核因子-κBp50和P16^INK4A在尖锐湿疣皮损中的表达及意义

尖锐湿疣（condyloma acuminatum，CA）是由人乳头瘤病毒（HPV）感染引起的性传播疾病之一，最常见于HPV6、11型感染。国内外研究表明CA可发生癌变，因此尖锐湿疣与癌变的关系日益受到人们的关注。笔者通过免疫组化方法对尖锐湿疣组织中核因子（NF）-κBp50和P16^INK4A表达进行了研究，以便进一步了解尖锐湿疣的发病机制。

NF-κBp50参与IL-4在THP-1细胞中诱导DC-SIGN的表达(英文)

树突状细胞表面特异的胞间黏附分子3捕获非整合素(DC-specific intercellular adhesion molecule-3-grabbing nonintegrin,DC-SIGN)是树突状细胞表面特异的蛋白,在抗原呈递过程中起关键作用.这种特异性的表达和DC-SIGN的调节机制有关.到目前为止,DC-SIGN表达调控的机制还不是很清楚.IL-4是诱导DC-SIGN表达的最重要的细胞因子之一,而NF-κB是调控细胞信号转导的一个重要调控因子,两者都和DC-SIGN的表达调节相关.研究了IL-4和NF-κB对DC-SIGN启动子活性、对DC-SIGN表达的影响以及IL-4和NF-κB之间相互作用的关系.发现:DC-SIGN启动子中NF-κB位点缺失可以使DC-SIGN启动子活性下降大约50%,NF-κBp50可以促进DC-SIGN在THP-1细胞的表达,IL-在THP-1细胞诱导DC-SIGN表达的同时,也促进了NF-κBp50的表达.这些结果显示,在THP-1细胞中NF-κBp50参与IL-4诱导的DC-SIGN表达.

FOXO3调控NF-κBp50表达介导肠上皮细胞凋亡参与溃疡性结肠炎相关癌变及健脾清热活血方药干预研究

目的观察溃疡性结肠炎相关癌变(ulcerative colitis associated carcinogenesis,UCAC)结肠黏膜FOXO3、NF-κBp50、C-myc、肠上皮细胞凋亡及健脾清热活血方药对上述指标的影响,探讨健脾清热活血方药防治UCAC的可能机制。方法120只SPF级雄性Balb-c按体质量随机分为正常组、模型组、对照组(美沙拉嗪组)、治疗组(低、中、高剂量组),采用DMH/DSS复合法制备UCAC模型,除正常组同步饲养外,其余各组分别予不同药物干预20周,第20周末处死全部动物。采用TUNEL染色检测肠上皮细胞凋亡;采用Real-time PCR及Western-bloting技术检测FOXO3、NF-κBp50、C-myc表达变化。结果 UCAC模型组小鼠结肠黏膜上皮细胞凋亡率为(18.65±2.47)%,结肠Foxo3、NF-ΚBp50、C-myc基因及其蛋白表达上升,该变化与UCAC组织病理学积分呈正相关;治疗组结肠黏膜上皮细胞凋亡率为(6.54±1.13)%,结肠FOXO3、NF-κBp50、C-myc基因及其蛋白表达较模型组比较明显下降,有统计学意义(P<0.05)。结论 FOXO3上调NF-κBp50表达诱导肠上皮细胞凋亡加速,破坏肠黏膜屏障,导致炎症持续在UCAC发病中占据重要地位;健脾清热活血方药可能通过下调FOXO3、NF-κBp50、C-myc表达,介导肠上皮细胞凋亡,修复肠黏膜屏障而发挥缓解UCAC的效用。

NF-κBp50、COX-2基因蛋白在尖锐湿疣组织中的表达及意义

目的:探讨核因子-κBp50(NF-κBp50)、环氧合酶-2(COX-2)基因蛋白在尖锐湿疣(condyloma acuminatum,CA)组织中的表达及意义。方法:采用免疫组化SP法对49例CA组织和26例正常宫颈组织进行NF-κBp50、COX-2蛋白检测。结果:NF-κBp50、COX-2基因蛋白在CA组织中的表达率分别为65.3%和61.2%,显著高于正常对照组(P<0.01)。CA组织中NF-κBp50和COX-2之间存在明显的正相关(rs=0.714,P<0.01)。结论:NF-κBp50、COX-2基因蛋白在CA组织中有过表达现象,提示NF-κBp50信号途径在CA发病和发展中可能起重要作用。

肝细胞癌中M2巨噬细胞标志物与NF-κB p50相关性研究

目的:探讨不同分期肝细胞癌病人组织中M2巨噬细胞及核因子κB (NF-κB)p50的表达情况,并分析其表达的相关性。方法:整群收集2012-2015年80例肝细胞肝癌病人和10例肝内胆管结石病人(对照组)的组织标本,采用免疫荧光双染法检测CD163和CD206的表达;收集2015年10月至2016年1月20例接受肝细胞癌手术病人的新鲜组织标本,采用Western blotting法检测不同分期的肝癌组织中CD163、CD206的表达及NF-κB p50的表达。结果:肝癌病人石蜡组织切片中CD163和CD206的共定位高于对照组,Ⅲ+Ⅳ期肝癌切片中的共定位高于Ⅰ+Ⅱ期;Western blotting结果表明,肝癌组织中CD163、CD206及NF-κB p50的表达高于癌旁组织(P<0.05～P<0.01),Ⅲ+Ⅳ期肝癌组织中的表达高于Ⅰ+Ⅱ期(P<0.01)。NF-κB p50与CD163、CD206的表达均呈正相关(r=0.963、0.944,P<0.01)。结论:随着肝癌进展,M2巨噬细胞数量和NF-κB p50的表达均升高,提示两者可能具有协同作用,共同促进肝癌进展。

