核受体相关蛋白1基因慢病毒载体的构建

目的构建使用绿色荧光蛋白(GFP)标记的核受体相关蛋白1 (nuclear receptor related 1 protein,Nurr1)慢病毒表达载体(DCE-Nurr1)并鉴定。方法使用引物设计软件Primier5设计基因Nurr1引物并采用聚合酶链反应(PCR)对其进行扩增,利用XbaI和Not I分别将基因Nurr1和载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP进行双酶切,利用T4链接酶将已酶切的基因Nurr1和已酶切的载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP连接起来,完成慢病毒表达载体的构建。结果通过PCR成功地扩增了Nurr1基因并连接到载体pCDHCMV-MCS-EF1-copGFP上,序列与GenBank登记的序列一致。结论成功构建DCE-Nurr1慢病毒表达载体,为进一步在体内或体外研究Nurr1基因功能及其对多巴胺神经元的保护作用提供了基础。

桑叶总黄酮对GDM大鼠代谢功能、子代糖耐量及Rev-erbα/Bmal1水平的研究

目的 探究桑叶总黄酮对GDM大鼠代谢功能、子代糖耐量及Rev-erbα/Bmal1水平的研究。方法 选取40只SPF级SD雌性大鼠,随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、二甲双胍组(C组)、桑叶总黄酮组(D组),每组10只,对B、C、D组采用高脂饲料及链脲佐菌素进行糖尿病建模,A组不建立该模型,建模成功后,对C组灌胃100mg/kg的二甲双胍,对D组灌胃200 mg/kg的桑叶总黄酮,A、B组同期给予灌胃同体积生理盐水,血糖仪检测大鼠血糖,全自动生化分析仪检测大鼠血清中代谢指标,H-E染色法检测大鼠子宫组织病理形态,葡萄糖耐受实验检测子代糖耐量水平,免疫印迹法检测Rev-erbα/Bmal1蛋白表达。结果 与A组比较,B组大鼠及子代大鼠各时间段血糖、Rev-erbα/Bmal1蛋白表均明显升高,与B组比较,C、D组大鼠及子代大鼠各时间段血糖、Rev-erbα/Bmal1蛋白表均明显降低,且D组比C组降低明显;与A组比较,B组大鼠及子代大鼠血液代谢指标中GHb、TG、TC、LDL含量均显著升高,HDL含量均显著降低,与B组比较,C、D组大鼠及子代大鼠代谢指标GHb、TG、TC、LDL含量均明显降低,HDL含量均显著升高,且D组比C组变化显著;A组大鼠子宫病理状态良好,B组大鼠子宫病理出现损伤,与B组相比,C、D组大鼠病理情况明显改善,且D组比C组改善明显,各组子代大鼠子宫内膜病理形态均正常,未出现明显病理现象;与A组比较,B组大鼠子代血糖曲线及糖耐量曲线下面积显著升高,与B组相比,C、D组大鼠子代血糖曲线及糖耐量曲线下面积显著降低,且D组比C组降低明显。结论 桑叶总黄酮对GDM大鼠具有显著疗效,其可有效改善大鼠代谢功能及子代糖耐量,并降低Rev-erbα及Bmal1蛋白表达。