血清microRNA-27a、核因子-κB与动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者介入栓塞治疗疗效的关系

目的探讨血清microRNA-27a(miR-27a)、核因子-κB(NF-κB)与动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者介入栓塞治疗疗效的关系。方法回顾性分析2021年4月—2023年4月在枣庄市立医院接受介入治疗的162例动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者的病历资料,术后2周评估疗效并分为有效组和无效组,比较两组患者的血清miR-27a、NF-κB水平,筛查动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者介入栓塞治疗效果的影响因素,分析血清miR-27a、NF-κB对动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者介入栓塞治疗效果的评估价值。结果162例动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者中,显效62例,有效78例,无效22例。两组患者性别、年龄、体质量指数、高血压家族史、动脉瘤直径、动脉瘤颈宽、动脉瘤位置、发病至介入栓塞治疗时间、Hunt-Hess分级、血管内皮生长因子、一氧化氮合酶及内皮素-1比较,经χ^(2)/t检验,差异均无统计学意义(P>0.05)。无效组患者颅脑CT FisherⅢ~Ⅳ级占比高于有效组(P<0.05),NF-κB、miR-27a相对表达量高于有效组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:颅脑CT Fisher分级[OR=4.513(95%CI:1.801,11.304)]、NF-κB相对表达量[OR=4.406(95%CI:1.759,11.036)]和miR-27a相对表达量[OR=4.491(95%CI:1.793,11.248)]是动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者介入栓塞治疗无效的危险因素(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示,血清miR-27a、NF-κB和联合预测动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者介入栓塞治疗效果的敏感性分别为67.9%(95%CI:0.541,0.759)、60.3%(95%CI:0.529,0.714)、72.5%(95%CI:0.641,0.816),特异性分别为77.1%(95%CI:0.681,0.863)、84.2%(95%CI:0.752,0.937)、96.1%(95%CI:0.814,0.998),曲线下面积分别为0.746(95%CI:0.631,0.854)、0.735(95%CI:0.629,0.851)、0.851(95%CI:0.772,0.958)。结论血清miR-27a和NF-κB的异常表达与动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者经血管介入栓塞术治疗的疗效反应相关。联合检测血清miR-27a与NF-κB可提高对动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者介入栓塞治疗效果的预测价值。

诱杀NF-κB的寡脱氧核苷酸对多发性骨髓瘤的影响

目的:本研究探讨靶向核因子-κB(nuclear factor of Kappa B,NF-κB)的"诱杀性"寡脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODN)对小鼠多发性骨髓瘤的影响。方法:给予严重联合免疫缺陷(severe combined immunodeficient,SCID)小鼠皮下注射骨髓瘤细胞,当出现可测量的瘤组织时将成瘤小鼠随机分为3组:即治疗1组,治疗2组,对照组;给予治疗1组5μg/g脂质体-NF-κB"诱杀性"ODN,给予治疗2组10μg/g脂质体-NF-κB"诱杀性"ODN,给予对照组10μg/g脂质体-NF-κB无关的ODN,每周2次,共治疗4周。当小鼠濒死或瘤直径大于2 cm时即将其处死。结果:脂质体-NF-κB诱杀性ODN可以特异性抑制NF-κB结合DNA的活性;治疗组较对照组IL-6表达减少、瘤体积缩小、中位生存时间明显延长。结论:NF-κB诱杀性ODN可能成为治疗多发性骨髓瘤的新方法。