慢性阻塞性肺疾病大鼠膈肌萎缩信号通路与白细胞介素17相关性的研究

目的研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠膈肌萎缩信号通路——泛素-蛋白酶体通路中E2-14K、MAFbx和MuRF-1蛋白表达及核转录因子κB(NF-κB)p50表达情况,以及前炎症因子白细胞介素17(IL-17)在大鼠血清及膈肌中的表达,探讨膈肌萎缩的可能调控机制。方法采用气管内滴入脂多糖+反复熏香烟法复制COPD大鼠动物模型。Western blot法测定大鼠膈肌内E2-14K、MAFbx、MuRF-1及NF-κB p50表达,ELISA法测定大鼠血清及膈肌中IL-17的表达。结果 Westernblot结果显示COPD大鼠膈肌中E2-14K、MAFbx、MuRF-1及NF-κB p50蛋白的表达均较对照组明显升高(0.96±0.12比0.53±0.09,0.99±0.10比0.53±0.08,0.95±0.08比0.51±0.16,1.11±0.10比0.64±0.50,P均<0.01)。ELISA结果显示IL-17在血清及膈肌中的表达均升高(P均<0.01)。NF-κB p50与E2-14K、MAFbx、MuRF-1水平呈显著正相关(r值分别为0.82、0.92、0.86,P均<0.01);血清IL-17与中性粒细胞百分比、NF-κB p50、E2-14K、MAFbx、MuRF-1呈显著正相关(r值分别为0.94、0.90、0.85、0.84及0.79,P均<0.01);膈肌IL-17与中性粒细胞百分比、NF-κB p50、E2-14K、MAFbx、MuRF-1呈显著正相关(r值分别为0.88、0.90、0.72、0.86及0.80,P均<0.01);血清IL-17与膈肌IL-17呈显著正相关(r=0.84,P<0.01)。结论 COPD大鼠膈肌中泛素-蛋白酶体通路与NF-κB通路表达上调可能是导致膈肌萎缩的主要原因之一,IL-17可能参与了膈肌萎缩的调控。

丹芍化纤胶囊对肺纤维化大鼠肺组织中calpain2,NF-κB及p38MAPK表达的影响

目的观察博莱霉素致大鼠肺纤维化中calpain2、NF-κB p50蛋白及p38MAPK表达的变化及中药丹芍化纤胶囊对其表达的影响。方法选取SD大鼠30只,随机分为正常对照组(正常组)、肺纤维化模型组(模型组)和丹芍化纤胶囊治疗组(丹芍组),每组各10只。正常对照组气管内滴注生理盐水,模型组和丹芍组气管内一次性灌注博莱霉素5 mg/kg诱导肺纤维化,丹芍组于造模第2天给予丹芍化纤胶囊混悬液灌胃(0.8 g.kg-1.d-1)治疗,正常组及模型组则给予等量生理盐水灌胃。实验第28天称大鼠体重,处死各组大鼠,称肺湿重并收集肺组织,行HE和Masson染色观察肺组织病理变化;采用免疫组织化学的方法检测肺组织中calpain2、NF-κB p50蛋白及p38MAPK蛋白的表达情况;运用荧光实时定量PCR(real-time PCR)检测肺组织中calpain2及p38MAPK mRNA的表达变化。结果①与正常组比较,模型组大鼠肺组织中calpain2,NF-κB p50和p38MAPK蛋白表达明显升高,且calpain2及p38MAPK mRNA的表达也显著增加。②与模型组相比,丹芍组大鼠肺组织中calpain2,NF-κBp50,p38MAPK蛋白表达及calpain2,p38MAPK mRNA的表达均显著减少,但未恢复正常水平。结论丹芍化纤胶囊早期应用可在一定程度上减轻博莱霉素诱导的肺泡炎症反应及肺纤维化进展,对肺纤维化具有一定的治疗作用。丹芍化纤胶囊对肺纤维化的干预机制可能与其抑制肺组织中calpain2,NF-κBp50和p38MAPK的表达有关。

p38MAPK、NF-κB与氧化应激在肝纤维化中作用

目的观察p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、核因子-κBp50(NF-κBp50)在肝纤维化发生发展中作用。方法选取SD大鼠30只,随机分为对照组、肝纤维化4、8周组,每组各10只;肝纤维化组按0.3 mL/100g皮下注射40%CCl4,隔3 d注射1次,造模时间分别为4和8周;于相应时间点处死大鼠并收集肝组织,观察肝组织病理学改变;采用比色法检测肝组织中丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量;采用免疫组化及western blot检测肝组织中p38MAPK、NF-κBp50蛋白表达变化。结果与对照组比较,肝纤维化4周组大鼠肝组织中p38MAPK(7.9±2.3)、NF-κBp50(16.3±8.1)、MDA[(1.8±0.9)nmol/mgprot]及肝纤维化8周组大鼠肝组织中p38MAPK(11.5±6.8)、NF-κBp50(24.6±13.5)和MDA[(2.9±1.3)nmol/mgprot]的含量均升高(P<0.05);与对照组比较,肝纤维化4、8周组大鼠肝组织中SOD酶活性[(40.6±5.8)、(34.4±3.1)μ/mgprot]均降低(P<0.01)。结论p38MAPK、NF-κBp50及氧化应激可能在肝纤维化的发生发展过程中发挥重要作用。