与A20结合的核因子-κB抑制蛋白1的研究进展

与A20结合的核因子κB抑制蛋白1(A20 binding inhibitor of NF-κB activation,ABIN1)是近年来研究发现的一个新泛素结合蛋白。最初的研究表明,ABIN1通过结合锌指结构蛋白A20在NF-κB信号通路中发挥重要的调节作用。目前发现,ABIN1在过表达的条件下能抑制肿瘤坏死因子、白细胞介素1、脂多糖、表皮生长因子等诱导的NF-κB的活性,从而发挥抗炎和免疫调节作用。因此,以ABIN1为新靶点调节NF-κB活性的研究日益受到关注。本文就ABIN1蛋白结构、功能及其研究进展做一综述。

星状神经节离断对脊髓损伤大鼠中枢性疼痛行为及CREB SGK1 NF-κB蛋白表达的影响

目的探究星状神经节离断对脊髓损伤(SCI)大鼠中枢性疼痛行为及环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)、核因子-κB(NF-κB)蛋白表达的影响。方法将SD大鼠按随机分配原则分为假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、治疗组(Treat组)各6例。Model组、Treat组构建SCI模型,Sham组未使用铁球砸脊髓,其他步骤相同。Treat组在脊髓损伤后予星状神经节离断,通过BBB运动功能评分评价运动功能学,通过机械痛阈试验和热痛阈试验测量机械缩足反射阈值(PWT)和热缩足潜伏期(PWL),ELISA法检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)水平,HE染色检测脊髓组织病理变化,TUNEL染色检测细胞凋亡,Western blot检测CREB、SGK1、NF-κB p65蛋白表达。结果Sham组大鼠脊髓组织结构完好,细胞呈正常形态,神经纤维分布均匀且行走规则。与Sham组相比,Model组脊髓组织及细胞完整性破坏严重,形成大量空洞,神经纤维排列紊乱,可见大量炎性细胞浸润,BBB运动功能评分、PWT、PWL值显著下降(P<0.05),IL-1β、TNF-α、PGE2水平、细胞凋亡数量、CREB、SGK1、NF-κB p65蛋白水平显著升高(P<0.05)。与Model组相比,Treat组脊髓组织结构形态明显改善,脊髓组织空洞化有所好转,炎性细胞浸润减少,神经纤维排列趋于正常,BBB运动功能评分、PWT、PWL值显著增加(P<0.05),IL-1β、TNF-α、PGE2水平、细胞凋亡数量、CREB、SGK1、NF-κB p65蛋白水平显著减少(P<0.05)。结论星状神经节离断可减轻SCI大鼠中枢性疼痛行为,降低CREB、SGK1、NF-κB蛋白水平。

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、核转录因子-κB、固醇调节元件结合蛋白2在子痫前期患者中的表达及意义

