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过表达核凋亡诱导因子1增强鼻咽癌细胞放射敏感性 被引量:1
1
作者 陈旭霞 杨晓慧 +3 位作者 陈伟玲 周玉飞 李开国 曲颂 《中国癌症防治杂志》 CAS 2023年第3期272-277,共6页
目的探究核凋亡诱导因子1(nuclear apoptosis-inducing factor 1,NAIF1)对鼻咽癌细胞CNE-2R放射敏感性的影响。方法采用Western blot检测NAIF1在鼻咽癌细胞CNE-2和CNE-2R的表达水平。通过慢病毒感染技术将NAIF1过表达慢病毒(LV-NAIF1组... 目的探究核凋亡诱导因子1(nuclear apoptosis-inducing factor 1,NAIF1)对鼻咽癌细胞CNE-2R放射敏感性的影响。方法采用Western blot检测NAIF1在鼻咽癌细胞CNE-2和CNE-2R的表达水平。通过慢病毒感染技术将NAIF1过表达慢病毒(LV-NAIF1组)及其阴性对照慢病毒(LV-NC组)分别感染CNE-2R细胞,采用RT-qPCR和Western blot检测NAIF1的mRNA和蛋白表达水平;采用CCK-8、克隆形成实验分别检测各组细胞在不同照射剂量(0、2、4、6、8 Gy)照射下的增殖能力、克隆形成能力并计算相应的存活分数,采用流式细胞术实验检测各组细胞6 Gy照射前后的细胞周期分布情况。结果与CNE-2细胞相比,NAIF1在CNE-2R细胞中的蛋白表达水平显著降低(P<0.001)。与LV-NC组相比,LV-NAIF1组CNE-2R细胞中NAIF1的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(均P<0.001)。经不同剂量照射后,与LV-NC组相比,过表达NAIF1可以抑制CNE-2R细胞的增殖能力(均P<0.05),降低CNE-2R细胞的克隆形成数和存活分数(P<0.05)。经6 Gy照射后,与LV-NC组相比,过表达NAIF1可使更多的CNE-2R细胞滞留在G2/M期(P<0.01)。结论NAIF1在鼻咽癌细胞CNE-2R中低表达,过表达NAIF1可能通过抑制细胞增殖并将细胞周期阻滞在G2/M期,从而增强鼻咽癌细胞CNE-2R的放射敏感性。 展开更多
关键词 鼻咽癌 核凋亡诱导因子1(NAIF1) 放射敏感性
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凋亡诱导因子是线粒体内介导核凋亡的最主要蛋白质之一 被引量:9
2
作者 于翠娟 孟艳玲 +1 位作者 王成济 杨安钢 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期177-179,共3页
凋亡诱导因子 (apoptosis inducingfactor ,AIF)基因定位于X染色体上 ,其编码产物是一种可直接介导细胞核凋亡的效应分子 .鼠AIF前体蛋白在胞浆中合成后 ,通过其N端的线粒体定位信号 (MLS)有效地穿入线粒体膜间隙 ,然后在 10 2位甘氨酸... 凋亡诱导因子 (apoptosis inducingfactor ,AIF)基因定位于X染色体上 ,其编码产物是一种可直接介导细胞核凋亡的效应分子 .鼠AIF前体蛋白在胞浆中合成后 ,通过其N端的线粒体定位信号 (MLS)有效地穿入线粒体膜间隙 ,然后在 10 2位甘氨酸处水解掉MLS ,其余部分再与黄素腺嘌呤二核苷酸 (FAD)结合 ,并重新折叠成为具有促凋亡潜能的成熟AIF分子 ,分子质量为 5 7ku .当凋亡信号刺激时 ,AIF分子从线粒体释放到胞浆 ,然后转位到细胞核内 ,引起染色体核周边凝集和DNA呈大片段断裂 (~ 5 0kb) .该作用不受广谱caspases抑制剂z VAD .fmk的抑制 ,也不受Bcl 2过量表达的影响 .基因剔除实验表明 ,AIF蛋白的促凋亡活性是胚胎小鼠形态发生过程中类胚体成腔所必需的 ,而且是AIF独立作用的结果 ,可以不依赖caspase 3的活性 .因此AIF介导的细胞凋亡可能代表了独立于caspase通路之外的另一条更原始、更保守的凋亡途径 . 展开更多
关键词 诱导因子 细胞 天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶 线粒体 核凋亡
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骨骼肌肌核凋亡与Sarcopenia的关系及体育运动的影响 被引量:1
3
作者 刘延莹 冯庆鲲 +2 位作者 李方晖 童谣 梁亚栋 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2020年第18期4012-4015,共4页
