大鼠脊髓钝挫伤后单核细胞趋化蛋白-1与趋化因子受体2的表达变化

目的:探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和趋化因子受体2(CCR2)在脊髓钝挫伤(SCC)大鼠的表达及其对运动功能和感觉功能的影响。方法:SD大鼠随机分为损伤(SCC组)术后12h、3d、7d、14d组及假手术组共5组。Allen打击法建立SCC模型,进行BBB评分,光热尾痛法测定大鼠温痛觉潜伏期,RT-PCR检测CCR2和MCP-1基因相对表达量,免疫组织化学观察MCP-1和CCR2在脊髓前角和后角的表达。结果:SCC后BBB评分降低,7d与14dBBB评分明显增高。SCC后3、7d温痛觉潜伏期较假手术组缩短。SCC后CCR2mRNA在12h和3d时表达量增高;随后在7、14dCCR2mRNA降低。MCP-1mRNA的表达量在12h、3d、7d增高,14dMCP-1mRNA下降。MCP-1和CCR2在脊髓前角主要表达在神经元中,在脊髓后角主要表达于神经胶质细胞和神经元。结论:MCP-1和CCR2可能作为重要的因子参与脊髓损伤早期的继发性损伤,导致大鼠运动功能和感觉功能障碍。

胰岛素强化治疗对初诊2型糖尿病患者单核细胞趋化蛋白-1、核因子-κB表达的影响

目的探讨短期胰岛素强化治疗对2型糖尿病患者外周血单核细胞上单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)和核因子-κB(Nuclear factor kappa B,NF-κB)表达的影响。方法选择健康成人20例,新诊断2型糖尿病患者20例,分为正常对照组和糖尿病组,糖尿病组采取胰岛素强化治疗,疗程2周。留取清晨空腹肘静脉血5mL,分离出单核细胞,采用流式细胞仪检测胰岛素强化治疗前后单核细胞上MCP-1和NF-κB的表达;同时检测治疗前后Homa-IR、WBC、N%。结果短期胰岛素强化治疗后:外周血单核细胞上MCP-1和NF-κB的表达水平显著降低(P<0.01),由治疗前的(0.89±0.26)%、(15.53±2.49)%分别下降为(0.50±0.18)%、(12.22±2.80)%;Homa-IR,WBC和N%明显降低;单核细胞MCP-1和NF-κB表达水平与Homa-IR、WBC和N%变化无明显相关性。结论2型糖尿病患者体内存在增强的低度炎症反应,胰岛素强化治疗可降低外周血单核细胞上MCP-1和NF-κB蛋白的表达,提示胰岛素除降糖作用外,尚有一定的抗炎作用。

益母草碱调节MCP-1/CCR2信号轴对LPS诱导的肺泡上皮细胞炎性损伤的影响

目的探讨益母草碱(Leo)调节单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/趋化因子受体-2(CCR2)信号轴对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞炎性损伤的影响。方法体外培养人肺泡上皮细胞(AEC);将细胞分为对照组、模型组(LPS组,10μg/mL LPS)、低浓度Leo组(Leo-L组,10μmol/L Leo)、中浓度Leo组(Leo-M组,20μmol/L Leo)、高浓度Leo组(Leo-H组,30μmol/L Leo)、MCP-1激活剂SLIGKV组(SLIGKV组,50μmol/L SLIGKV)、高浓度Leo+MCP-1激活剂SLIGKV组(Leo-H+SLIGKV组,30μmol/L Leo-H+50μmol/L SLIGKV);CCK-8实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清中白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot分别检测细胞中MCP-1/CCR2信号通路及凋亡相关因子表达水平。结果与对照组比较,LPS组AEC细胞凋亡率、MCP-1、CCR2、IL-2、TNF-α及Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达显著升高,OD 450值和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达显著降低(P<0.05);与LPS组比较,Leo-L组、Leo-M组、Leo-H组AEC细胞凋亡率、MCP-1、CCR2、IL-2、TNF-α及Bax表达显著降低,OD 450值和Bcl-2表达显著升高,且呈现剂量依赖性(P<0.05);SLIGKV组上述指标趋势相反;SLIGKV减弱了高剂量Leo对LPS诱导的肺泡上皮细胞炎性损伤的改善作用。结论Leo可能通过抑制MCP-1/CCR2信号轴改善LPS诱导的肺泡上皮细胞炎性损伤。

