMN)活化核内小RNA宿主基因14(SNHG14)在急性肺损伤(ALI)中的调控作用机制。方法:生物信息学验证SNHG14、miR-331-3p和趋化因子受体1(CCR1)的靶向结合关系,合成相应的双荧光素酶报告基因。培养小鼠骨髓中性粒细胞,建立SNHG14过/抑制表达模型(siRNA-SNHG14),同时以miR-331-3p为核心行Rescue实验,检测细胞中miR-331-3p、SNHG14及CCR1的表达改变状况;脉波指示剂连续心排血量监测急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血管外肺水指数和肺血管通透性指数等参数;qRT-PCR监测ARDS患者外周血SNHG14的表达,并分析SNHG14与ARDS的临床特征、肺通透指数和肺水含量的相关性;流式细胞检测PMN细胞转染siRNA-SNHG14后细胞凋亡率的变化。结果:SNHG14在脂多糖诱导的PMN细胞模型中表达显著升高;双荧光素酶证实SNHG14和miR-331-3p具有靶向关系,miR-331-3p与CCR1存在靶向关系,且SNHG14和miR-331-3p有结合位点,SNHG14干扰后miR-331-3p表达增加;ARDS患者外周血中SNHG14表达明显增加,且SNHG14与ARDS患者的肺通透指数和肺水含量呈正相关;siRNA-SNHG14可造成PMN细胞凋亡率明显降低。结论:在中性粒细胞中,SNHG14可能通过吸附miR-331-3p,调控CCR1的表达,进而可能参与ALI/ARDS的发生。 展开更多
关键词 核内小rna宿主基因14 急性肺损伤 中性粒细胞活化 趋化因子受体1
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长链非编码RNA核内小RNA宿主基因16靶向调控微小RNA-16-5p对高糖诱导足细胞损伤的影响及其机制研究 被引量:3
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作者 徐有伟 朴元林 冯学桢 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期843-849,共7页
目的研究下调长链非编码RNA(lncRNA)核内小RNA宿主基因16(SNHG16)通过微小RNA-16-5p(miR-16-5p)对高糖诱导足细胞损伤的影响。方法足细胞分为正常对照(Con)组、高糖(HG)组、高糖空白转染(sh-NC+HG)组、高糖SNHG16转染(sh-SNHG16+HG)组。... 目的研究下调长链非编码RNA(lncRNA)核内小RNA宿主基因16(SNHG16)通过微小RNA-16-5p(miR-16-5p)对高糖诱导足细胞损伤的影响。方法足细胞分为正常对照(Con)组、高糖(HG)组、高糖空白转染(sh-NC+HG)组、高糖SNHG16转染(sh-SNHG16+HG)组。RT-PCR检测SNHG16表达;流式细胞术测定细胞凋亡;Western blot检测B淋巴细胞瘤2相关蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)蛋白表达;钼酸铵比色法检测过氧化氢酶(CAT)水平;黄嘌呤氧化法检测超氧化物歧化酶SOD水平;硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平;ELISA法测定细胞分泌TNF-α、IL-6、IL-1β水平。生物信息学软件预测SNHG1的靶基因,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。足细胞中共转染SNHG16 shRNA、miR-16-5p inhibitor,测定细胞凋亡和Bax、Bcl-2蛋白表达,以及CAT、SOD、MDA水平和分泌TNF-α、IL-6、IL-1β水平。结果与sh-NC+HG组比较,sh-SNHG16+HG组足细胞凋亡率、Bax蛋白水平和MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平降低(P<0.05),Bcl-2表达、CAT、SOD水平升高(P<0.05)。SNHG16靶向调控miR-16-5p表达。抑制miR-16-5p表达可降低转染sh-SNHG16对高糖诱导的足细胞凋亡、炎症及氧化应激的作用。结论下调lncRNA SNHG16靶向促进miR-16-5p表达抑制高糖诱导的足细胞损伤。 展开更多
关键词 核内小rna宿主基因16 足细胞 高糖 miR-16-5p 凋亡
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鸡U6核内小RNA基因的克隆与分析
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作者 孙婴宁 王维世 +2 位作者 高媛 李辉 王宁 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2013年第5期17-21,共5页
本研究旨在获得鸡U6 snRNA的全序列,并对其序列、启动子及拷贝数等进行分析。本实验通过RT-PCR、克隆、测序获得了鸡U6 snRNA的部分序列(94 bp)。根据测序结果和鸡全基因组序列数据,结合生物信息学分析,结果获得了鸡U6 snRNA的全长序列(... 本研究旨在获得鸡U6 snRNA的全序列,并对其序列、启动子及拷贝数等进行分析。本实验通过RT-PCR、克隆、测序获得了鸡U6 snRNA的部分序列(94 bp)。根据测序结果和鸡全基因组序列数据,结合生物信息学分析,结果获得了鸡U6 snRNA的全长序列(106 bp),该序列与人U6 snRNA序列相似性为100%,在鸡基因组中有4个拷贝,其中3个成簇存在于28号染色体上一段2 kb长的DNA片段上;另一个位于18号染色体。已有研究报道,这4个基因拷贝的5′侧翼区均具有启动子活性,说明它们是真基因。结果表明:这4个U6 snRNA基因启动子区均含有潜在的远端序列元件(DSE)、近端序列元件(PSE)和TATA box等RNA聚合酶Ш启动子元件。本研究成功获得了鸡U6 snRNA的全长序列,为选用U6基因作为内参基因开展鸡miRNA定量表达分析以及鸡U6基因的转录调控研究奠定基础。 展开更多
关键词 核内小rna 克隆 启动子
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利用Ⅱ型启动子转录的U6 RNA提高植物病毒表达载体在植物中表达外源基因的水平 被引量:1