骨骼肌减少症(Sarcopenia)是一种伴随年龄增加而出现的以骨骼肌(Ⅱ型肌纤维为主)质量、肌力和功能减退为主要特征的退行性病变,严重影响老年人的生命质量〔1,2〕。肌核凋亡是Sarcopenia发生的重要机制。衰老过程中,骨骼肌内氧化应激水... 骨骼肌减少症(Sarcopenia)是一种伴随年龄增加而出现的以骨骼肌(Ⅱ型肌纤维为主)质量、肌力和功能减退为主要特征的退行性病变,严重影响老年人的生命质量〔1,2〕。肌核凋亡是Sarcopenia发生的重要机制。衰老过程中,骨骼肌内氧化应激水平升高、抗氧化防御能力降低、线粒体功能失调及再生和修复能力下降等激活肌核凋亡通路,直接或间接导致肌纤维萎缩〔3〕。体育运动是延缓骨骼肌衰老的有效方法〔4,5〕。肌核凋亡信号通路在Sarcopenia发生发展过程中的作用及不同类型体育运动对其影响的阐明,将有助于探讨Sarcopenia发生的肌核凋亡机制,以通过体育运动干预的方式来预防或延缓Sarcopenia。 展开更多
关键词 骨骼肌减少症 核凋亡 体育运动 线粒体
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人重组核凋亡诱导因子1截短体在大肠杆菌中的表达及纯化
4
作者 韩普 莫晓宁 +3 位作者 钟丽君 杨彬 马大龙 娄雅欣 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期979-982,共4页
目的核凋亡诱导因子1(Nuclearapoptosis-inducingfactor1,NAIF1)是本实验室首次克隆和鉴定的新凋亡基因,为了通过Polldown实验研究其结合蛋白,在大肠杆菌中表达和纯化人重组NAIF1(73-327)的截短体。方法通过PCR方法扩增出NAIF1(73-327)c... 目的核凋亡诱导因子1(Nuclearapoptosis-inducingfactor1,NAIF1)是本实验室首次克隆和鉴定的新凋亡基因,为了通过Polldown实验研究其结合蛋白,在大肠杆菌中表达和纯化人重组NAIF1(73-327)的截短体。方法通过PCR方法扩增出NAIF1(73-327)cDNA,并插入pGEX-KG载体,实现插入基因的融合表达,对表达产物进行SDS-PAGE、Westernblot和电喷雾电离-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF-MS/MS)检测分析。结果DNA测序结果证实成功构建了重组融合表达质粒pGEX-KG-NAIF1(73-327),并在大肠杆菌中稳定表达,表达产物分子量约为53kD,与预期一致,表达量约占菌体总蛋白的22%,纯化蛋白经Westernblot和二级质谱(MS/MS)分析证明表达蛋白为GST-NAIF1(73-327)融合蛋白。结论获得了重组GST-NAIF1(73-327)融合蛋白的高效表达,为下阶段NAIF1的结构与功能研究打下了基础。 展开更多
关键词 核凋亡诱导因子1 重组蛋白 蛋白纯化 大肠杆菌
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金双歧对新生儿黄疸的治疗作用及单个核细胞凋亡的影响 被引量:11
5
作者 严务贞 郭洲 +3 位作者 宋文秀 赵华新 林永文 黄桥旺 《实用医学杂志》 CAS 2005年第9期956-957,共2页
目的:探讨金双歧制剂对新生儿高胆红素血症的治疗作用及外周血单个核细胞凋亡的影响。方法:将2003年6月至2004年10月住院的黄疸新生儿50例,随机分为观察组和对照组各25例,对照组采用常规的治疗,观察组则在对照组的基础上加口服金双歧制... 目的:探讨金双歧制剂对新生儿高胆红素血症的治疗作用及外周血单个核细胞凋亡的影响。方法:将2003年6月至2004年10月住院的黄疸新生儿50例,随机分为观察组和对照组各25例,对照组采用常规的治疗,观察组则在对照组的基础上加口服金双歧制剂,观察两组患儿黄疸消退时间,并于治疗的第1天和第7天分别检测患儿外周血的单个核细胞凋亡情况,同时检测20例正常儿的外周血单个核细胞凋亡比例,比较两种治疗情况下细胞凋亡率的变化。结果:口服金双歧制剂能有效地促进新生儿黄疸的消退,且能降低黄疸新生儿的外周血单个核细胞凋亡率。结论:口服金双歧制剂对新生儿黄疸有一定的辅助治疗作用,可促进黄疸消退和通过降低单个核细胞的凋亡比例来预防感染。 展开更多
关键词 金双歧 新生儿黄疸 治疗 单个细胞
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激素敏感型肾病综合征儿外周血单个核细胞凋亡的临床研究 被引量:3