高良姜素调节MCP-1/CCR2信号轴对肺癌细胞恶性生物学行为的影响

目的研究高良姜素通过调节单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/趋化因子受体-2(CCR2)信号通路对肺癌细胞的恶性生物学行为产生的影响。方法将人肺癌细胞系A549分为ctrl组、低浓度高良姜素组(5μmol/L)、高浓度高良姜素组(100μmol/L)、吉非替尼组(10μmol/L)、高浓度高良姜素+MCP-1组(100μmol/L高良姜素+75 ng/mL MCP-1)。CCK-8试剂盒检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;细胞划痕实验检测细胞迁移;transwell检测细胞侵袭能力;western blot检测MCP-1、CCR2、凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)、细胞增殖核抗原(Ki67)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白表达。结果与ctrl组比较,低浓度高良姜素组、高浓度高良姜素组、吉非替尼组肺癌细胞A549的细胞存活率、细胞迁移愈合率、细胞侵袭数、MCP-1、CCR2、Ki67、MMP-2蛋白表达降低,而细胞凋亡率、Caspase-3含量升高(P<0.05);与高浓度高良姜素组比较,高浓度高良姜素+MCP-1组A549细胞存活率、细胞迁移愈合率、细胞侵袭数、MCP-1、CCR2、Ki67、MMP-2蛋白表达升高,而细胞凋亡率、Caspase-3含量降低(P<0.05)。结论高良姜素可能通过抑制MCP-1/CCR2信号通路进而抑制肺癌A549细胞恶性生物学行为,促进其凋亡。

CC趋化因子受体2/单核细胞趋化蛋白1与肾脏疾病的研究进展

CC趋化因子受体2(CC chemokine receptor,CCR2)是单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein,MCP-1)的主要受体,可与MCP-1发生特异性结合将信号转入细胞内,趋化并激活单核/巨噬细胞,促进炎症的发生发展。研究表明,CCR2/MCP-1参与了多种肾脏疾病的发展进程,本文就近年来CCR2/MCP-1与肾病研究进展做一综述。

外周血单个核细胞miR-214与急性心肌梗死患者免疫趋化因子表达的相关性

目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者外周血单个核细胞miR-214水平变化以及与免疫趋化因子表达的相关性。方法前瞻性选择2019年1月至2019年12月因急性胸闷胸痛于宜昌市第一人民医院(三峡大学人民医院)心血管内科就诊患者174例,其中排除冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)者45例(CAG正常组)和AMI患者129例(AMI组)。分别采用实时定量荧光PCR法、ELISA法和Western blot法检测两组外周血单个核细胞miR-214、血浆单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和外周血单个核细胞趋化因子功能性受体2(CCR2)水平,并采用Pearson法分析其相关性。结果AMI组患者外周血单个核细胞miR-214表达量低于CAG正常组[(1.00±0.13)vs.(0.81±0.28),P<0.05],同时血浆MCP-1浓度[(97.85±23.86)pg/ml vs.(133.90±47.48)pg/ml]和外周血单个核细胞CCR2蛋白水平[(0.48±0.16)vs.(0.67±0.29)]高于CAG正常组(P<0.05)。经Pearson相关性分析,AMI组患者外周血单个核细胞miR-214水平和血浆MCP-1浓度、外周血单个核细胞CCR2蛋白水平均呈负相关性(r=-0.590,-0.433,P<0.05)。随着冠状动脉SYNTAX评分增加,患者外周血单个核细胞miR-214水平降低,同时外周血单个核细胞CCR2蛋白水平和血浆MCP-1浓度逐渐升高(P<0.05);经多重线性回归分析,miR-214、MCP-1及CCR2与SYNTAX评分均存在线性回归关系(P<0.05)。结论AMI患者外周单个核细胞miR-214表达量降低,且与MCP-1/CCR2传导通路的激活存在负向调控关系,可能是加重AMI疾病进展的重要机制之一。