目的探讨子痫前期患者外周血及胎盘组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)、核转录因子-κB(nuclear factor-κ B, NF-κB)、固醇调节元件结合蛋白2(sterol regulatory element binding protein 2, SREBP2)的表达意义。方法选择2015年8月至2017年8月在中南大学湘雅二医院进行规律产前检查并剖宫产分娩的60例子痫前期患者,根据子痫前期分度标准分为重度子痫前期(severe preeclampsia, SPE)组(40例)和轻度子痫前期(mild preeclampsia, MPE)组(20例),并按照2∶1比例选择同期因头盆不称、胎位异常及社会因素行剖宫产终止妊娠的30例孕妇作为对照组。所有孕妇均采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)法检测外周血mTOR、高密度脂蛋白-胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol, HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol, LDL-C)、甘油三酯、总胆固醇浓度;采用蛋白质印迹法检测胎盘mTOR、磷酸化mTOR (phospho- mTOR, p-mTOR)、NF-κB、SREBP2蛋白表达。采用单因素方差分析、Bonferroni法或Dunnett's T3检验,以及Pearson相关分析进行统计分析。结果(1)SPE组和MPE组孕妇外周血mTOR[分别为(11 765.56±1 698.95)、(8 278.56±1 106.59)与(4 366.19±716.43) pg/ml]、LDL-C[分别为(7.81±1.90)、(4.11±0.75)与(2.42±0.45) mmol/L]水平均高于对照组(P值均<0.05),且SPE组均高于MPE组(P值均<0.05);SPE组和MPE组孕妇外周血HDL-C水平低于对照组[分别为(0.36±0.12)、(0.85±0.11)与(1.33±0.16) mmol/L],且SPE组低于MPE组(P值均<0.05)。SPE组孕妇外周血甘油三酯水平均高于MPE组及对照组[分别为(46.19±18.92)、(35.55±6.54)与(33.24±9.78) nmol/L,P值均<0.05],SPE组和MPE组孕妇外周血胆固醇水平均高于对照组[分别为(24.72±7.17)、(21.83±4.19)与(16.32±3.88)nmol/L,P值均<0.05 ]。(2)SPE组和MPE组孕妇胎盘mTOR(分别为0.52±0.09、0.38±0.08与0.24±0.05)、p-mTOR(分别为0.42±0.08、0.26±0.05与0.14±0.03)、NF-κB(分别为0.58±0.10、0.36±0.05与0.21±0.03)、SREBP2(分别为0.52±0.08、0.33±0.05与0.20±0.05)蛋白表达及p-mTOR/mTOR(分别为0.75±0.10、0.69±0.14与0.59±0.13)水平均高于对照组,且SPE组mTOR、p-mTOR、NF-κB p65、SREBP2蛋白表达均高于MPE组(P值均<0.05)。(3)经Pearson相关分析,SPE组外周血mTOR及胎盘mTOR、p-mTOR蛋白水平分别与外周血LDL-C(相关系数分别为0.682、0.584、0.504)、甘油三酯(相关系数分别为0.612、0.658、0.422),以及外周血mTOR、胎盘mTOR与总胆固醇水平(相关系数分别为0.598、0.452)均呈正相关(P值均<0.05),分别与外周血HDL-C水平呈负相关(相关系数分别为-0.375、-0.442、-0.390,P值均<0.05)。SPE组胎盘NF-κB分别与胎盘mTOR、外周血LDL-C呈正相关(相关系数分别为0.375、0.391,P值均<0.05),胎盘SREBP2分别与胎盘mTOR、外周血总胆固醇呈正相关(相关系数分别为0.364、0.392,P值均<0.05)。(4)MPE组外周血mTOR、胎盘mTOR及p-mTOR水平分别与外周血LDL-C(相关系数分别为0.813、0.641、0.465)、甘油三酯(相关系数分别为0.646、0.529、0.502)及总胆固醇(相关系数分别为0.558、0.482、0.483)均呈正相关(P值均<0.05);外周血mTOR水平与外周血HDL-C水平呈负相关(相关系数为-0.606,P<0.05);MPE组胎盘NF-κB分别与胎盘mTOR、外周血LDL-C呈正相关(相关系数分别为0.458、0.595,P值均<0.05),胎盘SREBP2分别与胎盘mTOR、外周血总胆固醇呈正相关(相关系数分别为0.580、0.560,P值均<0.05)。结论mTOR、NF-κB、SREBP2可能通过介导脂代谢紊乱参与子痫前期的发生、发展。

肝脏特异性敲除核因子-κB必需调节蛋白基因对Myc过表达诱导的小鼠原发性肝癌发生发展的影响

目的:探讨IκB激酶(IKK)/核因子-κB(NF-κB)信号通路对Myc过表达诱导的小鼠原发性肝癌发生发展的影响。方法:利用转基因小鼠将LAP-tTA小鼠与Alb-cre小鼠杂交,再与NEMO f1(NEMO为NF-κB必需调节蛋白)小鼠杂交,以产生LAP-tTA+/Alb-cre+/NEMO fl/wt小鼠,最后与tetO-Myc+小鼠杂交。本实验包括4组:(1)WT小鼠;(2)NEMOΔLPC小鼠(肝细胞中NEMO敲除,无Myc过表达);(3)Myc LAP-tTA小鼠(Myc过表达,无NEMO敲除);(4)Myc LAP-tTA/NEMOΔLPC小鼠(肝脏Myc过表达和NEMO敲除)。记录小鼠的生存曲线,观察肝脏大体形态。苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理结构,免疫组织化学染色、蛋白质印迹法(Western blot)检测肝脏肿瘤指标及肝祖细胞指标、定量聚合酶链反应(qPCR)方法检测相关蛋白的mRNA水平。使用t检验比较独立样本组与相应组。结果:小鼠带瘤生存曲线显示Myc LAP-tTA/NEMOΔLPC小鼠中位生存期明显短于Myc LAP-tTA小鼠(中位生存期M/P 5056 d比83 d,P<0.01);Myc LAP-tTA/NEMOΔLPC小鼠对比Myc LAP-tTA小鼠,谷草转氨酶[(739.40±35.61)U/L比(441.50±78.79)U/L,t=2.464,P<0.05]、碱性磷酸酶[(3142.0±287.6)U/L比(1702.0±278.8)U/L,t=3.129,P<0.01]、γ-谷氨酰基转移酶[(101.70±12.82)U/L比(37.31±9.34)U/L,t=3.927,P<0.01]和总胆红素[(1.281±0.232)mg/dl比(0.618±0.051)mg/dl,t=3.889,P<0.01]均显著升高,且差异有统计学意义;Western blot检测显示细胞角蛋白19(CK19)、性别决定区Y框蛋白9(SOX9)水平在Myc LAP-tTA/NEMOΔLPC较Myc LAP-tTA组小鼠肝脏亦明显升高;肝祖细胞标志物如角蛋白(CK19,4.336±1.970比0.680±0.234,t=1.843,P<0.01)、CK7(3.884±0.338比2.370±0.525,t=2.422,P<0.01)、甲胎蛋白(AFP,3614.0±2070.0比1399.0±319.9,t=1.057,P<0.01)、上皮细胞黏附分子(EpCAM)的mRNA水平在Myc LAP-tTA/NEMOΔLPC较Myc LAP-tTA组小鼠肝脏显著增高(7.900±0.997比3.084±0.711,t=3.943,P<0.01)。结论:肝细胞中特异性敲除NEMO从而抑制经典的IKK/NF-κB信号通路,可促进肝肿瘤的发生发展,并诱导混合型肝细胞癌-胆管细胞癌的发生。白细胞介素(IL)-6/信号转导与转录激活因子-3(STAT3)通路与细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路可能参与混合型肝癌的发生发展。