四逆汤对溃疡性结肠炎大鼠TLR4/NF-κB信号通路相关因子及肠道菌群的影响

目的 探讨四逆汤对溃疡性结肠炎大鼠Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路相关因子及肠道菌群的影响。方法 选取健康雄性SD大鼠28只,常规饲料喂养,自由进食进水,实验开始前适应性饲养7 d。按照随机数字表法将28只大鼠分为正常组、模型组、四逆汤组、美沙拉嗪组,各7只。正常组大鼠注入氯化钠溶液,模型组、四逆汤组、美沙拉嗪组大鼠通过结肠内注入三硝基苯磺酸(trinitrobenzenesulfonic acid, TNBS)建立溃疡性结肠炎模型。造模完成后,四逆汤组大鼠采用四逆汤3.8 g/kg灌胃,美沙拉嗪组采用美沙拉嗪10 g/kg灌胃,1次/d。在给药前1 d及给药7 d后秤测量大鼠的体质量、疾病指数活动评分(disease activity index, DAI)评分,检测大鼠给药7 d后的TLR4、NF-κB、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、白细胞介素-16(interleukin-16,IL-16)、黏蛋白2(mucin 2,MUC2)、三叶因子3(trefoil factor 3,TFF3)表达及肠道菌群。结果 给药前,正常组大鼠体质量显著高于模型组、四逆汤组、美沙拉嗪组(P<0.05);给药7 d后,四逆汤组、美沙拉嗪组大鼠体质量显著升高(P<0.05),正常组、四逆汤组、美沙拉嗪组大鼠体质量显著高于模型组(P<0.05)。给药前,正常组大鼠DAI评分显著低于模型组、四逆汤组、美沙拉嗪组(P<0.05);给药7 d后,四逆汤组、美沙拉嗪组大鼠DAI评分显著降低(P<0.05),模型组、四逆汤组、美沙拉嗪组大鼠DAI评分显著高于正常组(P<0.05),四逆汤组、美沙拉嗪组大鼠DAI评分显著低于模型组(P<0.05)。给药7 d后,正常组、四逆汤组、美沙拉嗪组大鼠TLR4、NF-κB表达均显著低于模型组(P<0.05)。给药7 d后,正常组、四逆汤组、美沙拉嗪组大鼠TNF-α、IL-10、IL-16水平均显著低于模型组(P<0.05)。给药7 d后,正常组、四逆汤组、美沙拉嗪组大鼠肠球菌、肠杆菌显著低于模型组,双歧杆菌、乳酸杆菌显著高于模型组(P<0.05)。给药7 d后,正常组、四逆汤组、美沙拉嗪组大鼠TFF3、MUC2表达显著高于模型组(P<0.05)。结论 四逆汤可用于溃疡性结肠炎的治疗,对于TLR4/NF-κB信号通路相关因子及肠道菌群均有一定调节作用。

基于天枢与上巨虚穴经皮神经电刺激观察对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠组织TLR9/MyD88/NF-κB蛋白表达的影响

目的基于“合募配穴”原则观察经皮神经电刺激(transcutaneous electrical nerve stimulation,TENS)对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型大鼠结肠组织Toll样受体9(toll-like receptor 9,TLR9)/髓样分化因子88(myeloid differentiation factor88,MyD88)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路相关蛋白表达的影响,探讨TENS治疗UC的相关机制。方法从48只SPF级成年SD大鼠中随机抽取12只作为空白组。其余36只通过2-4-6三硝基苯磺酸(2-4-6 trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)/乙醇法制备UC大鼠模型,成模后再次随机分为模型组、TENS组、阳性药物组,每组12只。成模后第1天开始干预:模型组仅行捆绑固定;TENS组捆绑固定后刺激天枢、上巨虚两穴;阳性药物组用225 mg/kg剂量的柳氮磺胺吡啶混悬液灌胃。以上各组干预均每天1次,共10次。观察记录各组大鼠每天食量和体质量。干预结束后,HE染色观察各组大鼠结肠组织病理学变化;ELISA法检测结肠组织白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)炎性因子的含量;Western blot法检测结肠组织TLR9、My D88、NF-κB蛋白的表达量变化。结果(1)与空白组相比:模型组大鼠结肠组织出现明显溃疡面,上皮细胞大面积萎缩,炎性因子大量浸润,IL-6、TNF-α炎性因子含量升高(P<0.05);TLR9、MyD88、NF-κB蛋白表达量上调(P<0.05)。(2)与模型组相比:TENS组和阳性药物组结肠组织损坏情况较轻,上皮细胞黏液较充分,腺体分支较少,炎性细胞浸润面积小;IL-6、TNF-α含量减少(P<0.05);TLR9、NF-κB蛋白表达量降低(P<0.05)。(3)与阳性药物组相比:TENS组TNF-α、IL-1β的含量及TLR9、MyD88、NF-κB蛋白表达量相对较高(P<0.05)。结论TENS能够保护肠道上皮细胞,减轻肠道炎症,其机制可能与降低结肠细胞促炎因子水平,抑制TLR9/MyD88/NF-κB信号通路蛋白的过表达有关。

温胆汤干预糖尿病视网膜病变核转录因子-κB表达的研究

目的:通过比较温胆汤联合激光光凝与单纯激光光凝治疗糖尿病视网膜病变的临床疗效、中医临床证候积分的差异、血清核转录因子-κB(Nuclear Factor-kappa B,NF-κB)水平的变化,探究温胆汤加减对激光治疗糖尿病视网膜病变临床表现的改善是否有增效作用以及可能的机制。方法:收集痰瘀阻滞型糖尿病视网膜病变患者60例107只眼,随机分为治疗组(30例56只眼)、对照组(30例51只眼)。治疗组采取温胆汤加减联合激光光凝治疗,对照组采取单纯激光光凝治疗,观察两组患者临床总体疗效、中医临床证候积分、血清NF-κB表达水平的差异。结果:治疗组疗效优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后两组中医临床证候积分均较治疗前降低,治疗组下降更为显著,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后两组血清NF-κB水平均下降,治疗组下降更为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:温胆汤加减联合激光光凝治疗对痰瘀阻滞型糖尿病视网膜病变疗效更优,其机制可能是通过抑制体内炎症反应来降低血清NF-κB水平,从而对临床治疗糖尿病视网膜病变起到增效作用。