Toll样受体4/核因子-кB信号通路在人颅内动脉瘤形成和破裂过程中的激活

颅内动脉瘤病理过程与免疫炎症反应密不可分,但炎症反应的起源或机制仍不太清楚。核转录因子κB（NF-κB）是炎症细胞因子[如白细胞介素（IL）-1β、肿瘤坏死因子（TNF）-α、IL-6和IL-8]、趋化因子[单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）]、黏附分子[细胞间黏附分子（ICAM）-1和血管细胞黏附分子（VCAM）-1]的主要调节子。

沙格列汀抑制NF-κB信号通路下调LPS诱导的人肾小管上皮HK-2细胞MCP-1的表达

目的探讨二肽基肽酶4(DPP-4)竞争性抑制剂沙格列汀(saxagliptin)对脂多糖(LPS)诱导状态下人肾小管上皮HK-2细胞MCP-1表达的调节作用及相关的分子机制。方法将人肾小管上皮细胞HK-2细胞分为3组,分别为对照组(Control组)、LPS+沙格列汀(LPS+SAX组)和LPS组。在干预12小时后使用RT-PCR法和western blot法对HK-2细胞MCP-1mRNA和蛋白的表达水平进行检测;并使用western blot法对HK-2细胞NF-κB p65活化水平(phospho-NF-κB p65/total NF-κB p65比值)进行分析。结果与Control组相比较,在LPS干预12小时后HK-2细胞MCP-1mRNA和蛋白的表达水平以及phospho-NF-κB p65/total NF-κB p65比值均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);但LPS组较LPS+SAX组MCP-1mRNA和蛋白的表达的升高以及phospho-NF-κB p65/total NF-κB p65比值的增加更加显著,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 DPP-4抑制剂沙格列汀可以通过抑制NF-κB的磷酸化下调LPS诱导的人肾小管上皮HK-2细胞MCP-1合成和释放并对其产生保护作用。

丁苯酞通过下调NF-κB信号通路抑制细胞焦亡减轻大鼠肾缺血-再灌注损伤

目的探讨丁苯酞对大鼠肾缺血-再灌注损伤(IRI)的作用机制。方法将40只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(IRI组)、NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)组、丁苯酞低剂量组(NBP-L组)及丁苯酞高剂量组(NBP-H组),每组8只。检测各组大鼠血清肌酐(Scr)、血清胱抑素C(Cys-C)、血尿素氮(BUN)和血清白细胞介素(IL)-1β、IL-18水平,苏木素-伊红(HE)染色观察各组肾组织病理损伤情况,采用蛋白质印迹法和免疫组织化学法检测肾组织中炎症因子、核因子(NF)-κB信号通路及细胞焦亡相关蛋白表达水平。结果与Sham组比较,IRI组肾组织损伤较为严重,Scr、Cys-C、BUN和血清IL-1β、IL-18水平均升高,蛋白质印迹法结果显示NOD样受体蛋白(NLRP3)、Gasdermin D(GSDMD)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1、IL-18、IL-1β、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白相对表达量均增加,免疫组织化学染色结果显示NF-κB p65、p-NF-κB p65、IL-1β、IL-18和NLRP3蛋白表达均增多。与IRI组比较,PDTC组、NBP-L组和NBP-H组肾组织的损伤程度均减轻,Scr、Cys-C、BUN和血清IL-18、IL-1β水平均下降,蛋白质印迹法结果显示NLRP3、GSDMD、Caspase-1、IL-1β、IL-18、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达均减少,免疫组织化学染色结果显示NF-κB p65、p-NF-κB p65、IL-1β、IL-18和NLRP3蛋白表达均下降。与NBP-L组比较,NBP-H组肾组织的损伤程度减轻,Scr、Cys-C、BUN和血清IL-18、IL-1β水平均下降,蛋白质印迹法结果显示NLRP3、GSDMD、Caspase-1、IL-1β、IL-18、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达均减少,免疫组织化学染色结果显示NF-κB p65、p-NF-κB p65、IL-1β、IL-18和NLRP3蛋白表达均下降。结论丁苯酞可下调NF-κB/NLRP3信号通路的活性,降低肾IRI后焦亡相关蛋白的表达水平及炎症因子水平,进而抑制细胞焦亡,减轻肾IRI。