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作者 高丁梅 马婷 +2 位作者 丁向真 李志英 王盛 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期883-890,共8页
Ⅱ型启动子转录的外源短链RNA可以竞争性抑制细胞内源mRNA的核质转运,因而可能会提高植物RNA病毒载体表达的外源基因在植物中的积累.为了验证这一假说,利用OE-PCR技术合成拟南芥U6-1核内小RNA序列,并构建其Ⅱ型启动子转录的植物表达载体... Ⅱ型启动子转录的外源短链RNA可以竞争性抑制细胞内源mRNA的核质转运,因而可能会提高植物RNA病毒载体表达的外源基因在植物中的积累.为了验证这一假说,利用OE-PCR技术合成拟南芥U6-1核内小RNA序列,并构建其Ⅱ型启动子转录的植物表达载体.以农杆菌渗滤技术,与烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)表达载体共接种寄主植物本氏烟,通过对报告基因绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)的荧光观察,并以Western印迹和ELISA测定GFP在烟草中的表达情况,分析共表达Ⅱ型启动子转录的U6 RNA对外源基因在植物中表达的作用效果.结果表明,共接种Ⅱ型启动子转录的U6 RNA对TMV病毒表达载体表达外源基因的水平有明显的增效作用,推测RNA核质转运干扰是提高外源基因表达的可能机制. 展开更多
关键词 烟草花叶病毒 表达载体 U6核内小rna rna质转运 rna聚合酶Ⅱ
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lncRNA SNHG1靶向miR-145-5p/PDCD4轴对缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 李红英 张会军 +2 位作者 王军 穆秀娥 李红方 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第10期904-909,916,共7页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)核内小RNA宿主基因1(SNHG1)靶向miR-145-5p/程序性细胞死亡因子4(PDCD4)轴对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡的影响。方法将H9c2细胞分为对照组(NC组)、H/R组、si-NC组、si-SNHG1组、mimic NC组、miR-14... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)核内小RNA宿主基因1(SNHG1)靶向miR-145-5p/程序性细胞死亡因子4(PDCD4)轴对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡的影响。方法将H9c2细胞分为对照组(NC组)、H/R组、si-NC组、si-SNHG1组、mimic NC组、miR-145-5p mimic组、si-SNHG1+inhibitor NC组、si-SNHG1+miR-145-5p inhibitor组。除NC组外,其他组H9c2细胞均需转染对应物质后构建H/R模型。实时定量PCR(qRT-PCR)检测H9c2细胞中SNHG1、miR-145-5p表达;CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞增殖、凋亡;试剂盒检测H9c2细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量;Western blotting检测H9c2细胞中PDCD4、caspase 3、Bcl-2、Bax蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证SNHG1与miR-145-5p、miR-145-5p与PDCD4的关系。结果沉默SNHG1或过表达miR-145-5p可促进H/R诱导的H9c2细胞中miR-145-5p表达和细胞增殖,抑制PDCD4蛋白表达、细胞凋亡和氧化应激。miR-145-5p inhibitor减弱了沉默SNHG1对H/R诱导的H9c2细胞中miR-145-5p表达和细胞增殖的促进作用,以及对PDCD4蛋白表达、细胞凋亡、氧化应激的抑制作用。SNHG1靶向调控miR-145-5p/PDCD4轴。结论沉默SNHG1可能通过调控miR-145-5p/PDCD4轴抑制H/R诱导的H9c2细胞凋亡。 展开更多
关键词 核内小rna宿主基因1 miR-145-5p 程序性细胞死亡因子4 凋亡 心肌细胞
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lncRNA SNHG16对胶质瘤U251细胞增殖、侵袭和迁移的影响 被引量:4
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作者 陈波 云亚滨 +1 位作者 杜俊峰 王伟志 《中国临床神经外科杂志》 2020年第11期771-773,共3页
目的探讨沉默长链非编码RNA核内小RNA宿主基因16(SNHG16)对胶质瘤U251细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法实时荧光定量PCR检测正常胶质细胞HEB、NHA和胶质瘤细胞A172、U251、U87、SHG-4中SNHG16的表达。用siRNA沉默U251细胞SNHG16的表达... 目的探讨沉默长链非编码RNA核内小RNA宿主基因16(SNHG16)对胶质瘤U251细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法实时荧光定量PCR检测正常胶质细胞HEB、NHA和胶质瘤细胞A172、U251、U87、SHG-4中SNHG16的表达。用siRNA沉默U251细胞SNHG16的表达,分为NC-siRNA组和SNHG16-siRNA组,CCK-8法检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞侵袭,划痕实验检测细胞迁移。结果与正常胶质细胞HEB和NHA比较,胶质瘤细胞A172、U251、U87和SHG-4的SNHG16表达水平明显升高(P<0.05)。与NC-siRNA组比较,SNHG16-siRNA组细胞增殖能力、细胞侵袭能力和细胞迁移能力均明显降低(P<0.05)。结论SNHG16在胶质瘤细胞中高表达,特异性沉默SNHG16基因可以抑制胶质瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 胶质瘤 U251细胞 长链非编码rna 核内小rna宿主基因16 细胞增殖 细胞侵袭 细胞迁移