6
作者 黄欣秋 杜华 +1 位作者 刘振翔 周微雅 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期628-629,共2页
目的 观察肾病综合征(NS)在强的松治疗前后激素敏感者外周血单个核细胞(PBMC)的细胞凋亡变化,以探讨PBMC凋亡在激素治疗中的意义及与尿蛋白的关系。方法37例激素敏感型NS儿分别于强的松治疗前和治疗后第2、4、6、8周采血,进行细胞凋亡... 目的 观察肾病综合征(NS)在强的松治疗前后激素敏感者外周血单个核细胞(PBMC)的细胞凋亡变化,以探讨PBMC凋亡在激素治疗中的意义及与尿蛋白的关系。方法37例激素敏感型NS儿分别于强的松治疗前和治疗后第2、4、6、8周采血,进行细胞凋亡形态学观察,计算百分率。结果 治疗前后2、4、6周比较差异均有显著性(P均<0.01);治疗后外周血PBMC与尿蛋白变化呈正相关关系。结论 激素敏感型NS儿使用足量强的松治疗可诱导外周血PBMC细胞凋亡增加,也诱导其病情缓解,当尿蛋白转阴后诱导细胞凋亡随之减少。 展开更多
关键词 激素敏感型肾病综合征 儿童 外周血 单个细胞 临床研究
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急性脑梗死后单个核细胞凋亡与细胞因子、黏附分子的关系 被引量:2
7
作者 胡跃强 刘泰 +2 位作者 祝美珍 胡玉英 古联 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2008年第5期365-367,共3页
目的研究急性脑梗死(ACI)患者单个核细胞(MNCs)凋亡的变化,检测周围血中白细胞介素(IL)-1β、IL-8和可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)水平的变化,以探讨细胞因子和黏附分子对MNCs凋亡的影响。方法采用流式细胞术检测64例ACI患者和30名... 目的研究急性脑梗死(ACI)患者单个核细胞(MNCs)凋亡的变化,检测周围血中白细胞介素(IL)-1β、IL-8和可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)水平的变化,以探讨细胞因子和黏附分子对MNCs凋亡的影响。方法采用流式细胞术检测64例ACI患者和30名健康对照者MNCs的凋亡情况,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞因子和黏附分子水平。结果ACI患者MNCs凋亡率明显高于健康对照组,呈逐渐升高趋势;ACI患者发病72 h血清IL-1β、IL-8和sICAM-1水平明显高于健康对照组(P<0.01),发病第1周达到最高值,至第14天呈逐渐下降趋势,且与MNCs凋亡率均呈正相关。结论ACI患者MNCs凋亡率增加,可能与炎性细胞因子产生过多、免疫细胞黏附分子表达上调密切相关,通过适度调控细胞因子的分泌和MNCs的凋亡可能会改善ACI预后。 展开更多
关键词 脑梗死 黏附分子 细胞因子 单个细胞
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雷公藤红素诱导视网膜母细胞瘤Y79细胞凋亡及对凋亡核因子-κB的影响 被引量:13
8
作者 闵红波 黄勤 +2 位作者 郭志勇 王建文 步世忠 《中国中医眼科杂志》 2004年第3期146-148,共3页
目的 研究雷公藤红素抑制视网膜母细胞瘤 (Rb)Y79细胞生长并诱导其凋亡的作用及信号转导机制。方法 应用 3H -胸腺嘧啶掺入分析法观察雷公藤红素对细胞生长的抑制作用 ,以细胞形态学改变和DNA片段凝胶电泳分析细胞凋亡 ,用Westernblo... 目的 研究雷公藤红素抑制视网膜母细胞瘤 (Rb)Y79细胞生长并诱导其凋亡的作用及信号转导机制。方法 应用 3H -胸腺嘧啶掺入分析法观察雷公藤红素对细胞生长的抑制作用 ,以细胞形态学改变和DNA片段凝胶电泳分析细胞凋亡 ,用Westernblot分析对NF -κB的影响。结果 雷公藤红素可明显抑制Y79细胞的生长 ,1μmol/L雷公藤红素处理 4 8小时 ,3H -胸腺嘧啶掺入率下降达 5 6 15 % ,此条件下雷公藤红素可诱导Y79细胞凋亡。在此过程中NF -κB表达被抑制。结论 雷公藤红素可抑制Y79细胞生长并诱导其凋亡 ,其作用机制是抑制NF -κB。 展开更多
关键词 雷公藤红素 视网膜母细胞瘤 生长抑制 因子-κB
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六味地黄丸对兔退变椎间盘髓核细凋亡的影响 被引量:3
9