疏肝和胃方通过抑制NF-κB通路调控M1巨噬细胞极化对反流性食管炎大鼠食管黏膜炎症的影响

目的探讨疏肝和胃方通过抑制核因子-κB(NF-κB)通路调控M1巨噬细胞极化对反流性食管炎(RE)大鼠食管黏膜炎症的影响。方法将40只SD雄性大鼠随机分为假手术组(8只)和造模组(32只)。假手术组暴露食管下段及幽门,造模组予下食管括约肌切开术加十二指肠半结扎术。术后将造模成功的大鼠随机分为模型组、疏肝和胃方低剂量组、疏肝和胃方高剂量组和雷贝拉唑组。假手术组和模型组予蒸馏水灌胃,疏肝和胃方低、高剂量组分别予以10.49 g·kg^(-1)·d^(-1)、20.98 g·kg^(-1)·d^(-1)疏肝和胃方灌胃,雷贝拉唑组予雷贝拉唑(2.06 mg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃,灌胃持续2周。采用苏木精-伊红(HE)染色观察食管组织病理学改变;采用Western blot法检测核因子-κB p65(NF-κB p65)、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)的磷酸化情况,以及白细胞分化抗原86(CD86)、甘露糖受体(CD206)的表达;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL^(-1β))、转化生长因子-β(TGF-β)mRNA表达。结果HE染色结果显示,模型组鳞状上皮增生,炎症细胞浸润;疏肝和胃方低、高剂量组和雷贝拉唑组组织结构正常,基底层血管湖少且小,无炎症细胞浸润。与假手术比较,模型组CD86、磷酸化IκBα(pIκBα)/IκBα、核因子-κB磷酸化p65(NF-κB pp65)/p65蛋白,以及TNF-α、IL^(-1β)mRNA表达升高(P<0.05)。与模型组比较,疏肝和胃方低、高剂量组和雷贝拉唑组CD86蛋白以及TNF-α、IL^(-1β)mRNA表达下降(P<0.05),疏肝和胃方高剂量组和雷贝拉唑组pIκBα/IκBα、pp65/p65表达下降(P<0.05),但疏肝和胃方低剂量组与模型组pIκBα/IκBα、pp65/p65的表达差异无统计学意义(P>0.05)。与假手术组比较,模型组CD206表达减少(P<0.05),TGF-βmRNA表达呈下降趋势但差异无统计学意义(P>0.05),疏肝和胃方低、高剂量组和雷贝拉唑组CD206表达升高(P<0.05)。与模型组比较,疏肝和胃方高剂量组和雷贝拉唑组TGF-βmRNA表达升高(P<0.05)。结论疏肝和胃方可通过抑制RE大鼠的M1巨噬细胞极化来改善食管黏膜炎症,其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路活化有关。

肿瘤抑制因子在溃疡性结肠炎肠黏膜的表达及其对NF-κB信号通路的影响

目的观察肿瘤抑制因子Cylindromatosis(CYLD)在溃疡性结肠炎患者肠黏膜组织中的表达水平,探讨其对NF-κB通路P65、P50表达的影响。方法选取2021年5月~2023年2月广西医科大学第四附属医院收治的60例溃疡性结肠炎(UC)患者肠黏膜标本(UC组),并选取同期30名正常者为健康对照组。采用RT-PCR法检测两组受检者组织中CYLD mRNA表达。以CYLD shRNA转染结肠Caco-2细胞株,Western blot法检测NF-κB信号通路P65、P50蛋白的表达以及加入NF-κB信号通路抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PTDC)后P65、P50蛋白的表达。结果与健康对照组比较,UC组mRNA表达水平明显降低[(0.624±0.087)vs.(0.993±0.056)],组间差异有统计学意义(t=21.119,P<0.05)。UC亚组间比较,重度组mRNA表达(0.418±0.059)低于中度和轻度组[(0.690±0.103)、(0.722±0.076)],差异有统计学意义(P<0.05),轻度、中度组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。转染CYLD shRNA的结肠Caco-2细胞CYLD蛋白表达下调,P65、P50蛋白表达上调;加入PTDC后,P65、P50表达下降,进一步证实CYLD能够负调控NF-κB信号通路。结论溃疡性结肠炎患者肠黏膜CYLD表达下调,CYLD可能通过负调控NF-κB信号通路影响UC的发病过程。