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lncRNA SNHG16在人脑胶质瘤组织中的表达及其与病人预后的关系 被引量:2
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作者 孙青青 任洪波 牛国栋 《中国临床神经外科杂志》 2020年第12期831-833,837,共4页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)SNHG16在人脑胶质瘤组织中的表达及其与病人预后的关系。方法实时荧光定量PCR检测104例2013年9月至2015年1月本院病理科冻存的胶质瘤组织和2018年4月至2019年1月颅脑损伤内减压术中切除的40例正常脑组织ln... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)SNHG16在人脑胶质瘤组织中的表达及其与病人预后的关系。方法实时荧光定量PCR检测104例2013年9月至2015年1月本院病理科冻存的胶质瘤组织和2018年4月至2019年1月颅脑损伤内减压术中切除的40例正常脑组织lncRNA SNHG16的相对表达量。以SNHG16表达量的中位数为截断值,将胶质瘤病人分为高表达组和低表达组。随访截止时间为2019年6月,记录总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)。结果胶质瘤组织SNHG16相对表达量明显高于正常脑组织(P<0.001);高级别胶质瘤组织SNHG16相对表达量明显高于低级别胶质瘤组织(P<0.001)。多因素Cox比例回归风险模型分析结果显示,SNHG16高表达是胶质瘤病人OS和PFS缩短的独立危险因素(P<0.05)。生存曲线分析显示高表达组OS(中位数25个月,四分位数18~34个月)和PFS(中位数15个月,四分位数9~18个月)较低表达组(OS中位数35个月,四分位数20~42个月;PFS中位数19个月,四分位数12~20个月)明显缩短(P<0.05)。结论人脑胶质瘤SNHG16呈高表达,与病人不良生存预后和肿瘤进展有关。 展开更多
关键词 胶质瘤 长链非编码rna 核内小rna宿主基因16 预后 影响因素
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敲低lncRNA SNHG16对胃癌细胞凋亡的影响及其机制 被引量:1
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作者 周春欢 刘娟娟 +3 位作者 夏万松 夏英 万颖 黄海 《山东医药》 CAS 2019年第10期1-5,共5页
目的探讨敲低长链非编码RNA(lncRNA)核内小RNA宿主基因16(SNHG16)对胃癌细胞凋亡的影响及其机制。方法取人胃癌高分化细胞株AGS(以下称AGS细胞),体外传代培养。取传3代、对数生长期、生长状态良好的AGS细胞,随机分为空白对照组、阴性对... 目的探讨敲低长链非编码RNA(lncRNA)核内小RNA宿主基因16(SNHG16)对胃癌细胞凋亡的影响及其机制。方法取人胃癌高分化细胞株AGS(以下称AGS细胞),体外传代培养。取传3代、对数生长期、生长状态良好的AGS细胞,随机分为空白对照组、阴性对照组、si-SNHG16组。si-SNHG16组、阴性对照组分别转染si-SNHG16干扰序列、阴性对照序列,空白对照组不予转染。转染48 h,收集各组细胞,采用qRT-PCR法验证si-SNHG16干扰效率以及敲低lncRNA SNHG16后p53基因表达;采用Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术、Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡情况;采用Western blotting法检测p53、Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达;采用酶标仪检测Caspase-3酶活性。结果与空白对照组、阴性对照组比较,si-SNHG16组转染48 h lncRNA SNHG16相对表达量明显降低、p53基因相对表达量明显升高,细胞凋亡率和细胞凋亡数均明显增加,p53蛋白及凋亡相关蛋白Bax、Cleaved Caspase-3表达均明显上调,而Bcl-2表达明显下调,且Caspase-3酶活性明显增加(P均<0.05)。阴性对照组与空白对照组上述指标比较P均>0.05。结论敲低lncRNA SNHG16可促进胃癌细胞凋亡,其机制可能与激活p53信号通路下游凋亡相关蛋白表达,继而启动细胞凋亡程序有关。 展开更多
关键词 胃癌 长链非编码rna 核内小rna宿主基因16 rna干扰技术 P53 细胞凋亡
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Lnc SNHG20和miR-495在宫颈癌中的表达及意义 被引量:4
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作者 程凯 陆牡丹 +2 位作者 许涵洁 周洁 臧嘉 《河北医药》 CAS 2019年第24期3722-3725,共4页