作者 郑先波 徐无忌 《内蒙古中医药》 2017年第4期130-131,共2页
目的:通过检测六味地黄丸对兔退变椎间盘中髓核细胞凋亡的影响,探讨六味地黄丸治疗因椎间盘退变引起的椎间盘源性腰痛的疗效,使补肾法干预椎间盘髓核细胞凋亡成为新的治疗靶点,为椎间盘退行性病变相关疾患提供新的治疗思路。方法:80只... 目的:通过检测六味地黄丸对兔退变椎间盘中髓核细胞凋亡的影响,探讨六味地黄丸治疗因椎间盘退变引起的椎间盘源性腰痛的疗效,使补肾法干预椎间盘髓核细胞凋亡成为新的治疗靶点,为椎间盘退行性病变相关疾患提供新的治疗思路。方法:80只新西兰白兔,随机分为六味地黄丸组、模型组、假手术组及空白组,各20只。模型组、六味地黄丸组建立椎间盘退变动物模型。六味地黄丸组予六味地黄丸混悬液灌胃,余三组以等量生理盐水灌胃。分2、4、6、8周分批次处死动物,留取椎间盘标本检测。结果:六味地黄丸组及模型组凋亡率均高于假手术组及空白组,差异具有统计学意义(P<0.05);各组髓核细胞凋亡率随着喂养时间的延长均有所上升,空白组及假手术组上升较少,实验前后凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05),而模型组及六味地黄丸组上升较多,组内比较差异具有统计学意义(P<0.05);各时间点六味地黄丸组凋亡率较模型组凋亡率比较差异均有统计学意义(P<0.05),说明六味地黄丸能部分延缓髓核细胞凋亡。 展开更多
关键词 椎间盘退变 细胞 六味地黄丸
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激素耐药型肾病综合征患儿外周血单个核细胞凋亡的临床观察
10
作者 黄欣秋 杜华 +1 位作者 周微雅 刘振翔 《广西医学》 CAS 2003年第12期2424-2425,共2页
目的 :观察小儿肾病综合征 (NS)强的松治疗前后激素耐药者外周血单个核细胞 (PBMC)的细胞凋亡变化 ,探讨PBMC细胞凋亡在激素治疗中的意义及与疗效之间的关系。方法 :1 5例激素耐药型肾病综合征患者分别于强的松治疗前和治疗后第 2、4、6... 目的 :观察小儿肾病综合征 (NS)强的松治疗前后激素耐药者外周血单个核细胞 (PBMC)的细胞凋亡变化 ,探讨PBMC细胞凋亡在激素治疗中的意义及与疗效之间的关系。方法 :1 5例激素耐药型肾病综合征患者分别于强的松治疗前和治疗后第 2、4、6、8周采血 ,进行细胞凋亡形态观察 ,计算百分率。结果 :治疗前与治疗后 2、4、6周比较均 P<0 .0 5差异有显著性意义 ;但第 8周尿蛋白未见转阴 ,而凋亡率下降。结论 :小儿 NS耐药型患者使用足量强的松治疗可短期诱导外周血 PBMC细胞凋亡增加 ,至 8周时诱导凋亡减弱 ,故持续足量使用不应超过八周。当尿蛋白未好转 ,应及时加用其它免疫抑制剂治疗 ,由此可见 展开更多
关键词 激素耐药 肾病综合征 患儿 外周血单个细胞 临床观察
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重组人白血病抑制因子蛋白对兔椎间盘退变模型髓核细胞凋亡的影响机制 被引量:1
11
作者 穆林 房昕 +2 位作者 龚箭 高迎庆 周强 《中国医院用药评价与分析》 2020年第4期403-406,共4页
目的:探讨重组人白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)蛋白对兔椎间盘退变模型髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)凋亡的影响机制。方法:采用针刺法构建兔椎间盘退变模型,利用磁共振成像观察兔椎间盘退变程度,摘除髓核... 目的:探讨重组人白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)蛋白对兔椎间盘退变模型髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)凋亡的影响机制。方法:采用针刺法构建兔椎间盘退变模型,利用磁共振成像观察兔椎间盘退变程度,摘除髓核组织提取组织蛋白,采用Western Blot法检测髓核组织LIF蛋白表达水平,提取退变NPCs,采用流式细胞术观察不同浓度重组人LIF蛋白对退变NPCs凋亡的影响,采用Western Blot法检测不同浓度重组人LIF蛋白对细胞外基质成分和MAPK-ERK1/2通路蛋白表达的影响。