牙周-正畸结合治疗对重度牙周炎患者龈沟液MMP-2、IL-1β及RANKL/OPG水平的影响

目的:探讨牙周-正畸结合治疗对重度牙周炎患者龈沟液基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、白介素-1β(IL-1β)、核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANKL/OPG)水平的影响。方法:选取2018年6月-2020年6月笔者医院诊治的重度牙周炎患者72例,以随机抽签法按1:1比例分为研究组和对照组,每组36例。对照组采取牙周组织再生术治疗,研究组采取牙周-正畸结合治疗。对比两组临床疗效、治疗前后牙周指标[牙龈指数(GI)、探诊深度(PD)、龈沟出血指数(SBI)、菌斑指数(PLI)、临床附着丧失(CAL)]水平、牙齿松动度、邻接点至牙槽骨嵴间距离(BC-CP)、龈乳头高度(PH)、患牙前牙覆盖情况及龈沟液MMP-2、IL-1β、RANKL/OPG水平。结果:研究组总有效率(91.67%)高于对照组(72.22%),差异有统计学意义(P<0.05);与治疗前相比,两组治疗后GI、PD、SBI、PLI、CAL水平均明显降低,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗后牙齿松动度均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组治疗后BC-CP、PH水平均高于治疗前,且研究组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);与治疗前对比,两组治疗后前牙覆盖程度均得到明显改善,且研究组优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组治疗后龈沟液MMP-2、IL-1β、RANKL/OPG水平均明显降低,且研究组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:牙周-正畸结合治疗能显著改善重度牙周炎患者切牙区美学效果,且能进一步下调龈沟液MMP-2、IL-1β及RANKL/OPG水平,是治疗重度牙周炎的有效方法。

NBD多肽的临床应用研究进展

核因子 κB(nuclearfactor κB ,NF κB )在免疫应答、炎症反应和细胞凋亡的过程中发挥着重要作用 ,已经成为相关疾病治疗的新靶点。NF κB必需调节蛋白结合区 (NF κBessentialmodifierbindingdomain ,NBD)多肽是仅有 6个氨基酸残基的小分子肽 ,它可以与IκB激酶 (IKK)的调节亚基 (NF κBessentialmodifier ,NEMO)结合 ,阻止IKK激活 ,从而选择性地抑制NF κB的过度表达。将对许多炎症性疾病、免疫性疾病和肿瘤的治疗起到重要作用。

黄连半夏配伍对高脂血症模型大鼠血脂的影响

目的:观察黄连半夏配伍对高脂血症模型大鼠血脂的调节作用及可能机制。方法:健康SD雄性大鼠60只随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组(辛伐他汀组)、黄连半夏配伍高剂量组、黄连半夏配伍中剂量组、黄连半夏配伍低剂量组,每组10只。空白对照组给予普通饲料喂养,其他各组给予高脂饲料,自由饮水,连续3周。造模成功后,辛伐他汀组给予辛伐他汀0.01 g·kg^-1,黄连半夏配伍低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予剂量为3、6、12 g·kg^-1(按生药计),空白对照组给予等体积的生理盐水,每日1次,连续8周。给药期间,模型组、辛伐他汀组、中药各治疗组继续给予高脂饲料喂养。末次给药后腹主动脉采血,检测相应指标。结果:与空白组比较,模型组肝质量及肝质量/体质量、脂肪系数、总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、单核细胞趋化因子-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)、载脂蛋白B100(apolipoproteinB100,ApoB100)显著升高(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、载脂蛋白AI(apolipoprotein AI,ApoAI)、低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLR)、固醇调节元件结合蛋白-2(sterol regulatory element binding protein-2,SREBP-2)显著降低(P<0.01);与模型组比较,辛伐他汀组、中药配伍各组能够不同程度地降低肝质量及肝质量/体质量、脂肪系数、TC、TG、LDL-C、IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1、NF-κB、ApoB100(P<0.01或P<0.05),升高ApoAI、LDLR、SREBP-2(P<0.01或P<0.05)。其中,黄连半夏配伍高剂量组作用更为显著。结论:黄连半夏配伍对高脂血症大鼠有明显的降血脂作用,其机制可能与下调NF-κB表达,上调LDLR、SREBP-2的表达有关。