不同剂量阿糖胞苷联合抗生素对急性髓系白血病患儿血清MCP-1、CCR-2的影响

目的探讨阿糖胞苷联合抗生素对急性髓系白血病患儿血清单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、CC趋化因子受体-2(CCR-2)的影响。方法选取急性髓系白血病患儿96例,根据治疗方案分为观察组48例和对照组48例,观察组给与大剂量阿糖胞苷联合去甲氧柔红霉素,对照组给与常规剂量阿糖胞苷联合去甲氧柔红霉素,观察两组治疗疗效、不良反应,采用ELISA法检测血清MCP-1水平,流式细胞术检测单核细胞CCR-2水平。结果观察组治疗后完全缓解率高于对照组(P<0.05),血清MCP-1、CCR-2水平低于对照组(P<0.05);观察组病原菌感染发生率低于对照组(P<0.05)。两组治疗后不良反应差异无显著性(P>0.05)。结论大剂量阿糖胞苷联合去甲氧柔红霉素治疗急性髓系白血病患儿疗效显著,且明显降低血清MCP-1、CCR-2水平。

丹参多酚酸对心房颤动大鼠心肌组织中VCAM-1和ICAM-1水平及ERK1/2-NF-κB信号通路的影响

目的:研究丹参多酚酸对心房颤动(房颤)大鼠心肌组织中血管细胞黏附分子1(VCAM-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)水平及细胞外信号调节酶1/2-核转录因子-κB(ERK1/2-NF-κB)信号通路的影响,探讨丹参多酚酸防治房颤的可能机制。方法:48只SD大鼠随机分为对照组、房颤组和丹参多酚酸组,每组16只。舌下静脉注射氯化钙-乙酰胆碱混合液建立房颤大鼠模型。丹参多酚酸组大鼠用丹参多酚酸(4 mg·kg^-1·d^-1)灌胃,对照组和房颤组大鼠用等量生理盐水灌胃,每天1次,共4周。采用苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织病理形态表现,Masson染色观察心肌纤维化情况,免疫组织化学染色检测各组大鼠心肌组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达水平,Western blotting法检测各组大鼠心肌组织中VCAM-1、ICAM-1、ERK1/2、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)、NF-κB和磷酸化核转录因子κB(p-NF-κB)蛋白表达水平。结果:HE染色,对照组大鼠心肌细胞未见明显异常;房颤组大鼠心肌组织间质增多,可见炎性细胞浸润;与房颤组比较,丹参多酚酸组大鼠心肌组织间质稍多,炎性细胞浸润不明显。Masson染色,对照组大鼠心肌间质胶原纤维正常;房颤组大鼠心肌间质胶原纤维明显增多;与房颤组比较,丹参多酚酸组大鼠心肌间质胶原纤维较房颤组明显减少。与对照组比较,房颤组和丹参多酚酸组大鼠心肌组织中MMP-2、MMP-9、VCAM-1、ICAM-1、p-ERK1/2和p-NF-κB蛋白表达水平升高(P<0.05);与房颤组比较,丹参多酚酸组大鼠心肌组织中MMP-2、MMP-9、VCAM-1、ICAM-1、p-ERK1/2和p-NF-κB蛋白表达水平降低(P<0.05)。房颤组大鼠心肌组织中MMP-2和MMP-9蛋白表达水平与VCAM-1(r=0.435,P<0.01;r=0.512,P<0.01)和ICAM-1(r=0.486,P<0.01;r=0.579,P<0.01)蛋白表达水平呈正相关关系。结论:丹参多酚酸可通过抑制房颤大鼠心房组织ERK1/2-NF-κB信号通路激活,降低VCAM-1和ICAM-1水平,抑制心肌纤维化,从而发挥对房颤的治疗作用。