结果:模型组兔的椎间盘高度和信号-噪声比(SNR)明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);模型组兔髓核组织中LIF蛋白表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);针刺2周、4周及8周,各组兔髓核组织中LIF蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);0、10、20、50及100 ng/ml重组人LIF蛋白处理的退变NPCs凋亡率比较,差异有统计学意义(P<0.05);0、10、20、50及100 ng/ml重组人LIF蛋白处理的退变NPCs中Aggtecan蛋白、Ⅱ型胶原及p-ERK1/2蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:兔椎间盘退变髓核组织中LIF蛋白呈高表达,其可能通过激活ERK1/2通路促进细胞外基质合成达到抑制NPCs凋亡作用,重组LIF在延缓椎间盘退变方面显示出了良好前景。 展开更多
关键词 重组人LIF蛋白 兔椎间盘退变模型 细胞 机制
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烙灸疗法通过Fas/FasL信号通路对髓核细胞凋亡的调节机制 被引量:1
12
作者 马兰洁 杨忠明 +6 位作者 许建峰 田良 林瑞珠 童昕 孙博文 尤娜 李国豪 《亚太传统医药》 2021年第11期32-35,共4页
目的:探讨烙灸疗法通过Fas/FasL信号通路对髓核细胞凋亡的调节机制。方法:将SD大鼠120只随机分为烙灸组、拮抗剂组、模型组和空白组,每组30只。采用公认尾椎椎间盘腰椎硬膜外埋置法造模1月后进行干预。烙灸组在腰椎局部行烙灸疗法,1次/d... 目的:探讨烙灸疗法通过Fas/FasL信号通路对髓核细胞凋亡的调节机制。方法:将SD大鼠120只随机分为烙灸组、拮抗剂组、模型组和空白组,每组30只。采用公认尾椎椎间盘腰椎硬膜外埋置法造模1月后进行干预。烙灸组在腰椎局部行烙灸疗法,1次/d,每次10min。拮抗剂组大鼠在腹腔内注射抗Fas抗体,10μg/kg/week,干预方法同烙灸组。模型组大鼠固定器上固定10min,每天1次,不予其他干预。空白组大鼠不予造模和干预。四组大鼠每组均干预1月、3月、6月后进行取材。采用TUNEL法对髓核细胞的凋亡进行检测。结果:烙灸组的髓核细胞凋亡指数均高于空白组、模型组及拮抗剂组(P<0.05)。结论:烙灸疗法可以促进大鼠椎间盘髓核细胞的凋亡,进一步证明烙灸可以促进新生血管的形成、加快髓核细胞的凋亡。 展开更多
关键词 腰椎间盘突出后髓重吸收 烙灸疗法 Fas/FasL信号通路 细胞
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补肾壮督方含药血清对髓核细胞线粒体凋亡通路的影响 被引量:9
13
作者 周文明 林一峰 +1 位作者 张震 迟利业 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第23期3643-3648,共6页
背景:线粒体凋亡通路是细胞凋亡中的重要通路,前期动物实验发现补肾壮督方可通过抑制线粒体凋亡通路改善椎间盘退变,但其作用机制还有待研究。目的:观察补肾壮督方含药血清对人髓核细胞线粒体凋亡通路关键蛋白的影响,探讨其改善椎间盘... 背景:线粒体凋亡通路是细胞凋亡中的重要通路,前期动物实验发现补肾壮督方可通过抑制线粒体凋亡通路改善椎间盘退变,但其作用机制还有待研究。目的:观察补肾壮督方含药血清对人髓核细胞线粒体凋亡通路关键蛋白的影响,探讨其改善椎间盘退变的机制。方法:①37只SD雄性大鼠,随机分为正常组、低剂量中药组[0.506 g/(kg d)]、中剂量中药组[1.012 g/(kg d)]及高剂量中药组[2.024 g/(kg d)],连续灌胃2周,灌胃结束后制备含药血清;②人髓核细胞随机分为正常组、模型组、低剂量含药血清组、中剂量含药血清组、高剂量含药血清组,模型组用200μmol/L H2O2处理6 h,正常组不进行任何处理,低、中、高剂量含药血清组造模后用体积分数为2%含药血清干预48 h。透射电镜观察髓核细胞的超微结构,流式细胞术检测髓核细胞凋亡率和线粒体膜电位,qPCR和Western blot检测Apaf1、Bcl-2、Bax及Cytc的表达。结果与结论:①与正常组相比,模型组出现明显的细胞凋亡形态特征,髓核细胞凋亡率显著增加(P<0.05),Apaf1、Cytc、Bax mRNA及蛋白表达量均显著增加(P<0.05),线粒体膜电位、Bcl-2 mRNA及其蛋白表达量显著下降(P<0.05);②补肾壮督方含药血清干预后,髓核细胞凋亡率明显减少(P<0.05),Apaf1、Cytc、Bax mRNA及蛋白表达量均明显下降(P<0.05),线粒体膜电位、Bcl-2 mRNA及其蛋白表达量显著增加(P<0.05);③补肾壮督方含药血清可有效抑制髓核细胞凋亡,并呈剂量依赖性,可能通过减少Apaf1、Cytc、Bax蛋白及mRNA表达,增加Bcl-2蛋白及mRNA表达,抑制线粒体凋亡通路,从而改善椎间盘退变。 展开更多