糖尿病性溃疡中核因子κB通路的作用机制及相关中药干预

由于糖尿病的发病率逐年增高,且常规现代医学治疗手段效果不甚理想,故近年大批学者将注意力集中于中医药治疗方案。核因子κB是炎症反应过程中的关键通路之一,可被多种因子激活诱发炎症瀑布链反应,影响溃疡创面恢复。本文总结近5年来国内外基于该通路的糖尿病性溃疡研究,并对代表性的中药药剂进行综述。

脑蛋白水解物联合长春西汀通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路治疗重症高血压性脑出血的疗效及机制

目的 探究脑蛋白水解物联合长春西汀通过Toll样受体(TLR)4/髓样分化因子(MyD)88/核因子(NF)-κB信号通路治疗重症高血压性脑出血的疗效及机制。方法 选择102例重症高血压性脑出血患者随机分为两组各51例,对照组给予复方丹参液治疗,实验组给予脑蛋白水解物联合长春西汀治疗。于治疗前后分别检测患者临床指标变化、神经功能评分;检测血清氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)变化;检测血清内皮功能指标人内皮素(ET)-1,血管内皮生长因子(VEGF)、神经生长因子(NGF)变化;检测TLR4/MyD88信号通路、TLR4、MyD88和核因子(NF)-κB水平。结果 治疗前两组临床指标、神经功能评分、血清SOD、GSH-Px、MDA、ET-1、VEGF、NGF、TLR4、MyD88、NF-κB水平无显著差异(P>0.05);治疗后,与对照组相比,实验组临床相关指标、美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)评分降低,格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分和Barthel指数评分升高,SOD和GSH-Px水平升高,MDA、ET-1水平降低,VEGF和NGF水平升高,TLR4、MyD88、NF-κB水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 脑蛋白水解物联合长春西汀可改善重症高血压性脑出血患者神经功能,其机制与降低氧化损伤和TLR4/MyD88/核因子(NF)-κB信号通路的调控有关。

血小板参数NF-κB IL-6水平检测与肝硬化患者合并上消化道出血病情及转归的关联性研究

目的:分析血小板参数、血清核因子-κB(NF-κB)、白介素-6(IL-6)水平与肝硬化患者合并上消化道出血病情及转归的关联性。方法:将2021年1月至2024年1月于本院就诊的155例肝硬化合并上消化道出血患者为研究对象,依据入院治疗前的失血量将其分为轻度组(n=70)和中重度组(n=85)。另外依据其病情转归情况分为预后良好组(n=122)与预后不良组(n=33),测定所有研究对象的血小板参数[血小板计数(PLT)、血小板平均体积(MPV)、血小板比容(PCT)、血小板分布宽度(PDW)]、血清NF-κB、IL-6水平,以Spearman秩相关性分析血小板参数、NF-κB、IL-6水平与肝硬化合并上消化道出血患者病情及转归的关联性。结果:中重度组的PLT、MPV、PCT、PDW、血清NF-κB、IL-6水平高于轻度组(P<0.05);预后不良组的PLT、MPV、PCT、PDW、血清NF-κB、IL-6水平高于预后良好组(P<0.05)。Spearman秩相关性分析显示,PLT、MPV、PCT、PDW、血清NF-κB、IL-6水平与肝硬化合并上消化道出血患者的病情严重程度均呈正相关(r=0.226,0.311,0.387,0.311,0.351,0.386,P<0.05)。结论:血小板参数、NF-κB、IL-6水平与肝硬化合并上消化道出血患者的病情及转归密切相关,早期检测血清上述指标可为临床评估病情及转归提供一定的参考依据。

拉考沙胺联合奥卡西平治疗局灶性癫痫的疗效及对脑电图频段功率、血清TLR-4、NF-κB水平影响

目的探讨拉考沙胺联合奥卡西平治疗局灶性癫痫的疗效及对患者脑电图频段功率、血清Toll样受体-4(TLR-4)、核转录因子-κB(NF-κB)水平影响。方法选取2022年1月至2023年2月本院收治的局灶性癫痫患者102例,根据随机数字表法分为基线组和试验组,每组51例。基线组采用奥卡西平治疗,试验组采用拉考沙胺联合奥卡西平治疗。两组均治疗6个月后评估疗效。比较两组患者治疗前、治疗6个月癫痫发作频率、脑电图频段功率,检测血清TLR-4、NF-κB水平。分析两组患者治疗6个月TLR-4、NF-κB水平与疗效的关系。统计两组患者治疗期间不良反应发生率。结果试验组治疗总有效率高于基线组(P<0.05)。治疗6个月,两组患者癫痫发作频率降低,且试验组低于基线组(P<0.05);两组α、β频段功率升高,δ、θ频段功率降低,且试验组变化幅度大于基线组(P<0.05)。治疗6个月,试验组、基线组TLR-4(r=-0.820、-0.666,P均<0.001)、NF-κB(r=-0.744、-0.643,P均<0.001)水平与疗效均呈负相关。治疗期间试验组不良反应发生率与基线组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论拉考沙胺联合奥卡西平治疗局灶性癫痫疗效显著,可有效改善患者脑电图频段功率,减少发作频率,且安全性有保障。