干扰性小核糖核酸靶向抑制趋化因子受体4基因表达对鼻咽癌细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨干扰性小核糖核酸(siRNA)靶向抑制鼻咽癌细胞趋化因子受体4(CXCR4)基因表达对癌细胞增殖、侵袭的影响及机制。方法收集新乡医学院第一附属医院2014年1月至2016年12月保存的鼻咽癌及相应的癌旁组织标本各42例,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot法分别检测鼻咽癌及相应的癌旁组织中CXCR4 mRNA及蛋白表达。将人鼻咽癌细胞系CNE-2Z分为空白对照组(细胞未做任何处理)、阴性对照组(细胞转染无义siRNA序列)和CXCR4转染组(细胞转染CXCR4的靶向siRNA序列),转染48 h后采用Western blot法检测各组细胞中CXCR4、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、β-连环蛋白(β-catenin)和细胞周期素D1(Cyclin D1)蛋白表达;应用细胞计数试剂盒和Transwell小室分别检测细胞的增殖和侵袭能力。结果鼻咽癌及相应的癌旁组织中CXCR4 mRNA表达分别为5.526±0.143、0.953±0.091,蛋白表达分别为0.522±0.047、0.053±0.011,鼻咽癌组织中CXCR4 mRNA及蛋白表达均显著高于癌旁组织(P<0.05)。CXCR4转染组细胞中CXCR4、MMP-2、MMP-9、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达及细胞存活率、细胞侵袭数均显著低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05),但空白对照组和阴性对照组细胞中CXCR4、MMP-2、MMP-9、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达及细胞存活率、细胞侵袭数比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞中CXCR4基因表达可显著降低肿瘤细胞的增殖与侵袭能力,其机制可能与下调Wnt/β-catenin信号通路有关。

基于MCP-1/CCR2通路研究miR-28-5p对老龄自发性高血压大鼠的干预作用

目的研究基于单核细胞趋化蛋白(MCP)-1/CC趋化因子受体(CCR)2通路微小核糖核酸-28-5p(miR-28-5p)对老龄自发性高血压大鼠的干预作用。方法选取SPF级雄性Wistar大鼠6只设为正常组,自发性高血压大鼠18只分为模型组、对照组、miR-28-5p组各6只,miR-28-5p水平检测采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法,检测肺功能相关指标,采用酶联免疫法检测炎症因子白细胞介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,Western印迹检测MCP-1及CCR2通路相关蛋白表达。结果与正常组相比,模型组、对照组、miR-28-5p组miR-28-5p表达及左室收缩压(LVSP)水平明显较高,左室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)、左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)水平明显较低(P<0.05);与模型组相比,对照组、miR-28-5p组miR-28-5p表达及LVEDP水平明显较低,LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax水平明显较高(P<0.05);与对照组相比,miR-28-5p组miR-28-5p表达及LVEDP水平明显较低,LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax水平明显较高(P<0.05)。与正常组相比,模型组、对照组、miR-28-5p组IL-1、IL-6、TNF-α水平及MCP-1、CCR2水平明显较高(P<0.05);与模型组相比,对照组、miR-28-5p组IL-1、IL-6、TNF-α水平及MCP-1、CCR2水平明显较低(P<0.05);与对照组相比,miR-28-5p组IL-1、IL-6、TNF-α水平及MCP-1、CCR2水平明显较低(P<0.05)。结论miR-28-5p可通过调控MCP-1、CCR2通路蛋白水平改善老龄自发性高血压大鼠的心功能,干预抑制炎性反应。

高良姜素抑制IRAK-1/MAPK/NF-κB信号通路对糖尿病大鼠心肌损伤的影响

[目的]探讨高良姜素通过抑制白细胞介素-1受体相关激酶(IRAK-1)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核因子-κB(NF-κB)信号通路实现对糖尿病大鼠心肌损伤的缓解。[方法]高糖高脂连续饲养8周后,一次性腹腔注射30 mg/kg链脲佐菌素(STZ)造模,糖尿病模型成功大鼠随机分为模型组、高良姜素组、高良姜素+pc-NC组、高良姜素+pc-IRAK-1组,每组8只。对照组8只大鼠正常饲养相同时间。血糖仪测量血糖水平;心脏超声检测左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室射血分数(LVEF);Masson染色检测心肌组织纤维化情况,分析心肌胶原容积百分比(CVF);透射电镜观察心肌组织超微结构;试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)水平;蛋白质免疫印迹检测心肌组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、IRAK-1、p38 MAPK、NF-κB p65蛋白表达情况。[结果]建模后给药前,大鼠血糖水平升高(P<0.05),说明造模成功。给药后,模型组大鼠心肌细胞间质和血管旁着色深,且透射电镜下可见心肌结构紊乱,部分肌丝溶解;高良姜素组上述症状均有所缓解,高良姜素+pc-IRAK-1组症状介于模型组和高良姜素组之间。与对照组相比,模型组血糖、LVEDD、LVESD、CVF水平,MDA含量,iNOS、IRAK-1、p38 MAPK、NF-κB p65蛋白水平升高(P<0.05),LVEF水平,CK、NO含量,SOD、LDH活性,NOS活力及eNOS蛋白水平降低(P<0.05);与模型组相比,高良姜素组血糖、LVEDD、LVESD、CVF水平,MDA含量,iNOS、IRAK-1、p38 MAPK、NF-κB p65蛋白水平降低(P<0.05),LVEF水平,CK、NO含量,SOD、LDH活性,NOS活力及eNOS蛋白水平升高(P<0.05);在高良姜素处理基础上升高IRAK-1的表达可抑制高良姜素的作用效果。[结论]高良姜素可通过抑制IRAK-1/MAPK/NF-κB信号通路实现对糖尿病大鼠心肌损伤的缓解。