关键词 椎间盘退变 细胞 线粒体通路 含药血清 补肾壮督方
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miR-146b-5p靶向调控NAIF1抑制胃癌细胞凋亡 被引量:2
14
作者 马君 王燕忠 牟一平 《全科医学临床与教育》 2020年第9期788-792,共5页
目的分析miR-146b-5p对胃癌细胞MGC803增殖与凋亡的调控作用及分子机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同胃癌细胞系(MGC803、BGC823、MKN28、MKN45和SGC7901)中miR-146b-5p水平;应用miR-146b-5p抑制剂(inhibitor)和阴性对照(miRN... 目的分析miR-146b-5p对胃癌细胞MGC803增殖与凋亡的调控作用及分子机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同胃癌细胞系(MGC803、BGC823、MKN28、MKN45和SGC7901)中miR-146b-5p水平;应用miR-146b-5p抑制剂(inhibitor)和阴性对照(miRNA-NC)分别转染胃癌细胞MGC803,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡比例;TargetScan数据库分析miR-146b-5p的潜在靶基因,蛋白免疫印迹技术(western blot)检测核诱导凋亡因子1(NAIF1)蛋白表达水平;双荧光素酶实验验证miR-146b-5p和NAIF1之间的关系。结果不同胃癌细胞系(MGC803、BGC823、SGC7901、MKN45和MKN28)miR-146b-5p水平均高于正常人胃黏膜细胞(GES-1)(t分别=26.21、13.08、11.09、11.09、6.41,P均<0.05)。miR-146b-5p inhibitor转染胃癌细胞MGC803后miR-146b-5p水平明显降低(t=9.14,P<0.05)。抑制MGC803胃癌细胞miR-146b-5p水平后,细胞活力明显降低,细胞凋亡比例升高(t分别=3.73、9.55,P均<0.05)。miR-146b-5p mimics转染组WT-NAIF1荧光素酶活性明显低于miRNA-NC组(t=8.35,P<0.05)。Western blot结果表明,上调miR-146b-5p水平后,NAIF1蛋白表达明显降低(t=5.67,P<0.05),而下调miR-146b-5p水平后,NAIF1蛋白表达明显升高(t=4.32,P<0.05),在过表达NAIF1的基础上转染miR-146b-5p,细胞活力明显升高,细胞凋亡比例降低(t分别=6.54、4.73,P均<0.05)。结论miR-146b-5p通过靶向抑制NAIF1抑制胃癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 miR-146b-5p 诱导因子1
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支气管哮喘患者外周血单个核细胞凋亡的检测 被引量:1
15
作者 田新瑞 刘卓拉 +3 位作者 宋满景 李建强 薄建平 郝峻涛 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期697-697,共1页
关键词 支气管哮喘 外周血 单个细胞 检测
原文传递
单个核细胞凋亡可作为评价透析膜生物相容性指标
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作者 沈颖 苏京平 《中华医学信息导报》 2000年第19期9-9,共1页
该院肾内科硕士研究生罗洋在王质刚教授指导下,通过对单个核细胞凋亡的观察,首次提出以单个核细胞凋亡作为评价透析膜生物相容性指标的观点。该方法对血液透析临床准确评价透析膜,具有指导作用。
关键词 单个细胞 生物相容性 透析膜 血液透析 硕士研究生 甲状旁腺功能亢进 北京友谊医院 指导作用 钙磷代谢异常 准确评价
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Nuclear apoptosis induced by isolated mitochondria 被引量:2