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨金雀异黄酮对膜性肾病大鼠肾损伤的影响

目的 探讨金雀异黄酮对膜性肾病大鼠肾损伤及Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法 从45只SD大鼠中随机取8只作为正常组,剩余大鼠采用尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)的方法构建膜性肾病模型。将32只成模大鼠随机分为模型组、金雀异黄酮组、瑞沙托维组和金雀异黄酮+瑞沙托维组,每组8只。金雀异黄酮组给予金雀异黄酮30 mg/kg腹腔注射,瑞沙托维组给予瑞沙托维10 mg/kg腹腔注射,金雀异黄酮+瑞沙托维组分别给予金雀异黄酮30 mg/kg和瑞沙托维10 mg/kg腹腔注射,均1次/d,干预4周。检测肾功能指标[24 h尿蛋白、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、血浆白蛋白];HE染色、Masson染色和透射电子显微镜观察肾组织病理学形态、胶原沉积情况及细胞超微结构;免疫荧光染色法观察肾组织中免疫球蛋白G(IgG)沉积情况;ELISA法检测肾组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;RT-PCR法检测肾组织中TLR4、NF-κB p65、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1)) mRNA表达情况,Western blot法检测肾组织中TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白、BUN、SCr水平均明显升高(P均<0.05),血浆白蛋白水平明显降低(P均<0.05);肾小球体积增大,肾小管细胞空泡样变,间质区炎性细胞浸润,间质区和肾小球大量胶原沉积,胶原容积分数明显升高(P<0.05);肾小球细胞肿胀,足突融合或消失,基底膜不规则增厚,上皮细胞下可见大量电子致密物沉积,IgG大量沉积;肾组织中IL-1β、IL-6、TNF-α水平及TLR4、NF-κB p65、TGF-β_(1) mRNA相对表达量和TLR4、NF-κB p65、TGF-β_(1)、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)、p-Smad2/3蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),肾组织中Smad7蛋白相对表达量明显降低(P<0.05)。与模型组比较,各药物组大鼠24 h尿蛋白、BUN、SCr水平均明显降低(P均<0.05),血浆白蛋白水平均明显升高(P均<0.05);肾组织病理学改变、细胞超微结构改变均明显减轻,胶原容积分数明显降低(P均<0.05),IgG沉积量明显减少;肾组织中IL-1β、IL-6、TNF-α水平及TLR4、NF-κB p65、TGF-β_(1) mRNA相对表达量和TLR4、NF-κB p65、TGF-β_(1)、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、p-Smad2/3蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),Smad7蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05)。与金雀异黄酮组和瑞沙托维组比较,金雀异黄酮+瑞沙托维组肾损伤更轻,各检测指标改善情况更明显(P均<0.05)。结论 金雀异黄酮可明显改善膜性肾病大鼠肾功能,减轻肾损伤,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路,减轻炎症反应和肾纤维化有关。