CC类趋化因子受体2在人内皮细胞迁移中的作用

目的探讨CC类趋化因子受体2(CCR2)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)迁移的作用。方法 RT-PCR和Western-blot检测单核细胞趋化蛋白-1(MCP1)对HUVECs CCR2蛋白表达的影响。Transwell实验观察CCR2拮抗剂对HUVECs迁移的影响。结果在HUVECs中CCR2蛋白表达存在MCP1浓度依赖方式,Transwell实验显示CCR2拮抗剂(RS504393)抑制细胞迁移(P<0.01)。结论 CCR2对人内皮细胞迁移有促进作用,其作用与MCP1结合相关。

知黄溃疡合剂对复发性口腔黏膜溃疡大鼠创面修复的作用及对MCP-1/CCR2/NF-κB通路的影响

目的:探讨知黄溃疡合剂对复发性口腔黏膜溃疡模型大鼠创面修复的作用及对单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/趋化因子受体-2(CCR2)/核因子-κB(NF-κB)通路的影响。方法:55只SD大鼠随机选取10只作为对照组,其余45只大鼠建立复发性口腔黏膜溃疡大鼠模型,40只造模成功大鼠随机分为模型组、左旋咪唑组、知黄溃疡合剂低剂量组、知黄溃疡合剂高剂量组,每组10只。左旋咪唑组、知黄溃疡合剂低剂量组、知黄溃疡合剂高剂量组按10 mL/kg灌胃给药,对照组和模型组大鼠则予以等体积生理盐水灌胃,连续给药20 d。观察大鼠口腔溃疡情况变化;ELISA法测定大鼠溃疡黏膜组织中炎症因子水平;流式细胞仪检测大鼠外周血T淋巴细胞亚群;HE染色观察大鼠口腔黏膜组织病理;Western blotting测定大鼠溃疡黏膜组织中MCP-1、CCR2、NF-κB、p-NF-κB p65蛋白表达水平。结果:模型组、知黄溃疡合剂低剂量组、知黄溃疡合剂高剂量组、左旋咪唑组大鼠溃疡数目依次减少,溃疡评分依次降低,γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素17(IL-17)依次降低,CD4;、CD4;/CD8;依次升高,CD8;依次降低(P<0.05)。模型组大鼠口腔黏膜组织破溃,可见大量空泡变性,大量炎症细胞浸润;左旋咪唑组、知黄溃疡合剂高剂量组明显改善,知黄溃疡合剂低剂量组有所改善。模型组、知黄溃疡合剂低剂量组、知黄溃疡合剂高剂量组、左旋咪唑组大鼠溃疡黏膜组织中MCP-1、CCR2蛋白相对表达量及p-NF-κB p65/NF-κB依次降低(P<0.05)。结论:知黄溃疡合剂可能通过抑制MCP-1/CCR2/NF-κB通路,发挥对复发性口腔黏膜溃疡大鼠创面的修复作用。