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作者 JIANGZHENGFAN YUNZHAO 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2000年第3期221-232,共12页
We isolated and purified mitochondria from mouse livers and spinach leaves. When added into egg extracts of Xenopus laevis, they caused nuclei of mouse liver to undergo apoptotic changes. Chromatin condensation, margi... We isolated and purified mitochondria from mouse livers and spinach leaves. When added into egg extracts of Xenopus laevis, they caused nuclei of mouse liver to undergo apoptotic changes. Chromatin condensation, margination and DNA ladder were observed. After incubating isolated mitochondria in some hypotonic solutions, and centrifuging these mixtures at high speed, we got mitochondrial supernatants. It was found that in the absence of cytosolic factor, the supernatant alone was able to induce apoptotic changes in nuclei. The effective components were partly of protein. DNA fragmentation was partly inhibited by caspase inhibitors AC-DEVD-CHO and AC- YVADCHO. Meanwhile, caspase inhibitors fully blocked chromatin condensation. Primary characterization of the nuclear endonuclease(s) induced by mitochondrial supernatants was also conducted. It was found that this endonuclease is different from endonuclease G, cytochrome c-induced nuclease, or Ca2+-activated endonuclease. 展开更多
关键词 分离线粒体 诱导 核凋亡 酸内切酶
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ERK1/2信号通路参与美洲大蠊提取物诱导肝癌细胞凋亡的研究 被引量:6
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作者 杨蕊菲 李昭宜 +2 位作者 李俣亭 赵丽娟 李娟 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期121-125,共5页
目的:观察美洲大蠊提取物抗肝癌细胞的凋亡作用是否与胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)介导的凋亡通路有关。方法:以人肝癌SMMC-7721细胞株为研究对象,MTT法检测肿瘤细胞抑制率; Annexin V-FITC/PI染色观察细胞凋亡情况; JC-1染色观察线粒... 目的:观察美洲大蠊提取物抗肝癌细胞的凋亡作用是否与胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)介导的凋亡通路有关。方法:以人肝癌SMMC-7721细胞株为研究对象,MTT法检测肿瘤细胞抑制率; Annexin V-FITC/PI染色观察细胞凋亡情况; JC-1染色观察线粒体膜电位情况;蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测细胞核内凋亡诱导因子(AIF)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、大鼠肉瘤蛋白(Ras)、快速反应肉瘤蛋白(Raf)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白表达。