吴茱萸碱对溃疡性结肠炎大鼠HMGB1/TLR-4/NF-κB信号通路的影响

目的探究吴茱萸碱对溃疡性结肠炎(UC)大鼠高迁移率族蛋白(HMG)B1/Toll样受体(TLR)-4/核因子(NF)-κB信号通路的影响。方法制备UC模型采用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇混合法,将建模成功的50只SD大鼠随机分为5组(n=10),模型组、阳性对照组(0.6 g/kg柳氮磺吡啶片)和吴茱萸碱低、中、高(10、15、20 mg/kg吴茱萸碱)剂量组,另取健康SD大鼠10只为正常组。治疗1 w后,观察各组大鼠的一般情况、结肠组织形态学损伤,苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织的病理学损伤情况;酶联免疫吸附试验检测结肠组织匀浆液中白细胞介素(IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;Western印迹检测结肠组织中IL-6、IL-10、TNF-α、HMGB1、TLR-4、NF-κB p-p65、NF-κB p65蛋白表达水平。结果与正常组相比,模型组精神倦怠、嗜睡、大便黏腻、肛周污秽、体质量减轻,结肠黏膜明显出现充血、水肿、糜烂情况,肠黏膜损伤评分显著升高,杯状细胞数量减少,有大量炎症细胞浸润,肠长明显缩短、肠重显著增加(P<0.05),MDA、IL-6、TNF-α含量及IL-6、TNF-α、HMGB1、TLR-4、NF-κB p-p65/NF-κB p65蛋白表达水平显著升高,SOD含量及IL-10蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,阳性对照组和吴茱萸碱各剂量组一般情况明显好转,肠黏膜组织充血、水肿、糜烂情况减轻,肠黏膜损伤评分显著降低,杯状细胞数量增多、炎症细胞减少,肠长明显增长、肠重显著减轻(P<0.05),MDA、IL-6、TNF-α含量及IL-6、TNF-α、HMGB1、TLR-4、NF-κB p-p65/NF-κB p65蛋白表达水平显著降低,SOD含量及IL-10蛋白表达水平显著升高(P<0.05);吴茱萸碱高剂量组与阳性对照组以上指标无显著性差异(P>0.05);吴茱萸碱各剂量组随着剂量的升高,以上各个指标变化呈剂量依赖性(P<0.05)。结论吴茱萸碱能够缓解UC大鼠肠黏膜损伤,减轻结肠组织炎症反应、氧化应激水平,抑制HMGB1/TLR-4/NF-κB信号通路激活可能为其作用机制。

肠病药方调控PI3K/AKT/NF-κB信号通路改善溃疡性结肠炎的研究

目的探讨肠病药方调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/核因子kappa B(NF-κB)信号通路对抗溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法42只C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(n=6,Control组,自由饮去离子水)、模型组(n=12,DSS组)、美沙拉嗪组(n=12,MES组)及肠病药方组(n=12,CBD组),后3组小鼠自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液7 d诱导UC模型,后两组同期灌胃美沙拉嗪或肠病药方,前两组灌胃等体积去离子水;观察实验期间小鼠体质量改变,评测小鼠疾病活动指数(DAI);造模结束后麻醉处死小鼠,测量结肠长度、观察结肠内容物及黏膜,采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组小鼠结肠病理组织学变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠结肠组织匀浆白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,蛋白免疫印迹法(WB)检测各组小鼠结肠组织中磷酸化PI3K(p-PI3K)-p85、磷酸化AKT1(p-AKT1)、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)-p65蛋白表达,实时荧光定量PCR技术(qRT-PCT)检测各组小鼠结肠组织PI3K、AKT、NF-κB信使RNA(mRNA)表达水平。结果与DSS组比较,CBD组治疗后,有效缓解UC小鼠症状,粪便性状及便血情况改善,结肠黏膜炎症浸润减少,体质量下降有所缓解,DAI评分降低及结肠长度接近正常,结肠组织匀浆中IL-6、TNF-α表达降低(P<0.05),p-PI3K-p85、p-AKT1、p-NF-κB-p65蛋白及mRNA表达明显减少(P<0.05)。结论肠病药方可缓解UC小鼠的症状、减轻结肠黏膜损伤,其机制可能与调解结肠组织中PI3K/AKT/NF-κB信号通路中相关蛋白质及mRNA表达、降低结肠组织炎症因子表达有关。

紫草素对过敏性紫癜性肾炎小鼠肾功能、炎症及p38MAPK/NF-κB信号通路的影响

目的:探讨紫草素对过敏性紫癜性肾炎(HSPN)小鼠肾功能、炎症及p38MAPK/NF-κB信号通路的影响。方法:建立HSPN小鼠模型,将造模成功小鼠随机分为模型组、环磷酰胺组(给予环磷酰胺22 mg/kg)、紫草素低剂量组(给予紫草素5 mg/kg)、紫草素高剂量组(给予紫草素10 mg/kg),每组12只;另外取12只小鼠不进行处理,正常饲养作为对照组。各组小鼠给予相应药物干预28 d。全自动生化分析仪和酶联免疫吸附法分别检测小鼠肾功能和血清炎症指标;HE染色观察肾脏组织病理学变化;荧光定量PCR和蛋白印迹法分别检测肾脏组织中p38MAPK、NF-κB mRNA和蛋白表达。结果:对照组小鼠肾脏组织肾小管及肾小球结构清晰,无炎性细胞浸润、系膜增生情况;与对照组相比,模型组小鼠出现肾脏组织炎性细胞浸润、系膜增生现象严重,肾小管萎缩,肾小球血管网结构模糊、血管充血等病理损伤,血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、24 h尿液中尿蛋白(24 h UP)、血清白细胞介素(IL-6、IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、肾脏组织p38MAPK、NF-κB mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05);与模型组相比,环磷酰胺组、紫草素低、高剂量组小鼠肾脏组织炎性细胞浸润、肾小管上皮细胞空泡变性及肿胀等现象得到改善,SCr、BUN、24 h UP、血清IL-6、IL-1β、TNF-α、肾脏组织p38MAPK、NF-κB mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);紫草素高剂量组上述指标改善效果优于紫草素低剂量组(P<0.05)。结论:紫草素可改善HSPN小鼠肾功能和炎症反应,减轻肾脏病理损伤,其机制可能与抑制p38MAPK/NF-κB信号通路的激活有关。