通经定晕丸阻断颈椎病大鼠NF-κB激活MCP-1/CCR2通路及TNF-α及IL-1β、IL-6表达的研究

目的:研究通经定晕丸阻断颈椎病大鼠核因子-κB(NF-κB)激活单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/趋化因子受体-2(CCR2)通路及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)表达的影响。方法:用手术的方法制作颈椎病大鼠模型,用通经定晕丸(5.0和10.0 g/kg)和颈复康冲剂(0.84 g/kg)灌胃给药,每天1次,连续4周,每天观察实验大鼠一般状况。4周后检测,腹主动脉取血,进行血液黏度,血液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量分析;取颈椎椎间盘进行组织形态学分析;实时定量PCR检测颈椎椎间盘组织中MCP-1和CCR2的mRNA表达,Western blot检测椎间盘组织中NF-κBp65蛋白表达。结果:通经定晕丸(5.0和10.0 g/kg)和颈复康冲剂(0.84 g/kg)可显著改善颈椎病模型大鼠的一般状况,降低血液低切黏度值、中切黏度值、高切黏度值,促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量及椎间盘组织中MCP-1、CCR2和NF-κBp65的mRNA和蛋白表达(P<0.05或P<0.01),减轻促炎因子对椎间盘造成的损伤,降低颈椎间盘高度和退变程度,降低纤维环裂隙、髓核、细胞数量、软骨厚度,其中以通经定晕丸10.0 g/kg剂量组作用效果更为显著。结论:通经定晕丸对颈椎病模型大鼠具有较好的治疗的作用,其作用机制与降低血液黏度,抑制MCP-1/CCR2信号通路激活、NF-κB活化及TNF-α、IL-1β和IL-6的生成相关。

MCP-1／CCR2轴促进脐带间充质干细胞向肺癌组织归巢

目的:探讨单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoatractant protein-1,MCP-1)/趋化因子(C-C模体)受体2[chemokine(C-C motif)receptor 2,CCR2)轴在人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUMSCs)向肺癌归巢中的作用。方法:采用组织块培养法从健康新生儿脐带组织中分离HUMSCs并鉴定,构建BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型。体外应用Transwell趋化实验、体内应用IVIS Xenogen动物活体成像系统检测HUMSCs是否向肺癌归巢,ELISA法检测肺癌细胞A549培养上清中MCP-1分泌水平,转染shRNA敲低肺癌细胞内MCP-1的表达和用抑制剂RS504393抑制HUMSCs细胞表面的MCP-1受体CCR2后,体内外检测HUMSCs向肺癌归巢能力的改变。结果:成功分离得到HUMSCs并完成鉴定,成功建立BALB/c裸鼠皮下肺癌移植瘤模型。HUMSCs在体内外均能向肺癌归巢(P<0.01),肺癌细胞高表达MCP-1。成功构建稳定低表达MCP-1的肺癌A549细胞系,与对照组相比,shRNA1和shRNA2敲低组趋化HUMSCs的数目明显减少[(80.0±33.0)、(94.0±16.0)vs(167.0±41.0)个,均P<0.05],抑制HUMSCs细胞表面MCP-1受体CCR2后,体内外均显著抑制HUMSCs向肺癌的趋化能力(P<0.05)。结论:MCP-1/CCR2轴促进HUMSCs向肺癌归巢。

自发性高血压大鼠海马区MCP-1、COX-2、NF-κB表达及神经元损伤的增龄性变化

目的观察16、32、64周龄自发性高血压大鼠(SHR)海马区炎症相关因子COX-2(环氧合酶-2)、MCP-1(单核细胞趋化蛋白-1)及NF-κB(核转录因子-κB)的表达水平和海马CA1区神经元改变,探讨增龄性高血压脑损伤过程中的炎症反应机制。方法雄性SHR及正常对照威斯塔京都大鼠(WKY)各15只,各随机分为3组,每组5只:16周组、32周组和64周组。采用尾动脉测压法测定各组大鼠收缩压(SBP),尼氏染色法观察海马CA1区神经元损伤情况,Real time PCR法检测海马COX-2、MCP-1mRNA表达水平,Western blot法检测NF-κB蛋白表达水平。结果随着年龄升高,SHR大鼠SBP明显升高,海马区NF-κB表达及MCP-1、COX-2mRNA表达均升高,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05),海马CA1区神经元减少,差异有统计学意义(P<0.01)。结论随增龄和血压升高,SHR海马CA1区神经元丢失明显;NF-κB活化及MCP-1、COX-2等炎症因子表达升高可能参与了高血压认知下降的病理过程。