结果:与阴性对照组相比,40、80μg/ml的美洲大蠊提取物可不同程度地抑制SMMC-7721细胞的增殖,诱导其凋亡,降低线粒体膜电位。Western Blot结果显示,与阴性对照组相比美洲大蠊提取物可使核AIF、caspase-3表达增多,而ERK1/2通路的Ras、Raf、p-ERK蛋白表达均有不同程度降低。ERK1/2抑制剂PD98059在抑制ERK1/2信号通路的同时,抑制了SMMC-7721增殖,诱导其凋亡。结论:美洲大蠊提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡,抑制其增殖,机制可能与下调Ras/Raf/ERK1/2信号通路有关。 展开更多
关键词 美洲大蠊提取物 胞外信号调节激酶1/2 诱导因子
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芪参固肾方结合健脾益肾针刺治疗慢性肾小球肾炎的疗效观察 被引量:4
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作者 章家欢 黄瑾 饶克瑯 《中医药导报》 2021年第6期116-119,共4页
目的:观察芪参固肾方结合健脾益肾针刺治疗慢性肾小球肾炎(CGN)的临床疗效。方法:按照随机数字表法将116例CGN患者分为治疗组(57例)和对照组(59例)。对照组患者采用缬沙坦胶囊口服,80 mg/次,1次/d,连续服用8周。治疗组患者在对照组治疗... 目的:观察芪参固肾方结合健脾益肾针刺治疗慢性肾小球肾炎(CGN)的临床疗效。方法:按照随机数字表法将116例CGN患者分为治疗组(57例)和对照组(59例)。对照组患者采用缬沙坦胶囊口服,80 mg/次,1次/d,连续服用8周。治疗组患者在对照组治疗基础上口服芪参固肾方及健脾益肾针刺激治疗,健脾益肾针刺取穴足三里、三阴交、关元、脾俞、肾俞,每天针刺1次,每周6次,共治疗8周。比较两组患者治疗前后中医证候主症评分,并比较两组患者血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白定量(24 h Upro)、外周血单个核细胞(PBMC)凋亡率、血清单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及转化生长因子-β1(TGF-β1),并评价临床疗效。结果:治疗组和对照组分别有3例、5例患者失访,两组各有54例完成研究。治疗组患者临床疗效优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者腰膝酸软、倦怠乏力、胃脘胀满、浮肿评分均降低(P<0.01),且治疗组患者治疗后中医证候评分均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。与治疗前比较,治疗后两组患者Cr、BUN、24h Upro、PBMC凋亡率、MCP-1、TGF-β1水平均降低(P<0.01),且治疗组患者治疗后Cr、BUN、24 h Upro、PBMC凋亡率、MCP-1、TGF-β1水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:芪参固肾方结合健脾益肾针刺治疗CGN效果显著,可有效缓解患者症状,改善肾功能,其机制可能与降低PBMC凋亡率,下调血清MCP-1、TGF-β1水平有关。 展开更多
关键词 慢性肾小球肾炎 芪参固肾方 健脾益肾 针刺 外周血单个细胞 细胞趋化蛋白-1 转化生长因子-β1
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营养
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《中国医学文摘(卫生学分册)》 2007年第6期345-351,共7页
072360 膳食对大鼠动脉窖蛋白-1表达的影响;072361 维生素A和锌过量摄入对大鼠脾脏的损伤作用;072362 维生素C对脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导的单个核细胞凋亡及增殖抑制作用的影响;072363
关键词 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 单个细胞 增殖抑制作用 营养 维生素C 锌过量摄入 HLA-I 蛋白-1
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