目的检测长链非编码RNA(LncRNA)核内小RNA宿主基因20(SNHG20)和微小核糖核酸-495(miR-495)在宫颈癌患者癌组织及癌旁正常组织中的表达水平,分析二者表达相关性及与宫颈癌疾病的关系。方法选取2011年6月至2013年8月在本院诊治并接受手术... 目的检测长链非编码RNA(LncRNA)核内小RNA宿主基因20(SNHG20)和微小核糖核酸-495(miR-495)在宫颈癌患者癌组织及癌旁正常组织中的表达水平,分析二者表达相关性及与宫颈癌疾病的关系。方法选取2011年6月至2013年8月在本院诊治并接受手术的宫颈癌患者的癌组织及配对癌旁组织分别设为研究组与对照组,每组74例,采用实时荧光定量PCR技术检测Lnc SNHG20和miR-495表达水平,分析Lnc SNHG20与miR-495表达相关性及与宫颈癌疾病的关系。结果研究组中Lnc SNHG20相对表达量显著高于对照组(P<0.05),miR-495相对表达量显著低于对照组(P<0.05)。Lnc SNHG20和miR-495表达水平与患者FIGO分期、组织分化、肿瘤直径和淋巴结是否转移有关(P<0.05)。Lnc SNHG20高表达组生存率显著低于低表达组(P<0.05),miR-495低表达组生存率显著低于高表达组(P<0.05)。Lnc SNHG20表达与miR-495号负相关(r=-0.839,P<0.01),是影响宫颈癌不良预后发生的独立危险因素(P<0.05)。结论Lnc SNHG20在宫颈癌患者癌组织中高表达,miR-495低表达,二者表达水平负相关,与FIGO分期、组织分化、肿瘤直径和淋巴结是否转移有关,是影响宫颈癌不良预后发生的独立危险因素。 展开更多
关键词 宫颈癌 长链非编码rna 核内小rna宿主基因20 微小酸-495
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Analysis of cardiovascular disease-related NF-κB-regulated genes and microRNAs in TNFα-treated primary mouse vascular endothelial cells 被引量:2
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作者 Hui ZHU Yun LI +3 位作者 Mao-xian WANG Ju-hong WANG Wen-xin DU Fei ZHOU 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2019年第10期803-817,共15页
Activated nuclear factor-κB(NF-κB)plays an important role in the development of cardiovascular disease(CVD)through its regulated genes and microRNAs(miRNAs).However,the gene regulation profile remains unclear.In thi... Activated nuclear factor-κB(NF-κB)plays an important role in the development of cardiovascular disease(CVD)through its regulated genes and microRNAs(miRNAs).However,the gene regulation profile remains unclear.In this study,primary mouse vascular endothelial cells(pMVECs)were employed to detect CVD-related NF-κB-regulated genes and miRNAs.Genechip assay identified 77 NF-κB-regulated genes,including 45 upregulated and 32 downregulated genes,in tumor necrosis factorα(TNFα)-treated pMVECs.Ten of these genes were also found to be regulated by NF-κB in TNFα-treated He La cells.Quantitative real-time PCR(q RT-PCR)assay confirmed the upregulation of Egr1,Tnf,and Btg2 by NF-κB in the TNFα-treated p MVECs.The functional annotation revealed that many NF-κB-regulated genes identified in pMVECs were clustered into classical NF-κB-involved biological processes.Genechip assay also identified 26 NF-κB-regulated miRNAs,of which 21 were upregulated and 5 downregulated,in the TNFα-treated pMVECs.Further analysis showed that nine of the identified genes are regulated by seven of these mi RNAs.Finally,among the identified NF-κB-regulated genes and miRNAs,5 genes and 12 miRNAs were associated with CVD by miRWalk and genetic association database analysis.Taken together,these findings show an intricate gene regulation network raised by NF-κB in TNFα-treated p MVECs.The network provides new insights for understanding the molecular mechanism underlying the progression of CVD. 展开更多
关键词 Cardiovascular disease Nuclear factor-κB(NF-κB) Microrna Endothelial cell
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