中医药调控NF-κB信号通路治疗特应性皮炎的研究进展

目的:特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)是一种常见的炎症性皮肤疾病,其特征是反复湿疹和强烈的瘙痒,可能给患者的身心健康造成巨大的影响,是危害健康的最主要的皮肤疾患之一。核转录因子-κB(nuclear factorkappa B,NF-κB)是一类重要的转录因子,在先天免疫、适应性免疫及炎症反应中起关键作用。NF-κB被激活后可介导炎症因子的转录,并作为炎症反应的关键介质,控制各种促炎基因的表达,干预趋化因子和粘附分子等,能诱发AD发病或是加重病情。近年来,中医药在防治AD上取得了一定成果,具有明显的临床疗效。除了毒性较低外,中医药通常还含有多个活性成分,可以同时作用于多个靶点,产生叠加或协同作用,在不同环节上影响AD的发生和发展。基于中医药研究背景,该文查阅国内外相关文献,综述NF-κB信号通路的基本结构及其与AD的关系,中药提取物、中药单体及中药复方基于NF-κB信号通路预防和改善AD的研究现状,发现中医药通过调节NF-κB信号通路起到抑制炎症反应、调节免疫失衡、改善表皮屏障功能、减少氧化应激反应等作用,以期为防治AD的研究提供参考。

黄芪多糖通过NF-κB/IRF-3/IRF-7轴对自身免疫性炎性肌病大鼠免疫功能及炎性症状作用的研究

目的 探讨黄芪多糖对自身免疫性炎性肌病大鼠免疫功能及炎性症状的作用及其可能的作用机制。方法 构建自身免疫性炎性肌病大鼠模型,随机分为模型组、黄芪多糖低剂量组、黄芪多糖高剂量组(以下简称低剂量组、高剂量组)、阳性对照组,另设正常组。低剂量组、高剂量组分别灌胃黄芪多糖15、30 mL·kg^(-1)·d^(-1),阳性对照组灌胃甲基泼尼松龙5.4 mL·kg^(-1)·d^(-1),模型组和对照组灌胃等体积生理盐水,连续干预1个月。观察大鼠免疫后的一般状态;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察大鼠骨骼肌的病理变化;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测炎症细胞因子和免疫细胞因子的水平;全自动生化仪检测血清激酶指标;蛋白印记法(Western blotting)检测信号通路蛋白的表达量。结果 模型组大鼠骨骼肌损伤严重,存在明显间质病变,较大量炎症细胞浸润,骨骼肌肌细胞核内移;与模型组比较,低剂量组、高剂量组大鼠病理明显改善,低剂量组仍存在一定程度的间质水肿和炎症细胞浸润,高剂量组和阳性对照组间质水肿、炎症细胞浸润以及细胞核内移明显减轻。模型组、低剂量组、高剂量组、阳性对照组和正常组比较,大鼠血清肌酸激酶(creatine kinase,CK)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)和羟丁酸转移酶(hydroxybutyric acid dehydrogenase,HBDH)水平逐渐降低,血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素(interleukin,IL)-6水平逐渐降低,IL-4水平逐渐降低,干扰素-γ(interferon-γ,INF-γ)水平逐渐升高(P<0.05);模型组、低剂量组、高剂量组和正常组比较,大鼠骨骼肌磷酸化核因子κB p65(phosphorylated nuclear factor κB p65,p-NF-κB p65)、干扰素调节因子(interferon regulatory factor,IRF)-3和IRF-7蛋白表达量逐渐降低(P<0.05)。结论 黄芪多糖对自身免疫性炎性肌病大鼠有调节免疫功能、减轻炎性症状的作用,其作用机制可能与抑制NF-κB/IRF-3/IRF-7轴有关。

核因子-κB p65反义寡核苷酸对溃疡性结肠炎肠黏膜单个核细胞细胞因子表达的影响

探讨 NF- κB p6 5反义寡核苷酸对溃疡性结肠炎肠黏膜单个核细胞 NF- κB p6 5的表达以及对细胞因子释放的影响。3例溃疡性结肠炎患者 (未用过任何与溃疡性结肠炎治疗相关的药物 ,符合 1993年太原会议溃疡性结肠炎诊断标准 )的活检组织被用于固有层单个核细胞 (L PMC)的分离和培养 ,并用 NF- κB p6 5反义寡核苷酸 (A-SON:5 '- GGAACAGTTCGTCCATGG- 3')及错义寡核苷酸 (MSON:5 '- GGAACAGTTCGTCTATGG- 3')和地塞米松 (EDX)进行干预。采用 :1Western蛋白印迹分析检测 NF-κB p6 5蛋白表达情况 ;2逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR)检测 IL- 1βm RNA和 IL- 8m RNA的表达 ;3酶联免疫吸附试验 (EL ISA)测定 IL- 1β,IL- 8的分泌水平。结果显示 ,NF-κB p6 5反义寡核苷酸可明显减少 L PMC的 NF-κB p6 5表达 ,阻断 L PS刺激引起的 IL - 1βm RNA和 IL -8m RNA的表达的增强以及两种细胞因子分泌水平均的增高 ,其作用明显强于地塞米松 (P<0 .0 5 )。结论认为 :NF-κB p6 5反义寡核苷酸有可能作为治疗溃疡性结肠炎的新基因药物 。

核因子-κB在大鼠实验性溃疡性结肠炎肠组织的表达及其意义

目的:观察大鼠实验性溃疡性结肠炎肠组织核因子-κB(NF-κB)及TNF-α、ICAM-1的表达,探讨NF-κB在溃疡性结肠炎发病过程中的作用.方法:采用三硝基苯磺酸(TNBS)制备大鼠溃疡性结肠炎模型,设正常组、生理盐水组及轻、重模型组共4组.采用免疫组织化学染色检测肠组织NF-κB、TNF-α和ICAM-1表达,生化方法检测MPO含量,并分析NF-κB活性与肠道病理损伤指数、MPO含量、TNF-α及ICAM-1表达的关系.结果:溃疡性结肠炎大鼠肠组织中NF-κB活性,TNF-α、ICAM-1表达及MPO含量较正常组及生理盐水组显著增高(NF-κB:52.14±9.81、30.26±10.20,60.73±13.41、45.24±10.86vs13.31±4.76、16.95±6.83,11.61±4.85、14.10±5.76;TNF-α:74.50±11.20、48.11±5.95,84.09±14.52、53.40±8.79vs16.99±5.48、20.04±6.76,10.13±1.79、16.03±6.21;ICAM-1:68.15±7.25、44.34±7.54,77.69±8.09、47.01±8.82vs15.34±4.03、17.50±6.95,10.33±2.38、13.41±4.91;MPO:1.69±0.11,0.71±0.06vs0.39±0.07,0.31±0.08;P<0.01),且在病情严重组增高尤为明显.NF-κB表达水平与TNF-α和ICAM-1阳性细胞密度、MPO含量、肠道病理损伤指数呈显著正相关关系(r分别为0.9304,0.8680,0.6865,0.9292,0.8462;P<0.001或P<0.005).结论:NF-κB在溃疡性结肠炎发病过程中可能起重要作用.

核因子-κB活性在大鼠脑水肿的变化及热休克反应对其影响的研究

目的 研究核因子－κＢ（ＮＦ－κＢ） 在百日咳菌液致大鼠感染性脑水肿模型中的活性变化及热休克反应对其影响。方法 动物随机分为：①正常对照组（ＮＳ） ，②感染性脑水肿组（ＰＢ），③热休克处理组（ＨＳ＋ ＰＢ）。取左大脑半球全层脑组织分别测定脑组织含水量，干脑组织钠、钾离子含量；采用电泳迁移率改变法检测各组神经细胞核内ＮＦ－κＢＤＮＡ－ 蛋白结合物活性的变化并做密度扫描定量分析。结果 ＨＳ＋ ＰＢ各组脑组织含水量明显低于ＰＢ组（ Ｐ＜０ ．０１），ＨＳ＋ ＰＢ 各组Ｎａ＋ 含量明显低于ＰＢ组（Ｐ＜ ０．０１ 或Ｐ＜ ０．０５） ，Ｋ＋ 含量除２４ ｈ 之外，均明显高于ＰＢ组（ Ｐ＜０ ．０１） 。与正常对照组比较，２ ｈ 感染性脑水肿组ＮＦ－κＢ活性开始增加，并逐渐增高，以２４ ｈ 为最明显。热休克处理组各时相ＮＦ－ κＢ 活性均有不同程度减低。结论 大鼠感染性脑水肿时ＮＦ－ κＢ活性增加，热休克反应对大鼠感染性脑水肿的保护作用可能与抑制ＮＦ－κＢ的活性有关。